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睾酮调节巨噬细胞极化介导脂肪细胞分化与小鼠附睾脂肪积累

摘要第8-10页
Abstract第10-12页
缩略词表Abbreviation第13-15页
前言第15-31页
    1 睾酮概述第15-18页
        1.1 睾酮简介第15-16页
        1.2 睾酮与肥胖及相关疾病第16-17页
        1.3 睾酮的细胞内信号转导第17-18页
    2 巨噬细胞与极化概述第18-30页
        2.1 巨噬细胞极化简介第18-21页
        2.2 巨噬细胞极化的细胞内信号通路第21-26页
            2.2.1 PI3K/Akt信号通路第21-22页
            2.2.2 C-Jun N-terminal kinase (JNK) 信号通路第22-23页
            2.2.3 Notch信号通路第23-24页
            2.2.4 JAK/STAT信号通路第24-25页
            2.2.5 其他信号通路第25-26页
        2.3 脂肪组织巨噬细胞(ATMs)与脂肪代谢第26-30页
    3 本研究的目的与意义第30-31页
材料与方法第31-44页
    1 试验仪器及材料第31-33页
        1.1 主要仪器设备第31页
        1.2 主要试剂第31-32页
        1.3 主要溶液配制第32-33页
        1.4 试验动物第33页
    2 试验方法第33-43页
        2.1 RAW264.7 巨噬细胞的培养与处理第33-34页
        2.2 3T3-L1细胞的培养与诱导分化程序第34页
        2.3 特异性siRNA抑制Akt1与Akt2第34-35页
        2.4 3T3-L1细胞油红O染色第35页
        2.5 细胞总RNA提取第35-36页
        2.6 总RNA的逆转录第36-37页
        2.7 RT-qPCR检测细胞因子相对表达水平第37-38页
        2.8 Western blot第38-40页
            2.8.1 样品的制备第38-39页
            2.8.2 SDS-PAGE电泳第39页
            2.8.3 Western blot检测第39-40页
        2.9 LHR多肽注射剂的制备与试验动物的饲养与处理第40页
        2.10 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清LHR多肽抗体水平第40-41页
        2.11 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清睾酮水平第41页
        2.12 石蜡切片的制备第41页
        2.13 组织切片HE染色第41页
        2.14 组织切片免疫组织化学染色第41-43页
    3 数据统计与处理第43-44页
结果与分析第44-75页
    1 检测睾酮对 3T3-L1前脂肪细胞分化的影响第44-48页
    2 检测睾酮能否引起RAW264.7 巨噬细胞极化第48-49页
    3 检测睾酮对RAW264.7 巨噬细胞M1与M2a型极化的作用第49-53页
    4 检测雄激素受体在睾酮对RAW264.7 巨噬细胞极化调节中的作用第53-58页
    5 检测Gai蛋白通路在睾酮对RAW264.7 巨噬细胞极化调节中的作用第58-61页
    6 检测PTX处理后RAW264.7 巨噬细胞Akt S~(473)位点磷酸化水平第61-62页
    7 检测特异性抑制Akt1与Akt2对RAW264.7 巨噬细胞极化的影响第62-64页
    8 检测含有睾酮的RAW264.7 巨噬细胞极化条件培养基对 3T3-L1前脂肪细胞分化的影响第64-68页
    9 检测注射LHR多肽后,小鼠血清抗体与睾酮水平第68-69页
    10 小鼠附睾白色脂肪形态学观察与HE染色切片观察第69-72页
    11 免疫组化染色检测附睾白色脂肪组织中巨噬细胞类型第72-75页
讨论第75-83页
    1 睾酮对巨噬细胞极化的调节作用第75-77页
        1.1 睾酮对巨噬细胞M1型极化的抑制作用第75-76页
        1.2 睾酮对巨噬细胞M2a型极化的促进作用第76-77页
    2 雄激素受体不是睾酮对巨噬细胞调节作用的关键靶点第77-78页
    3 Gai与Akt蛋白是睾酮对巨噬细胞调节作用中的重要通路第78-80页
        3.1 Gai蛋白介导睾酮对巨噬细胞极化的调节第78页
        3.2 Akt S~(473)位点磷酸化水平分析第78-80页
    4 睾酮对 3T3-L1前脂肪细胞分化的影响第80-81页
        4.1 睾酮对 3T3-L1细胞分化无显著的直接影响第80页
        4.2 睾酮通过巨噬细胞极化培养基间接作用于 3T3-L1细胞分化第80-81页
    5 低血清睾酮对小鼠附睾白色脂肪的影响分析第81-83页
        5.1 低血清睾酮造成小鼠附睾白色脂肪肥大第81页
        5.2 脂肪组织中巨噬细胞极化表型分析第81-83页
结论第83-84页
参考文献第84-105页
附录第105-106页
致谢第106-107页

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