| 导师评阅表 | 第3-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词及英汉对照 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-29页 |
| 1.1 蚜虫的生物学性状 | 第13-14页 |
| 1.1.1 蚜虫的种类和分布 | 第13页 |
| 1.1.2 棉蚜形态特征 | 第13页 |
| 1.1.3 棉蚜发病特点 | 第13-14页 |
| 1.1.4 棉蚜危害症状 | 第14页 |
| 1.2 蚜虫的传统防治措施 | 第14-15页 |
| 1.2.1 化学防治措施 | 第14页 |
| 1.2.2 农业防治措施 | 第14-15页 |
| 1.2.3 生物防治措施 | 第15页 |
| 1.3 植物基因工程抗虫 | 第15-18页 |
| 1.3.1 Bt 抗虫基因 | 第15-16页 |
| 1.3.2 蛋白酶抑制剂 | 第16-17页 |
| 1.3.3 植物凝集素类 | 第17页 |
| 1.3.4 α-淀粉酶抑制剂 | 第17页 |
| 1.3.5 昆虫几丁质酶 | 第17-18页 |
| 1.3.6 植物代谢酶 | 第18页 |
| 1.3.7 杀虫病毒 | 第18页 |
| 1.4 RNA 技术抗虫 | 第18-21页 |
| 1.4.1 RNAi 的发现 | 第18-19页 |
| 1.4.2 RNA 干扰作用 | 第19页 |
| 1.4.3 RNAi 特点 | 第19-20页 |
| 1.4.4 RNAi 途径 | 第20-21页 |
| 1.5 抗蚜虫基因工程研究现状 | 第21-23页 |
| 1.6 昆虫 RNAi 研究 | 第23-26页 |
| 1.6.1 昆虫吸收双链 RNA 的机制 | 第23-25页 |
| 1.6.2 在昆虫摄取机制的组件 | 第25-26页 |
| 1.6.3 昆虫 RNAi 研究方法 | 第26页 |
| 1.7 利用 RNAi 培育具有抗虫性转基因植物的研究 | 第26-27页 |
| 1.8 相关基因介绍 | 第27-29页 |
| 1.8.1 核糖体蛋白 Ribosomal protein L18（R18） | 第27-28页 |
| 1.8.2 蛋白酶 B 基因 Cathepin B | 第28页 |
| 1.8.3 V-ATPase-A 基因 | 第28-29页 |
| 第二章 材料与方法 | 第29-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第29页 |
| 2.1.2 载体与菌株 | 第29-30页 |
| 2.1.3 引物 | 第30页 |
| 2.1.4 试剂及药品 | 第30页 |
| 2.1.5 实验仪器与设备 | 第30-31页 |
| 2.1.6 DNA 提取 buffer | 第31页 |
| 2.1.7 质粒提取溶液 | 第31页 |
| 2.1.8 细菌培养基 | 第31页 |
| 2.1.9 植物培养基 | 第31-32页 |
| 2.1.10 生化试剂配制 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-38页 |
| 2.2.1 农杆菌鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.2 拟南芥种子消毒及播种 | 第33-34页 |
| 2.2.3 拟南芥的遗传转化 | 第34页 |
| 2.2.4 转基因拟南芥筛选及 PCR 鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.5 转基因拟南芥纯系筛选 | 第35页 |
| 2.2.6 拟南芥总 RNA 的提取 | 第35页 |
| 2.2.7 蚜虫总 RNA 的提取 | 第35-36页 |
| 2.2.8 总 RNA 中的 DNA 消化 | 第36页 |
| 2.2.9 RNA 反转录 cDNA | 第36页 |
| 2.2.10 实时荧光定量 PCR 分析 | 第36页 |
| 2.2.11 拟南芥接种蚜虫实验 | 第36-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-51页 |
| 3.0 农杆菌的鉴定 | 第38页 |
| 3.1 转基因拟南芥阳性植株的筛选和获得 | 第38-41页 |
| 3.1.1 转干扰载体 pBi35SC5 的拟南芥的获得和鉴定 | 第38-39页 |
| 3.1.2 转干扰载体 pBi35SR18 的拟南芥的获得和鉴定 | 第39-40页 |
| 3.1.3 转干扰载体 pBi35SVA2 的拟南芥的获得和鉴定 | 第40-41页 |
| 3.2 纯合子的筛选 | 第41-42页 |
| 3.3 RNA 的提取 | 第42-43页 |
| 3.3.1 转干扰载体 pBi35SC5 拟南芥的总 RNA 提取 | 第42页 |
| 3.3.2 转干扰载体 pBi35SR18 拟南芥的总 RNA 提取 | 第42-43页 |
| 3.3.3 转干扰载体 pBi35SVA2 拟南芥的总 RNA 提取 | 第43页 |
| 3.4 转基因拟南芥转录水平表达分析 | 第43-45页 |
| 3.4.1 转干扰载体 pBi35SC5 拟南芥的转录水平表达分析 | 第43-44页 |
| 3.4.2 转干扰载体 pBi35SR18 拟南芥的转录水平表达分析 | 第44页 |
| 3.4.3 转干扰载体 pBi35SVA2 拟南芥的转录水平表达分析 | 第44-45页 |
| 3.5 喂食转基因拟南芥蚜虫体内基因的表达 | 第45-48页 |
| 3.5.1 取食转干扰载体 pBi35SC5 纯合子拟南芥的蚜虫 Cath5 基因表达水平分析 | 第45-46页 |
| 3.5.2 取食转干扰载体 pBi35SR18 纯合子拟南芥的蚜虫 Ribosomal protein L18 基因表达水平分析 | 第46-47页 |
| 3.5.3 取食转干扰载体 pBi35SVA2 纯合子拟南芥的蚜虫 V-ATPase-A 基因表达水平分析 | 第47-48页 |
| 3.6 蚜虫饲喂实验 | 第48-51页 |
| 3.6.1 蚜虫饲喂转干扰载体 pBi35SC5 纯合子拟南芥 | 第48-49页 |
| 3.6.2 蚜虫饲喂转干扰载体 pBi35SR18 纯合子拟南芥 | 第49-50页 |
| 3.6.3 蚜虫饲喂转干扰载体 pBi35SVA2 纯合子拟南芥 | 第50-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-52页 |
| 第六章 讨论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
