| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 综述 | 第11-27页 |
| 1.1 放线菌及海洋放线菌 | 第11-13页 |
| 1.1.1 放线菌 | 第11页 |
| 1.1.2 海洋放线菌 | 第11-13页 |
| 1.2 非核糖体多肽(NRPs)与非核糖体多肽合成酶(NRPSs) | 第13-15页 |
| 1.2.1 非核糖体多肽 | 第13页 |
| 1.2.2 非核糖体多肽合成酶(NRPSs) | 第13-15页 |
| 1.3 小分子物质与蛋白质之间的相互作用及其研究方法 | 第15-26页 |
| 1.3.1 小分子物质与蛋白质之间的相互作用 | 第15页 |
| 1.3.2 研究小分子物质和蛋白质之间相互作用的方法 | 第15-26页 |
| 1.4 本课题的研究目的和意义 | 第26-27页 |
| 第二章 材料与方法 | 第27-38页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第27-33页 |
| 2.1.1 实验菌株、质粒 | 第27页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.3 实验试剂的配制 | 第28-32页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.5 主要分子生物学数据库和软件 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-38页 |
| 2.2.1 Sare0718的生物信息学分析 | 第33页 |
| 2.2.2 融合蛋白GST-Sare0718的诱导表达 | 第33-36页 |
| 2.2.3 荧光淬灭法(fluorescence quenching,FQ)筛选海洋放线菌S.arenicolaCNS-205 NRPA domain的特异性底物 | 第36-37页 |
| 2.2.3.1 最大激发波长及发射波长范围的确定 | 第36-37页 |
| 2.2.3.2 荧光淬灭法筛选海洋放线菌S.arenicola CNS-205 NRP A domain的特异性底物 | 第37页 |
| 2.2.4 等温滴定量热法(isothermal titration calorimetry,ITC)筛选海洋放线菌S.arenicola CNS-205 NRPA domain的特异性底物 | 第37-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-55页 |
| 3.1 Sare0718的生物信息学分析 | 第38-39页 |
| 3.1.1 分析Sare0718的基本理化性质 | 第38页 |
| 3.1.2 分析融合蛋白Sare0718的疏水性、跨膜区、二级结构组成、关键结构域及信号肽 | 第38-39页 |
| 3.1.3 预测蛋白Sare0718的特异性底物 | 第39页 |
| 3.2 融合蛋白GST-Sare0718的表达、纯化及Western blotting鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3 荧光淬灭法筛选海洋放线菌S.arenicola CNS-205 NRP A domain的特异性底物 | 第40-53页 |
| 3.3.1 确定融合蛋白GST-Sare0718的激发波长和发射波长 | 第40-42页 |
| 3.3.2 荧光淬灭法筛选海洋放线菌S.arenicola CNS-205 NRP A domain的特异性底物 | 第42-53页 |
| 3.3.3 天冬氨酸(Asp)、谷氨酰胺(Gln)与融合蛋白GST-Sare0718相互作用的结合常数Ka和结合位点数n | 第53页 |
| 3.4 等温滴定量热法筛选海洋放线菌S.arenicola CNS-205 NRP A domain的特异性底物 | 第53-55页 |
| 第四章 论文总结 | 第55-58页 |
| 4.1 讨论 | 第55-56页 |
| 4.2 总结 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
