| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一部分 引言 | 第11-28页 |
| 一、高甘油三酯血症与心血管疾病 | 第11-16页 |
| （一）概述 | 第11页 |
| （二）发生机制 | 第11-12页 |
| （三）诊断评估与检测方法 | 第12-13页 |
| （四）治疗手段 | 第13-16页 |
| 二、载脂蛋白C3 | 第16-23页 |
| （一）APOC3的概述 | 第16页 |
| （二）APOC3的结构 | 第16-17页 |
| （三）APOC3的主要生理功能 | 第17-18页 |
| （四）APOC3基因的表达调控与基因多态性 | 第18-20页 |
| （五）APOC3与心血管疾病 | 第20-22页 |
| （六）APOC3与代谢综合征 | 第22-23页 |
| 三、单克隆抗体的进展及应用进展 | 第23-27页 |
| （一）单克隆抗体概述 | 第23-24页 |
| （二）单克隆抗体的应用 | 第24-27页 |
| 四、本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第28-45页 |
| 一、实验材料 | 第28-33页 |
| （一）实验试剂 | 第28页 |
| （二）质粒 | 第28页 |
| （三）菌种 | 第28页 |
| （四）实验动物及细胞系 | 第28-29页 |
| （五）主要溶液的配制 | 第29-33页 |
| 二、实验器材 | 第33-34页 |
| 三、实验方法 | 第34-45页 |
| （一）细胞培养相关实验方法 | 第34页 |
| （二）融合蛋白GST-APOC3的原核表达与分离纯化 | 第34-36页 |
| （三）抗APOC3蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第36-42页 |
| （四）双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第42-45页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第45-63页 |
| 一、融合蛋白GST-APOC3的原核表达与分离纯化 | 第45-48页 |
| （一）GST-APOC3蛋白的诱导表达 | 第45页 |
| （二）免疫印迹鉴定GST-APOC3融合蛋白 | 第45-46页 |
| （三）GST-APOC3融合蛋白的可溶性分析 | 第46页 |
| （四）GST-APOC3蛋白的大量表达与分离纯化 | 第46页 |
| （五）GST-APOC3蛋白的浓度测定 | 第46-48页 |
| 二、抗APOC3单克隆抗体的制备及鉴定 | 第48-56页 |
| （一）动物免疫与小鼠血清效价的检测 | 第48-49页 |
| （二）间接ELISA检测方法的条件优化 | 第49-52页 |
| （三）细胞融合和阳性杂交瘤细胞的检测、筛选及克隆化 | 第52页 |
| （四）腹水单克隆抗体的效价检测 | 第52-53页 |
| （五）腹水单克隆抗体的纯化 | 第53页 |
| （六）纯化抗体的效价检测 | 第53-54页 |
| （七）单克隆抗体类型的鉴定 | 第54-55页 |
| （八）单克隆抗体特异性的鉴定 | 第55-56页 |
| 三、双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第56-63页 |
| （一）单克隆抗体-多克隆抗体夹心ELISA方法的建立 | 第56-60页 |
| （二）双抗体夹心ELISA检测体系的特异性检测 | 第60页 |
| （三）双抗体夹心ELISA检测体系的灵敏度检测 | 第60页 |
| （四）双抗体夹心ELISA检测体系的稳定性检测 | 第60-61页 |
| （五）样品的检测 | 第61-63页 |
| 第四部分 讨论 | 第63-68页 |
| 一、APOC3作为生物标志物在CVD中的作用 | 第63页 |
| 二、以APOC3为靶点的反义基因治疗 | 第63-64页 |
| 三、APOC3单克隆抗体制备技术的研究 | 第64-65页 |
| 四、双抗体夹心ELISA检测体系的优化研究 | 第65-66页 |
| 五、实验设计方案中的不足 | 第66-68页 |
| 第五部分 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-78页 |
| 附录 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
