| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| 1.1 亚硝酸盐的性质及来源 | 第7页 |
| 1.2 亚硝酸盐的代谢途径及代谢酶的分类 | 第7-10页 |
| 1.2.1 亚硝酸盐的合成及降解途径 | 第7-8页 |
| 1.2.2 硝酸盐还原酶及亚硝酸盐还原酶的分类 | 第8-10页 |
| 1.2.3 细菌中亚硝酸盐代谢途径及相关基因的研究现状 | 第10页 |
| 1.3 细菌中亚硝酸盐还原酶性质的研究现状 | 第10-11页 |
| 1.4 解淀粉芽孢杆菌的研究现状及应用 | 第11页 |
| 1.5 代谢途径的研究方法 | 第11页 |
| 1.6 论文的立题意义及主要研究内容 | 第11-13页 |
| 1.6.1 论文立题意义 | 第11-12页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-19页 |
| 2.1 实验材料 | 第13-14页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第13页 |
| 2.1.2 实验试剂、试剂盒及工具酶 | 第13页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第13页 |
| 2.1.4 培养基 | 第13-14页 |
| 2.2 实验方法 | 第14-19页 |
| 2.2.1 分析方法 | 第14页 |
| 2.2.2 种子液的制备 | 第14页 |
| 2.2.3 B. amyloliquefaciens SYCB H47代谢亚硝酸盐的特征及影响因素 | 第14-15页 |
| 2.2.4 亚硝酸盐还原酶酶活的测定 | 第15页 |
| 2.2.5 蛋白质含量的测定 | 第15页 |
| 2.2.6 凝胶电泳 | 第15页 |
| 2.2.7 B. amyloliquefaciens SYCB H47全基因组生物信息学分析 | 第15页 |
| 2.2.8 基因的克隆表达及酶活测定 | 第15-18页 |
| 2.2.9 重组亚硝酸盐还原酶酶学性质的研究 | 第18页 |
| 2.2.10 基因转录的分析 | 第18-19页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第19-46页 |
| 3.1 B. amyloliquefaciens SYBC H47代谢亚硝酸盐的特征及影响因素 | 第19-22页 |
| 3.1.1 B. amyloliquefaciens SYBC H47对硝酸盐及亚硝酸盐的作用 | 第19页 |
| 3.1.2 B. amyloliquefaciens SYBC H47对亚硝酸盐合成及降解的代谢特性 | 第19-20页 |
| 3.1.3 B. amyloliquefaciens SYBC H47对硝酸盐、亚硝酸盐和铵盐的利用 | 第20-21页 |
| 3.1.4 B. amyloliquefaciens SYBC H47代谢亚硝酸盐的影响因素 | 第21-22页 |
| 3.2 基因组分析及代谢途径的确定 | 第22-39页 |
| 3.2.1 基因序列分析及氨基酸序列分析 | 第22-25页 |
| 3.2.2 疑似编码硝酸盐还原酶的氨基酸序列分析 | 第25-30页 |
| 3.2.3 疑似编码亚硝酸盐还原酶的氨基酸序列分析 | 第30-36页 |
| 3.2.4 硝酸盐还原酶和亚硝酸盐还原酶基因簇分析 | 第36-38页 |
| 3.2.5 亚硝酸盐代谢途径的分析 | 第38-39页 |
| 3.3 基因的克隆及表达验证 | 第39-42页 |
| 3.3.1 基因的克隆及鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3.2 重组质粒的诱导表达 | 第40-42页 |
| 3.4 重组蛋白Nir BD分离纯化及酶学性质的研究 | 第42-44页 |
| 3.4.1 重组蛋白Nir BD的分离纯化 | 第42页 |
| 3.4.2 NirBD催化反应的产物 | 第42-43页 |
| 3.4.3 重组蛋白Nir BD对氧的敏感度 | 第43页 |
| 3.4.4 催化反应温度对重组蛋白NirBD酶活性的影响 | 第43-44页 |
| 3.4.5 催化反应pH对重组蛋白Nir BD活性的影响 | 第44页 |
| 3.4.6 重组蛋白Nir BD的动力学参数的确定 | 第44页 |
| 3.5 不同条件对narG和nir B转录的影响 | 第44-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-48页 |
| 主要结论 | 第46页 |
| 展望 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 附录A：作者在攻读硕士学位期间发表的论文与专利 | 第54-55页 |
| 附录B：标准曲线 | 第55-56页 |
| 附录C：亚硝酸盐还原酶测定方法 | 第56-57页 |
| 附录D：NirBD催化亚硝酸钠还原的Lineweaver-Burk图 | 第57页 |
