摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
1 前言 | 第10-19页 |
1.1 乙烯与园艺作物生长发育的研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 乙烯合成及信号转导途径 | 第10-11页 |
1.1.2 乙烯对园艺作物生长发育的影响 | 第11-13页 |
1.2 光调控植物生长发育的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 光信号转导途径研究进展 | 第13-15页 |
1.2.2 光对植物生长发育的影响 | 第15-16页 |
1.3 光影响乙烯合成的研究进展 | 第16-18页 |
1.3.1 不同光对乙烯释放速率的影响 | 第16页 |
1.3.2 光调节乙烯合成前体信号的研究进展 | 第16页 |
1.3.3 光信号与乙烯主要合成酶ACS,ACC的转录后调控 | 第16页 |
1.3.4 光信号与乙烯合成的关键酶ACS,ACC的转录调控 | 第16-18页 |
1.3.5 不同光质对植物生长发育的影响 | 第18页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-32页 |
2.1 试验材料与试剂 | 第19-21页 |
2.1.1 试验材料 | 第19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
2.1.3 菌及载体 | 第19页 |
2.1.4 培养基的配制 | 第19-20页 |
2.1.5 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-32页 |
2.2.1 蓝光处理'南果梨'果实 | 第21页 |
2.2.2 果实硬度测定 | 第21页 |
2.2.3 果实可溶性固形物含量测定 | 第21页 |
2.2.4 乙烯含量测定 | 第21页 |
2.2.5 RNA的提取与检测 | 第21-22页 |
2.2.6 RNA的反转录及cDNA质量检测 | 第22-23页 |
2.2.7 荧光定量PCR | 第23页 |
2.2.8 引物合成及PuHYH1、PuERF2、PuACS1基因的克隆 | 第23-24页 |
2.2.9 酵母双杂交试验 | 第24-25页 |
2.2.10 Pull-down试验 | 第25-27页 |
2.2.11 酵母单杂交试验 | 第27-28页 |
2.2.12 EMSA(凝胶阻滞)试验 | 第28-29页 |
2.2.13 农杆菌介导的瞬时表达 | 第29-30页 |
2.2.14 GUS活性检测 | 第30-32页 |
3 结果与分析 | 第32-46页 |
3.1 蓝光处理梨果实后PuHYH1、PuERF2、PuACS1的表达变化 | 第32-36页 |
3.1.1 蓝光处理'南果梨'果实乙烯生成量变化 | 第32页 |
3.1.2 蓝光处理后梨果实可溶性固形物含量变化 | 第32-33页 |
3.1.3 光信号转导途径中重要转录因子PuHYH、PuCOP1的表达模式 | 第33-34页 |
3.1.4 乙烯合成途径中关键酶ACS、ACO的表达模式 | 第34-35页 |
3.1.5 乙烯信号转导途径中重要转录因子ERF的表达模式 | 第35-36页 |
3.2 PuHYH1结合并负调控PuACS1启动子的试验 | 第36-39页 |
3.2.1 PuHYH1结合PuACS1启动子的酵母单杂交试验 | 第36-37页 |
3.2.2 PuHYH1结合PuACS1启动子的EMSA(凝胶阻滞)试验 | 第37-38页 |
3.2.3 GUS报告基因试验验证PuHYH1对PuACS1的调控模式 | 第38-39页 |
3.3 PuERF2直接结合并调控PuACS1启动子的试验 | 第39-42页 |
3.3.1 PuERF2结合PuACS1启动子的酵母单杂交试验 | 第39-40页 |
3.3.2 PuERF2直接结合PuACS1启动子的EMSA(凝胶阻滞)试验 | 第40-41页 |
3.3.3 GUS报告基因试验验证PuERF2对PuACS1的调控模式 | 第41-42页 |
3.4 PuHYH1与PuERF2互作影响PuERF2对PuACS1调控的模式 | 第42-46页 |
3.4.1 PuHYH1与PuERF2互作的酵母双杂交试验 | 第42-43页 |
3.4.2 PuHYH1与PuERF2互作的Pulldown试验 | 第43-44页 |
3.4.3 GUS报告基因试验验证PuHYH1与PuERF2互作影响PuERF2对PuACS1的调控模式 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
4.1 蓝光处理对果实成熟的影响 | 第46页 |
4.2 蓝光处理后对光信号转导以及乙烯合成相关基因的表达的影响 | 第46-48页 |
5 全文结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-58页 |
附录 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读学位论文期间发表的文章目录 | 第61页 |