| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 一、引言 | 第13-27页 |
| 1.1 植物表皮毛发育及其调控机制 | 第13-18页 |
| 1.1.1 植物表皮毛的概述 | 第13页 |
| 1.1.2 拟南芥中的表皮毛 | 第13-14页 |
| 1.1.3 植物表皮毛发育的分子调控机制 | 第14-17页 |
| 1.1.4 棉花中的种子表皮毛 | 第17-18页 |
| 1.2 棉花纤维发育及其分子调控机制 | 第18-22页 |
| 1.2.1 棉纤维的概述 | 第18页 |
| 1.2.2 棉纤维发育的分子调控机制 | 第18-22页 |
| 1.3 蓝铜蛋白 | 第22-26页 |
| 1.3.1 蓝铜蛋白概述 | 第22-24页 |
| 1.3.2 植物蓝铜蛋白 | 第24-26页 |
| 1.4 立题依据及研究意义 | 第26-27页 |
| 二、材料与方法 | 第27-46页 |
| 2.1 实验材料 | 第27-32页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 载体和菌种 | 第27页 |
| 2.1.3 化学试剂及工具酶 | 第27页 |
| 2.1.4 常用储液及试剂 | 第27-29页 |
| 2.1.5 常用缓冲液 | 第29页 |
| 2.1.6 常用培养基 | 第29-30页 |
| 2.1.7 常用试剂盒 | 第30-31页 |
| 2.1.8 PCR引物合成及测序 | 第31页 |
| 2.1.9 仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-46页 |
| 2.2.1 农杆菌介导的拟南芥、棉花的遗传转化 | 第32-34页 |
| 2.2.2 观察GFP荧光判断转基因愈伤细胞中GhBCP4的亚细胞定位 | 第34页 |
| 2.2.3 拟南芥基因组的提取 | 第34页 |
| 2.2.4 GhBCP4过量表达转基因拟南芥的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.2.5 拟南芥总RNA的提取 | 第35页 |
| 2.2.6 RNA的消化及逆转录 | 第35-36页 |
| 2.2.7 拟南芥莲座叶表皮毛的表型统计及洗脱方法 | 第36-37页 |
| 2.2.8 高盐低渗法提取棉花基因组 | 第37-38页 |
| 2.2.9 RDL1启动子驱动的GhBCP4RNAi载体的构建 | 第38-41页 |
| 2.2.10 转基因棉花的鉴定 | 第41-42页 |
| 2.2.11 10DPA棉纤维材料的收取 | 第42页 |
| 2.2.12 10DPA棉纤维RNA的提取 | 第42页 |
| 2.2.13 棉花RNA的消化和逆转录 | 第42-43页 |
| 2.2.14 Q-RT PCR分析GhBCP4、GhBCP2在RNAi转基因棉花中的表达变化 | 第43-44页 |
| 2.2.15 GhBCP4启动子克隆鉴定 | 第44-46页 |
| 三、实验结果 | 第46-63页 |
| 3.1 GhBCP4蛋白亚细胞定位 | 第46页 |
| 3.2 GhBCP4启动子克隆鉴定 | 第46-49页 |
| 3.2.1 GhBCP4启动子分离及序列分析 | 第46-48页 |
| 3.2.2 GhBCP4启动子活性分析 | 第48-49页 |
| 3.3 GhBCP4过量表达转基因拟南芥的鉴定及表型分析 | 第49-52页 |
| 3.3.1 GhBCP4过量表达转基因拟南芥的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3.2 GhBCP4过量表达转基因拟南芥的表型分析 | 第50-52页 |
| 3.4 GhBCP4转基因棉花的鉴定及表型分析 | 第52-63页 |
| 3.4.1 CaMV 35S启动子驱动的GhBCP4 RNAi转基因棉花的表型分析 | 第52-59页 |
| 3.4.2 RDL1启动子驱动的GhBCP4 RNAi载体的构建及棉花遗传转化 | 第59-62页 |
| 3.4.3 CaMV 35s启动子驱动的GhBCP4过量表达转基因棉花鉴定 | 第62-63页 |
| 四、讨论 | 第63-66页 |
| 4.1 GhBCP4蛋白亚细胞定位 | 第63-64页 |
| 4.2 GhBCP4启动子序列中的顺式作用元件分析 | 第64页 |
| 4.3 GhBCP4促进棉纤维细胞的伸长发育 | 第64-65页 |
| 4.4 GhBCP4促进棉纤维伸长的可能调控机制 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 附录 | 第75-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
