| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1.前言 | 第9-17页 |
| 1.1 本课题的提出 | 第9页 |
| 1.2 MICRORNAS的发现、结构特征以及在生物体内的合成 | 第9-11页 |
| 1.3 植物MICRORNAS的研究进展 | 第11-14页 |
| 1.3.1 植物Micro RNAs参与的年龄途径 | 第12-13页 |
| 1.3.2 miR156 家族基因在植物生长发育过程中的调控作用 | 第13-14页 |
| 1.4 已知MIRNAS和SIRNAS鉴定及差异分析的新方法 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第15-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.2 质粒、试剂和菌株 | 第17-18页 |
| 2.1.3 实验主要试剂以及仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 遗传转化培养基配方 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-31页 |
| 2.2.1 miR156 家族基因的克隆和序列分析 | 第19-21页 |
| 2.2.2 Micro RNA-STTM干涉载体的构建 | 第21-25页 |
| 2.2.3 农杆菌介导的普通枳遗传转化 | 第25-26页 |
| 2.2.4 伏令夏橙愈伤的转化 | 第26-27页 |
| 2.2.5 RNA提取和Real-time PCR分析 | 第27-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-47页 |
| 3.1 MIR156 家族基因的克隆和比较 | 第31-35页 |
| 3.2 MIR156 靶基因SPL的分析 | 第35-38页 |
| 3.3 MIR156 在普通枳和早实枳阶段发育的REAL-TIME PCR分析 | 第38-42页 |
| 3.3.1 RNA提取和反转录c DNA检测 | 第38页 |
| 3.3.2 miR156 家族基因的Real-time PCR结果分析 | 第38-42页 |
| 3.4 MIR156-STTM干涉载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.5MIR156-STTM干涉载体转化伏令夏橙愈伤 | 第43-45页 |
| 3.5.1 伏令夏橙愈伤转化 | 第43-44页 |
| 3.5.2 转基因伏令夏橙愈伤的阳性鉴定 | 第44-45页 |
| 3.6MIR156-STTM干涉载体转化普通枳 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 MIR156 家族基因在植物中广泛存在和高度保守 | 第47页 |
| 4.2 MIR156 家族基因参与的植物生长发育 | 第47-48页 |
| 4.3 MICRORN A干涉载体的构建 | 第48-49页 |
| 4.4 研究展望 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
