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蓝光抑制‘南果梨果实成熟过程中乙烯合成的机理研究

摘要第8-9页
Abstract第9页
1 前言第10-19页
    1.1 乙烯与园艺作物生长发育的研究进展第10-13页
        1.1.1 乙烯合成及信号转导途径第10-11页
        1.1.2 乙烯对园艺作物生长发育的影响第11-13页
    1.2 光调控植物生长发育的研究进展第13-16页
        1.2.1 光信号转导途径研究进展第13-15页
        1.2.2 光对植物生长发育的影响第15-16页
    1.3 光影响乙烯合成的研究进展第16-18页
        1.3.1 不同光对乙烯释放速率的影响第16页
        1.3.2 光调节乙烯合成前体信号的研究进展第16页
        1.3.3 光信号与乙烯主要合成酶ACS,ACC的转录后调控第16页
        1.3.4 光信号与乙烯合成的关键酶ACS,ACC的转录调控第16-18页
        1.3.5 不同光质对植物生长发育的影响第18页
    1.4 本研究的目的和意义第18-19页
2 材料与方法第19-32页
    2.1 试验材料与试剂第19-21页
        2.1.1 试验材料第19页
        2.1.2 主要试剂第19页
        2.1.3 菌及载体第19页
        2.1.4 培养基的配制第19-20页
        2.1.5 主要试剂的配制第20-21页
    2.2 试验方法第21-32页
        2.2.1 蓝光处理'南果梨'果实第21页
        2.2.2 果实硬度测定第21页
        2.2.3 果实可溶性固形物含量测定第21页
        2.2.4 乙烯含量测定第21页
        2.2.5 RNA的提取与检测第21-22页
        2.2.6 RNA的反转录及cDNA质量检测第22-23页
        2.2.7 荧光定量PCR第23页
        2.2.8 引物合成及PuHYH1、PuERF2、PuACS1基因的克隆第23-24页
        2.2.9 酵母双杂交试验第24-25页
        2.2.10 Pull-down试验第25-27页
        2.2.11 酵母单杂交试验第27-28页
        2.2.12 EMSA(凝胶阻滞)试验第28-29页
        2.2.13 农杆菌介导的瞬时表达第29-30页
        2.2.14 GUS活性检测第30-32页
3 结果与分析第32-46页
    3.1 蓝光处理梨果实后PuHYH1、PuERF2、PuACS1的表达变化第32-36页
        3.1.1 蓝光处理'南果梨'果实乙烯生成量变化第32页
        3.1.2 蓝光处理后梨果实可溶性固形物含量变化第32-33页
        3.1.3 光信号转导途径中重要转录因子PuHYH、PuCOP1的表达模式第33-34页
        3.1.4 乙烯合成途径中关键酶ACS、ACO的表达模式第34-35页
        3.1.5 乙烯信号转导途径中重要转录因子ERF的表达模式第35-36页
    3.2 PuHYH1结合并负调控PuACS1启动子的试验第36-39页
        3.2.1 PuHYH1结合PuACS1启动子的酵母单杂交试验第36-37页
        3.2.2 PuHYH1结合PuACS1启动子的EMSA(凝胶阻滞)试验第37-38页
        3.2.3 GUS报告基因试验验证PuHYH1对PuACS1的调控模式第38-39页
    3.3 PuERF2直接结合并调控PuACS1启动子的试验第39-42页
        3.3.1 PuERF2结合PuACS1启动子的酵母单杂交试验第39-40页
        3.3.2 PuERF2直接结合PuACS1启动子的EMSA(凝胶阻滞)试验第40-41页
        3.3.3 GUS报告基因试验验证PuERF2对PuACS1的调控模式第41-42页
    3.4 PuHYH1与PuERF2互作影响PuERF2对PuACS1调控的模式第42-46页
        3.4.1 PuHYH1与PuERF2互作的酵母双杂交试验第42-43页
        3.4.2 PuHYH1与PuERF2互作的Pulldown试验第43-44页
        3.4.3 GUS报告基因试验验证PuHYH1与PuERF2互作影响PuERF2对PuACS1的调控模式第44-46页
4 讨论第46-48页
    4.1 蓝光处理对果实成熟的影响第46页
    4.2 蓝光处理后对光信号转导以及乙烯合成相关基因的表达的影响第46-48页
5 全文结论第48-49页
参考文献第49-58页
附录第58-60页
致谢第60-61页
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