| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表(Abbreviation) | 第12-16页 |
| 第1章 文献综述 | 第16-38页 |
| 1.1 模式识别受体及接头蛋白 | 第16-29页 |
| 1.1.1 NLRs在IRF3和NF-κB信号通路中的功能 | 第17-21页 |
| 1.1.2 LUBAC在IRF3和NF-κB信号通路中的功能 | 第21-26页 |
| 1.1.3 DExD/H helicases在IRF3和NF-κB信号通路中的功能 | 第26-29页 |
| 1.2 PRRSV调控IRF3和NF-κB信号通路的机制 | 第29-34页 |
| 1.2.1 PRRSV的病原特征 | 第29-31页 |
| 1.2.2 PRRSV调控IRF3和NF-κB信号通路的机制 | 第31-34页 |
| 1.3 其他病毒调控IRF3和NF-κB信号通路的机制 | 第34-38页 |
| 第2章 研究目的与意义 | 第38-39页 |
| 第3章 材料与方法 | 第39-55页 |
| 3.1 试验材料 | 第39-45页 |
| 3.1.1 细胞、毒株与菌株 | 第39页 |
| 3.1.2 载体与质粒 | 第39-41页 |
| 3.1.3 工具酶及主要试剂 | 第41页 |
| 3.1.4 Western Blot所需材料 | 第41-42页 |
| 3.1.5 培养基与抗生素及其配制 | 第42页 |
| 3.1.6 主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第42-44页 |
| 3.1.7 主要实验仪器及设备 | 第44页 |
| 3.1.8 分子生物学分析软件 | 第44-45页 |
| 3.2 试验方法 | 第45-55页 |
| 3.2.1 PRRSV的增殖 | 第45页 |
| 3.2.2 病毒滴度的测定 | 第45页 |
| 3.2.3 真核表达质粒的构建 | 第45-49页 |
| 3.2.4 脂质体介导的转染 | 第49-50页 |
| 3.2.5 免疫共沉淀及Western Blot | 第50-52页 |
| 3.2.6 SYBR Green Ⅰ实时定量PCR | 第52-53页 |
| 3.2.7 相对mRNA表达水平的计算 | 第53-54页 |
| 3.2.8 双荧光素酶检测实验 | 第54页 |
| 3.2.9 荧光共聚焦检测蛋白质的亚细胞定位 | 第54页 |
| 3.2.10 统计学方法 | 第54-55页 |
| 第4章 结果与分析 | 第55-78页 |
| 4.1 PRRSV通过NOD2激活NF-κB信号转导的机制 | 第55-62页 |
| 4.1.1 部分NLR家族蛋白在PRRSV感染MARC-145细胞后的表达谱 | 第55-56页 |
| 4.1.2 PRRSV感染在蛋白水平上上调NOD2的表达 | 第56-57页 |
| 4.1.3 PRRSV感染上调RIP2表达并诱导其磷酸化 | 第57-58页 |
| 4.1.4 NOD2-RIP2参与PRRSV诱导NF-κB和MAPK信号通路的激活 | 第58-60页 |
| 4.1.5 干扰NOD2或RIP2抑制PRRSV诱导的炎症因子表达 | 第60页 |
| 4.1.6 PRRSV感染PAM后上调NOD2和RIP2的表达 | 第60-62页 |
| 4.2 PRRSV通过DHX36激活NF-κB信号转导的机制 | 第62-69页 |
| 4.2.1 PRRSV感染上调DHX36表达 | 第62-63页 |
| 4.2.2 PRRSV感染促进DHX36从细胞核向细胞浆转定位 | 第63-64页 |
| 4.2.3 超表达和干扰DHX36不影响PRRSV增殖 | 第64-65页 |
| 4.2.4 DHX36-MyD88参与PRRSV诱导的NF-κB信号通路激活 | 第65-67页 |
| 4.2.5 DHX36参与N蛋白诱导的NF-κB信号通路激活 | 第67-69页 |
| 4.3 nsp1α抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导的机制 | 第69-78页 |
| 4.3.1 PRRSV感染早期抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导 | 第69-71页 |
| 4.3.2 超表达nsp1α抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导 | 第71-72页 |
| 4.3.3 nsp1α抑制LUBAC诱导的NF-κB信号转导依赖CTE结构域 | 第72-73页 |
| 4.3.4 nsp1α抑制NEMO发生Met1-polyUb修饰 | 第73-75页 |
| 4.3.5 nsp1α通过与HOIP和HOIL-1L互作抑制HOIP招募SHARPIN | 第75-76页 |
| 4.3.6 PRRSV感染抑制HOIP-SHARPIN之间的结合 | 第76-78页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第78-84页 |
| 5.1 讨论 | 第78-83页 |
| 5.1.1 PRRSV通过NOD2激活NF-κB信号转导 | 第78-80页 |
| 5.1.2 DHX36识别PRRSV N蛋白，激活NF-κB信号转导 | 第80-81页 |
| 5.1.3 nspla蛋白通过靶向LUBAC抑制NF-κB信号转导 | 第81-83页 |
| 5.2 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
| 附录 | 第112-113页 |
