| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 缩略语表 | 第12-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-25页 |
| 1.1 TLRs信号通路 | 第14-16页 |
| 1.1.1 髓样分化因子（MyD88） | 第15页 |
| 1.1.2 TRIF | 第15-16页 |
| 1.1.3 冠状病毒与TLRs | 第16页 |
| 1.2 猪传染性胃肠炎病毒 | 第16-22页 |
| 1.2.1 TGEV的形态学特征 | 第16-17页 |
| 1.2.2 TGEV的生物学和理化特性 | 第17页 |
| 1.2.3 TGEV的基因组结构 | 第17-18页 |
| 1.2.4 冠状病毒蛋白组成与功能 | 第18-22页 |
| 1.3 新生儿Fc受体（FcRn） | 第22-25页 |
| 1.3.1 FcRn的功能 | 第22页 |
| 1.3.2 FcRn的结构 | 第22-23页 |
| 1.3.3 FcRn在体内的分布 | 第23页 |
| 1.3.4 FcRn与IgG的相互作用 | 第23-25页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 第3章 材料与方法 | 第26-39页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 3.1.1 毒株、菌株和细胞 | 第26页 |
| 3.1.2 细胞实验所用试剂 | 第26页 |
| 3.1.3 Western blot所需实验材料和试剂 | 第26页 |
| 3.1.4 细胞培养基及其配制 | 第26-27页 |
| 3.1.5 细菌培养基及其配制 | 第27页 |
| 3.1.6 质粒构建所用试剂和相关试剂盒 | 第27-28页 |
| 3.1.7 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第28-29页 |
| 3.1.8 主要实验仪器及设备 | 第29页 |
| 3.1.9 分子生物学分析软件 | 第29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-39页 |
| 3.2.1 质粒的提取 | 第29-31页 |
| 3.2.2 质粒及siRNA的转染（脂质体转染法） | 第31页 |
| 3.2.3 细胞总RNA的提取和反转录实验 | 第31-32页 |
| 3.2.4 蛋白表达质粒的构建 | 第32-34页 |
| 3.2.5 大肠杆菌（E. coli DH5α）感受态的制备 | 第34-35页 |
| 3.2.6 质粒和连接产物的转化 | 第35页 |
| 3.2.7 荧光定量RT-PCR检测基因mRNA水平 | 第35-36页 |
| 3.2.8 双荧光素酶检测实验 | 第36页 |
| 3.2.9 Western blot实验 | 第36-37页 |
| 3.2.10 猪传染性胃肠炎病毒的增殖 | 第37页 |
| 3.2.11 病毒滴度的测定 | 第37-38页 |
| 3.2.12 统计学方法 | 第38-39页 |
| 第4章 结果与分析 | 第39-60页 |
| 4.1 TGEV感染PK-15 和IPEC-J2细胞后对FcRn表达的影响 | 第39-41页 |
| 4.1.1 荧光定量RT-PCR实验检测 | 第39-40页 |
| 4.1.2 双荧光素酶报告系统实验检测 | 第40页 |
| 4.1.3 Western Blot检测 | 第40-41页 |
| 4.2 TGEV蛋白对PK-15 细胞FcRn表达的影响 | 第41-42页 |
| 4.2.1 双荧光检测UV-TGEV对细胞FcRn表达的影响 | 第41页 |
| 4.2.2 Western Blot检测 | 第41-42页 |
| 4.3 TGEV蛋白表达质粒的构建 | 第42-48页 |
| 4.3.1 结构蛋白和附属蛋白真核表达质粒的构建 | 第42-44页 |
| 4.3.2 非结构蛋白表达质粒的构建 | 第44-48页 |
| 4.4 探究促使细胞FcRn表达上调的TGEV结构蛋白 | 第48-50页 |
| 4.4.1 荧光定量RT-PCR实验检测 | 第49页 |
| 4.4.2 Western Blot检测 | 第49-50页 |
| 4.5 截短蛋白表达质粒的构建 | 第50-51页 |
| 4.6 截短蛋白对FcRn表达的影响 | 第51-55页 |
| 4.7 探究影响FcRn表达的非结构蛋白 | 第55-56页 |
| 4.8 探究促进FcRn表达上调的TLRs相关信号通路 | 第56-60页 |
| 4.8.1 Western Blot实验检测 | 第56-57页 |
| 4.8.2 siRNA干扰实验 | 第57-58页 |
| 4.8.3 荧光定量PCR检测TLRs的激活 | 第58-60页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第60-64页 |
| 5.1 TGEV感染细胞后影响FcRn表达的研究 | 第60页 |
| 5.2 TGEV蛋白对FcRn表达影响的研究 | 第60-61页 |
| 5.3 TGEV相关蛋白功能域的研究 | 第61-62页 |
| 5.4 TGEV激活相关TLRs的研究 | 第62-63页 |
| 5.5 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
