摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
1 引言 | 第14-22页 |
1.1 禽网状内皮组织增生病(RE)概述 | 第14页 |
1.2 禽网状内皮组织增生病病毒(REV)及其研究进展 | 第14-18页 |
1.2.1 REV分类学 | 第14页 |
1.2.2 REV基因组、蛋白结构及其遗传学特点 | 第14-15页 |
1.2.3 REV流行病学 | 第15-16页 |
1.2.4 REV混合感染 | 第16页 |
1.2.5 REV感染动物临诊主要症状及病理变化 | 第16-17页 |
1.2.6 REV感染动物免疫抑制机制 | 第17页 |
1.2.7 REV与肿瘤 | 第17-18页 |
1.2.8 REV的公共卫生意义及预防措施 | 第18页 |
1.3 细胞周期及其研究进展 | 第18-19页 |
1.3.1 细胞周期概述 | 第18-19页 |
1.4 细胞周期素及其研究进展 | 第19-21页 |
1.4.1 细胞周期素概述 | 第19-20页 |
1.4.2 Cyclin D1及其研究进展 | 第20-21页 |
1.5 本项目研究的目的与意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-33页 |
2.1 实验材料 | 第22-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第22页 |
2.1.2 REV毒株 | 第22页 |
2.1.3 主要生物制剂及化学试剂 | 第22-23页 |
2.1.4 主要仪器与设备 | 第23页 |
2.1.5 常用溶液及其配制 | 第23-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-32页 |
2.2.1 实验动物分组及其处理 | 第24-25页 |
2.2.2 待检材料采取及其处理 | 第25页 |
2.2.3 检测指标及方法 | 第25-32页 |
2.3 数据处理 | 第32-33页 |
3 结果与分析 | 第33-65页 |
3.1 REV感染SPF雏鸡免疫器官细胞免疫功能变化 | 第33-41页 |
3.1.1 REV感染SPF雏鸡胸腺和脾脏T淋巴细胞增殖功能变化 | 第33-35页 |
3.1.2 REV感染SPF雏鸡免疫器官CD4+T淋巴细胞数量变化 | 第35-37页 |
3.1.3 REV感染SPF雏鸡免疫器官CD8+T淋巴细胞数量变化 | 第37-39页 |
3.1.4 REV感染SPF雏鸡免疫器官CD4+/CD8+T淋巴细胞比值变化 | 第39-41页 |
3.2 REV感染SPF雏鸡法氏囊和脾脏B淋巴细胞增殖功能变化 | 第41-42页 |
3.3 REV感染SPF雏鸡免疫器官细胞周期的变化 | 第42-48页 |
3.3.1 REV感染SPF雏鸡胸腺淋巴细胞细胞周期变化 | 第42-44页 |
3.3.2 REV感染SPF雏鸡脾脏淋巴细胞细胞周期变化 | 第44-46页 |
3.3.3 REV感染SPF雏鸡法氏囊淋巴细胞细胞周期变化 | 第46-48页 |
3.4 雏鸡免疫器官Cyclin D1 mRNA表达及Real Time-PCR检测方法的建立 | 第48-54页 |
3.4.1 总RNA提取 | 第48-49页 |
3.4.2 雏鸡免疫器官Cyclin D1 mRNA表达的变化 | 第49-54页 |
3.5 REV感染SPF雏鸡免疫器官中Cyclin D1 mRNA表达变化 | 第54-57页 |
3.5.1 REV感染SPF雏鸡胸腺中Cyclin D1 m RNA表达变化 | 第54-55页 |
3.5.2 REV感染SPF雏鸡脾脏中Cyclin D1 m RNA表达变化 | 第55-56页 |
3.5.3 REV感染SPF雏鸡法氏囊中Cyclin D1 mRNA表达变化 | 第56-57页 |
3.6 鸡Cyclin D1原核表达及多克隆抗体制备 | 第57-61页 |
3.6.1 鸡Cyclin D1基因克隆及序列分析 | 第57-58页 |
3.6.2 重组蛋白表达条件优化 | 第58-59页 |
3.6.3 SDS-PAGE分析蛋白表达 | 第59页 |
3.6.4 重组蛋白切胶纯化 | 第59-60页 |
3.6.5 融合蛋白Cyclin D1 Western blotting检测 | 第60页 |
3.6.6 Western blotting检测Cyclin D1多克隆抗体的特异性 | 第60-61页 |
3.6.7 兔抗鸡Cyclin D1多克隆抗体效价测定 | 第61页 |
3.7 REV感染SPF雏鸡免疫器官中Cyclin D1蛋白含量变化 | 第61-65页 |
3.7.1 REV感染SPF雏鸡胸腺中Cyclin D1蛋白含量变化 | 第61-62页 |
3.7.2 REV感染SPF雏鸡脾脏中Cyclin D1蛋白含量变化 | 第62-63页 |
3.7.3 REV感染SPF雏鸡法氏囊中Cyclin D1蛋白含量变化 | 第63-65页 |
4 讨论 | 第65-69页 |
4.1 REV感染对SPF雏鸡胸腺和脾脏细胞免疫功能变化的影响 | 第65-66页 |
4.2 REV感染对SPF雏鸡免疫器官B淋巴细胞增殖功能的影响 | 第66-67页 |
4.3 REV感染对SPF雏鸡免疫器官Cyclin D1表达的影响 | 第67-68页 |
4.4 REV感染对SPF雏鸡的免疫器官淋巴细胞细胞周期的影响 | 第68-69页 |
5 结论 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-79页 |
附录 | 第79-81页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第81页 |