摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5页 |
缩略词表 | 第6-9页 |
1 前言 | 第9-20页 |
1.1 木薯的生物学特性 | 第9-10页 |
1.2 我国木薯的生产栽培现状 | 第10页 |
1.3 淀粉合成的相关理论及其关键酶 | 第10-16页 |
1.3.1 淀粉的合成途径 | 第10-12页 |
1.3.2 淀粉的结构和用途 | 第12-13页 |
1.3.3 淀粉合成的关键酶及研究进展 | 第13-16页 |
1.3.4 转基因技术在作物淀粉改良的应用 | 第16页 |
1.4 RNA干扰技术 | 第16-19页 |
1.4.1 RNA干扰的机制与优势 | 第16-18页 |
1.4.2 RNA干扰技术的运用 | 第18-19页 |
1.5 研究目的和意义 | 第19-20页 |
2 试验材料与方法 | 第20-42页 |
2.1 试验材料 | 第20-22页 |
2.1.1 供试木薯品种 | 第20页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第20-22页 |
2.2 主要试剂和仪器 | 第22-23页 |
2.2.1 试剂 | 第22页 |
2.2.2 试验仪器 | 第22页 |
2.2.3 主要试剂的配制 | 第22-23页 |
2.3 试验方法 | 第23-40页 |
2.3.1 木薯不同生育期块根淀粉分支酶(SBE)活性的测定 | 第23-24页 |
2.3.2 木薯各个生育期块根的总淀粉含量、直链淀粉和支链淀粉含量的测定 | 第24-26页 |
2.3.3 木薯植物组织RNA的提取及检测 | 第26-28页 |
2.3.4 木薯淀粉分支酶基因sbei的克隆 | 第28-32页 |
2.3.5 木薯淀粉分支酶基因sbei的荧光定量PCR分析 | 第32-34页 |
2.3.6 木薯淀粉分支酶基因sbei的RNA干扰载体构建 | 第34-40页 |
2.4 技术路线 | 第40-41页 |
2.5 数据分析 | 第41-42页 |
3 结果与分析 | 第42-60页 |
3.1 木薯块根淀粉分支酶(SBE)活性的变化分析 | 第42-43页 |
3.2 木薯块根总淀粉、直链和支链淀粉含量的变化分析 | 第43-45页 |
3.3 木薯总RNA的检测 | 第45-46页 |
3.3.1 RNA的检测 | 第45-46页 |
3.4 目的基因的克隆与分析 | 第46-50页 |
3.4.1 sbei基因的扩增与克隆 | 第46-47页 |
3.4.2 辐选01和华南124中sbei基因序列的差异分析 | 第47页 |
3.4.3 sbei基因同源性比对及序列分析 | 第47-50页 |
3.5 木薯淀粉分支酶基因sbei的表达分析 | 第50-57页 |
3.5.1 辐选01和华南124在不同的生长期叶、茎、根RNA的检测 | 第50-51页 |
3.5.2 木薯sbei在不同组织间的表达差异 | 第51-53页 |
3.5.3 木薯sbei在不同品种间的表达差异 | 第53-57页 |
3.6 木薯淀粉分支酶基因sbei的RNA干扰载体构建 | 第57-60页 |
3.6.1 RNA干扰片段的扩增与克隆 | 第57-58页 |
3.6.2 中间载体pKANNIBAL-RNAi-AB的酶切鉴定 | 第58-59页 |
3.6.3 植物表达载体PART27-RNAi的酶切鉴定 | 第59-60页 |
4 讨论 | 第60-63页 |
4.1 木薯淀粉分支酶(SBE)活性与淀粉合成的关系 | 第60页 |
4.2 木薯淀粉分支酶基因sbei的克隆 | 第60-61页 |
4.3 木薯淀粉分支酶基因sbei的表达与淀粉合成的关系 | 第61-62页 |
4.4 木薯淀粉分支酶基因sbei的RNA干扰载体构建 | 第62页 |
4.5 研究结果在木薯育种中的应用价值 | 第62-63页 |
5 结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
附录 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第71页 |