摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-23页 |
前言 | 第13页 |
1 卵泡的发育和闭锁 | 第13-17页 |
1.1 卵泡发育 | 第13-14页 |
1.2 卵泡闭锁 | 第14页 |
1.3 卵泡的发育和闭锁调控 | 第14-17页 |
1.3.1 激素类 | 第14-15页 |
1.3.2 生长因子 | 第15-16页 |
1.3.3 转录因子 | 第16页 |
1.3.4 死亡配体受体系统 | 第16-17页 |
1.3.5 其他因素 | 第17页 |
2 Aurora B | 第17-19页 |
2.1 Aurora B亚细胞定位 | 第18页 |
2.2 Aurora B功能 | 第18-19页 |
3 Aurora B与SUMO修饰 | 第19-21页 |
3.1 SUMO修饰 | 第19-20页 |
3.2 Aurora B与SUMO修饰 | 第20-21页 |
4 研究目的和意义 | 第21-23页 |
第二章 Aurora B对小鼠卵泡及其颗粒细胞发育的影响 | 第23-55页 |
1 引言 | 第23页 |
2 材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 材料、试剂 | 第23-24页 |
2.2 实验动物 | 第24页 |
2.3 溶液、缓冲液配制 | 第24-26页 |
2.4 主要仪器设备 | 第26页 |
2.5 方法 | 第26-37页 |
2.5.1 卵泡体外分离、处理和培养 | 第26-28页 |
2.5.2 颗粒细胞体外分离、处理和培养 | 第28-29页 |
2.5.3 免疫组织化学 | 第29-30页 |
2.5.4 免疫细胞化学 | 第30-31页 |
2.5.5 抑制剂处理 | 第31页 |
2.5.6 Western Blot | 第31-34页 |
2.5.7 qRT-PCR | 第34-35页 |
2.5.8 细胞周期检测 | 第35-36页 |
2.5.9 细胞增殖检测 | 第36页 |
2.5.10 细胞凋亡检测 | 第36页 |
2.5.11 统计学分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-49页 |
3.1 Aurora B在卵泡中的定位与表达 | 第37-39页 |
3.1.1 Aurora B在卵泡中的定位 | 第37页 |
3.1.2 Aurora B在卵泡中的表达 | 第37-39页 |
3.2 Aurora B在颗粒细胞中的定位与表达 | 第39-40页 |
3.2.1 Aurora B在颗粒细胞中的定位 | 第39页 |
3.2.2 Aurora B在颗粒细胞中的表达 | 第39-40页 |
3.3 Aurora B对卵泡发育的影响 | 第40-41页 |
3.4 Aurora B对颗粒细胞生长的影响 | 第41-45页 |
3.4.1 Aurora B对颗粒细胞周期的影响 | 第42-44页 |
3.4.2 Aurora B对颗粒细胞增殖的影响 | 第44页 |
3.4.3 Aurora B对颗粒细胞凋亡的影响 | 第44-45页 |
3.5 Aurora B对颗粒细胞的调控 | 第45-49页 |
3.5.1 调控m RNA水平 | 第46-47页 |
3.5.2 调控蛋白水平 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-54页 |
4.1 Aurora B在卵泡中的定位表达模式 | 第49-50页 |
4.2 Aurora B在颗粒细胞中的定位表达模式 | 第50-51页 |
4.3 Aurora B调控颗粒细胞的生长 | 第51-54页 |
4.3.1 Aurora B调控颗粒细胞的周期 | 第51页 |
4.3.2 Aurora B调控颗粒细胞的增殖 | 第51-52页 |
4.3.3 Aurora B调控颗粒细胞的凋亡 | 第52-54页 |
5 小结 | 第54-55页 |
第三章 Aurora B的SUMO修饰对小鼠颗粒细胞生长的影响 | 第55-86页 |
1 引言 | 第55-56页 |
2 材料与方法 | 第56-68页 |
2.1 材料、试剂 | 第56页 |
2.2 实验动物 | 第56页 |
2.3 溶液、缓冲液配制 | 第56-58页 |
2.4 主要仪器设备 | 第58-59页 |
2.5 方法 | 第59-68页 |
2.5.1 真核表达质粒构建 | 第59-66页 |
2.5.2 颗粒细胞培养 | 第66页 |
2.5.3 颗粒细胞传代 | 第66页 |
2.5.4 细胞转染 | 第66-67页 |
2.5.5 免疫共沉淀 | 第67页 |
2.5.6 免疫细胞化学 | 第67页 |
2.5.7 Western Blot | 第67页 |
2.5.8 细胞周期检测 | 第67页 |
2.5.9 细胞增殖检测 | 第67-68页 |
2.5.10 细胞凋亡检测 | 第68页 |
2.5.11 统计学分析 | 第68页 |
3 结果与分析 | 第68-81页 |
3.1 真核载体的构建 | 第68-71页 |
3.1.1 基因扩增 | 第68页 |
3.1.2 真核表达质粒构建及鉴定 | 第68-71页 |
3.2 SUMO修饰 | 第71-75页 |
3.2.1 内源性SUMO修饰 | 第72页 |
3.2.2 外源性SUMO修饰 | 第72-75页 |
3.3 SUMO修饰影响Aurora B的功能 | 第75-77页 |
3.3.1 SUMO修饰影响Aurora B的定位 | 第75-76页 |
3.3.2 SUMO修饰影响Aurora B的稳定性 | 第76-77页 |
3.4 SUMO对颗粒细胞的影响 | 第77-81页 |
3.4.1 SUMO影响颗粒细胞的周期 | 第77-79页 |
3.4.2 SUMO影响颗粒细胞的增殖 | 第79-80页 |
3.4.3 SUMO影响颗粒细胞的凋亡 | 第80-81页 |
4 讨论 | 第81-84页 |
4.1 成功构建真核表达质粒 | 第81页 |
4.2 Aurora B的SUMO修饰验证 | 第81-83页 |
4.3 SUMO2修饰调控Aurora B的功能 | 第83页 |
4.4 SUMO2修饰影响颗粒细胞的生长能力 | 第83-84页 |
5 小结 | 第84-86页 |
全文结论 | 第86-87页 |
创新与不足 | 第87-88页 |
参考文献 | 第88-106页 |
发表的主要论文 | 第106-107页 |
致谢 | 第107-108页 |