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木薯淀粉分支酶基因sbei的克隆、表达分析及RNAi载体构建

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
缩略词表第6-9页
1 前言第9-20页
    1.1 木薯的生物学特性第9-10页
    1.2 我国木薯的生产栽培现状第10页
    1.3 淀粉合成的相关理论及其关键酶第10-16页
        1.3.1 淀粉的合成途径第10-12页
        1.3.2 淀粉的结构和用途第12-13页
        1.3.3 淀粉合成的关键酶及研究进展第13-16页
        1.3.4 转基因技术在作物淀粉改良的应用第16页
    1.4 RNA干扰技术第16-19页
        1.4.1 RNA干扰的机制与优势第16-18页
        1.4.2 RNA干扰技术的运用第18-19页
    1.5 研究目的和意义第19-20页
2 试验材料与方法第20-42页
    2.1 试验材料第20-22页
        2.1.1 供试木薯品种第20页
        2.1.2 菌株与载体第20-22页
    2.2 主要试剂和仪器第22-23页
        2.2.1 试剂第22页
        2.2.2 试验仪器第22页
        2.2.3 主要试剂的配制第22-23页
    2.3 试验方法第23-40页
        2.3.1 木薯不同生育期块根淀粉分支酶(SBE)活性的测定第23-24页
        2.3.2 木薯各个生育期块根的总淀粉含量、直链淀粉和支链淀粉含量的测定第24-26页
        2.3.3 木薯植物组织RNA的提取及检测第26-28页
        2.3.4 木薯淀粉分支酶基因sbei的克隆第28-32页
        2.3.5 木薯淀粉分支酶基因sbei的荧光定量PCR分析第32-34页
        2.3.6 木薯淀粉分支酶基因sbei的RNA干扰载体构建第34-40页
    2.4 技术路线第40-41页
    2.5 数据分析第41-42页
3 结果与分析第42-60页
    3.1 木薯块根淀粉分支酶(SBE)活性的变化分析第42-43页
    3.2 木薯块根总淀粉、直链和支链淀粉含量的变化分析第43-45页
    3.3 木薯总RNA的检测第45-46页
        3.3.1 RNA的检测第45-46页
    3.4 目的基因的克隆与分析第46-50页
        3.4.1 sbei基因的扩增与克隆第46-47页
        3.4.2 辐选01和华南124中sbei基因序列的差异分析第47页
        3.4.3 sbei基因同源性比对及序列分析第47-50页
    3.5 木薯淀粉分支酶基因sbei的表达分析第50-57页
        3.5.1 辐选01和华南124在不同的生长期叶、茎、根RNA的检测第50-51页
        3.5.2 木薯sbei在不同组织间的表达差异第51-53页
        3.5.3 木薯sbei在不同品种间的表达差异第53-57页
    3.6 木薯淀粉分支酶基因sbei的RNA干扰载体构建第57-60页
        3.6.1 RNA干扰片段的扩增与克隆第57-58页
        3.6.2 中间载体pKANNIBAL-RNAi-AB的酶切鉴定第58-59页
        3.6.3 植物表达载体PART27-RNAi的酶切鉴定第59-60页
4 讨论第60-63页
    4.1 木薯淀粉分支酶(SBE)活性与淀粉合成的关系第60页
    4.2 木薯淀粉分支酶基因sbei的克隆第60-61页
    4.3 木薯淀粉分支酶基因sbei的表达与淀粉合成的关系第61-62页
    4.4 木薯淀粉分支酶基因sbei的RNA干扰载体构建第62页
    4.5 研究结果在木薯育种中的应用价值第62-63页
5 结论第63-64页
参考文献第64-69页
附录第69-70页
致谢第70-71页
攻读学位期间发表论文情况第71页

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