| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 英文缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-22页 |
| 1.1 乙型脑炎病毒 | 第9-12页 |
| 1.1.1 乙型脑炎地理分布 | 第9页 |
| 1.1.2 JEV毒株分类 | 第9-10页 |
| 1.1.3 JEV的生命周期 | 第10页 |
| 1.1.4 JEV的遗传信息 | 第10-11页 |
| 1.1.5 JEV传播途径及发病症状 | 第11-12页 |
| 1.1.6 JE的诊断及预防 | 第12页 |
| 1.2 内质网应激反应 | 第12页 |
| 1.3 FOXO转录因子研究进展 | 第12-22页 |
| 1.3.1 FOXO转录因子分子结构 | 第13-14页 |
| 1.3.2 FOXO转录因子活性 | 第14-16页 |
| 1.3.3 FOXO转录因子的功能 | 第16-19页 |
| 1.3.4 FOXO转录因子在衰老、长寿及疾病中的研究进展 | 第19-22页 |
| 第二章 乙脑病毒的体内外感染对基因表达谱的调控研究 | 第22-36页 |
| 2.1 前言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.2.1 病毒株材料 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞系材料 | 第22页 |
| 2.2.3 动物模型 | 第22页 |
| 2.2.4 试剂 | 第22-23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.3.1 Neuro-2a细胞培养和病毒扩增、滴度测定 | 第23-24页 |
| 2.3.2 病毒浓缩 | 第24页 |
| 2.3.3 病毒处理小鼠和感染Neuro-2a细胞 | 第24页 |
| 2.3.4 RT-PCR | 第24-26页 |
| 2.3.5 送样测序 | 第26-27页 |
| 2.3.6 实时荧光定量PCR | 第27-28页 |
| 2.4 实验结果 | 第28-34页 |
| 2.4.1 RNA样品质量满足建库测序要求 | 第28-29页 |
| 2.4.2 乙脑病毒NS1基因的检测 | 第29-30页 |
| 2.4.3 得到可靠测序数据 | 第30页 |
| 2.4.4 比对参考基因组 | 第30-31页 |
| 2.4.5 各组基因表达水平差异 | 第31页 |
| 2.4.6 差异基因表达分析 | 第31-34页 |
| 2.5 本章讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 JEV体内外处理诱导FOXO信号通路与细胞凋亡 | 第36-44页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料 | 第36-37页 |
| 3.2.1 病毒株材料 | 第36页 |
| 3.2.2 细胞系材料 | 第36页 |
| 3.2.3 动物模型 | 第36页 |
| 3.2.4 试剂盒 | 第36页 |
| 3.2.5 试剂 | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-40页 |
| 3.3.1 Neuro-2a 细胞培养和病毒扩增、滴度测定 | 第37-38页 |
| 3.3.2 JEV处理小鼠和细胞实验方法参考 | 第38页 |
| 3.3.3 Western blot | 第38-39页 |
| 3.3.4 免疫组化 | 第39-40页 |
| 3.4 实验结果 | 第40-42页 |
| 3.4.1 乙脑病毒感染Neuro-2a诱导细胞病变及乙脑病毒NS1蛋白的检测 | 第40-41页 |
| 3.4.2 乙脑病毒处理BALB/C小鼠脑组织乙脑病毒NS1蛋白的WB检测 | 第41-42页 |
| 3.4.3 乙脑病毒P3株感染Neuro-2a细胞诱导Foxo信号通路中Foxo及Bim蛋白的表达水平降低 | 第42页 |
| 3.5 本章讨论 | 第42-44页 |
| 第四章 Foxo1转录因子对Neuro-2a细胞凋亡的调控 | 第44-52页 |
| 4.1 前言 | 第44页 |
| 4.2 实验材料 | 第44-45页 |
| 4.2.1 病毒株材料 | 第44页 |
| 4.2.2 细胞系材料 | 第44页 |
| 4.2.3 试剂 | 第44-45页 |
| 4.3 实验方法 | 第45-48页 |
| 4.3.1 pCMV-mFoxo1-3FLAG-SV40-EGFP载体构建 | 第45-47页 |
| 4.3.2 si-RNA转染[105] | 第47页 |
| 4.3.3 Lipo-2000 脂质体转染 | 第47-48页 |
| 4.3.4 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第48页 |
| 4.3.5 蛋白提取及鉴定详细步骤 | 第48页 |
| 4.4 实验结果 | 第48-51页 |
| 4.4.1 pCMV-mFoxo1-3FLAG-SV40-EGFP载体构建 | 第48-49页 |
| 4.4.2 Neuro-2a细胞中Foxo1沉默和过表达处理后Foxo及Bim表达水平的检测 | 第49-50页 |
| 4.4.3 Foxo1基因的沉默促进Neuro-2a细胞凋亡而其过表达则抑制Neuro-2a细胞的凋亡 | 第50-51页 |
| 4.5 本章讨论 | 第51-52页 |
| 在校期间完成的其他工作 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 在校期间发表的论文 | 第61页 |
