中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
引言 | 第11-14页 |
第一部分 小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞的原代培养 | 第14-20页 |
一、实验材料 | 第14-15页 |
1.实验对象 | 第14页 |
2.主要试剂 | 第14-15页 |
3.主要仪器和设备 | 第15页 |
二、实验方法 | 第15-16页 |
1.原代培养皿的准备 | 第15页 |
2.上皮细胞的前处理 | 第15页 |
3.组织块培养法 | 第15-16页 |
4.酶消化分离法 | 第16页 |
5.原代细胞传代 | 第16页 |
6.原代细胞复苏 | 第16页 |
三、实验结果 | 第16-18页 |
四、讨论 | 第18-19页 |
五、小结 | 第19-20页 |
第二部分 小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞的 Γ-H2AX蛋白分析 | 第20-26页 |
一、实验材料 | 第20-21页 |
1.实验对象 | 第20页 |
2.主要试剂 | 第20-21页 |
3.主要仪器和设备 | 第21页 |
二、实验方法 | 第21-23页 |
1.原代细胞的处理 | 第21页 |
2.蛋白样制备 | 第21-22页 |
3. BCA法测蛋白浓度 | 第22页 |
4.蛋白变性 | 第22页 |
5.制 15%的SDS-PAGE胶 | 第22页 |
6.加样和垂直电泳 | 第22页 |
7.转膜 | 第22-23页 |
8.封闭与抗体孵育 | 第23页 |
9.上机 | 第23页 |
三、实验结果 | 第23页 |
四、讨论 | 第23-25页 |
五、小结 | 第25-26页 |
第三部分 小鼠小肠绒毛上皮细胞和固有层纤维细胞基因表达谱的研究 | 第26-54页 |
一、实验材料 | 第26-28页 |
1.实验对象 | 第26页 |
2.主要试剂 | 第26-27页 |
3.主要仪器和设备 | 第27-28页 |
二、实验方法 | 第28-31页 |
1.提取TOTAL RNA | 第28页 |
2.总RNA的纯化 | 第28-29页 |
3.CDNA第一链和第二链一步法合成 | 第29页 |
4.荧光标记CRNA合成 | 第29页 |
5.CRNA纯化 | 第29-30页 |
6.CRNA浓度测定 | 第30页 |
7.荧光分子浓度及掺入率计算 | 第30页 |
8.CRNA样品片段化和芯片杂交 | 第30-31页 |
9.芯片洗涤 | 第31页 |
10.芯片扫描 | 第31页 |
三、实验结果 | 第31-47页 |
1.RNA样品质检基本信息 | 第31-33页 |
2.基因芯片检测结果 | 第33-47页 |
四、讨论 | 第47-52页 |
五、小结 | 第52-54页 |
全文总结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
综述 | 第59-69页 |
参考文献 | 第66-69页 |
中英文缩略词对照表 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-72页 |