| 摘要 | 第3-7页 |
| 英文摘要 | 第7-11页 |
| 第1章 引言 | 第17-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-24页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.2 仪器和设备 | 第21-24页 |
| 第一部分 角膜新生血管的模型建立和miRNA296在体外表达检测 | 第24-40页 |
| 1.1 动物模型制备 | 第24页 |
| 1.2 给药方法 | 第24页 |
| 1.3 角膜新生血管的裂隙灯显微镜观察 | 第24-25页 |
| 1.3.1 角膜新生血管的裂隙灯显微镜观察 | 第24-25页 |
| 1.3.2 新生血管的生长的长度和面积 | 第25页 |
| 1.4 标本处理 | 第25-27页 |
| 1.4.1 HE染色 | 第25-26页 |
| 1.4.2 角膜的免疫组化染色, | 第26页 |
| 1.4.3 免疫组化观察 | 第26页 |
| 1.4.4 病理切片观察 | 第26-27页 |
| 1.5 RT-PCR基因水平下定量检测mRNA296表达 | 第27-29页 |
| 1.6 统计分析 | 第29页 |
| 结果 | 第29-35页 |
| 2.1 小鼠角膜碱烧伤后裂隙灯大体观察角膜新生血管生长情况 | 第29-30页 |
| 2.1.1 新生血管的长入时间 | 第29-30页 |
| 2.2.2 新生血管长度与面积 | 第30页 |
| 2.2 碱烧伤角膜组织的病理学观察 | 第30-31页 |
| 2.3 各个实验组和对照组角膜基质的炎性细胞计数分析 | 第31页 |
| 2.4 各个实验组免疫组化分析和炎性细胞中VEGF的表达 | 第31-32页 |
| 2.5 各组VEGF免疫组织化学平均光密度值的分析 | 第32页 |
| 2.6 RT-PCR检测miRNA296的表达水平 | 第32-35页 |
| 讨论 | 第35-40页 |
| 第二部分 miR-296参与调控角膜血管新生的分子机制作用研究 | 第40-52页 |
| 1.1 动物模型制备 | 第40-41页 |
| 1.1.1 给药方法 | 第40页 |
| 1.1.2 用标本处理 | 第40-41页 |
| 1.2 生物信息学预测miR-296 的靶基因及其与信号通路的关系 | 第41-42页 |
| 1.2.1.组织样品的准备 | 第41页 |
| 1.2.2 蛋白浓度测定 | 第41-42页 |
| 1.3 检测方法 | 第42-45页 |
| 1.3.1 封闭和孵育 | 第43-44页 |
| 1.3.2 实验注意事项 | 第44页 |
| 1.3.3 筛选差异的基因 | 第44-45页 |
| 1.4 Western-blot检测角膜新生血管中miRNA296的表达 | 第45-46页 |
| 1.4.1 收集蛋白样品(Protein sample preparation) | 第45页 |
| 1.4.2 电泳(Electrophoresis) | 第45-46页 |
| 1.4.3 转膜 | 第46页 |
| 1.4.4 封闭 | 第46页 |
| 1.4.5 一抗孵育 | 第46页 |
| 1.4.6 二抗孵育 | 第46页 |
| 1.4.7 曝光 | 第46页 |
| 1.5 统计分析 | 第46-47页 |
| 结果 | 第47-49页 |
| 2.1 Western–blot检测角膜新生血管中miR-296 其靶基因FGF23的蛋白表达 | 第47-48页 |
| 2.2 采用western blot法检测miR-296 的VEGF-FGF23信号通路相关基因的蛋白表达水平 | 第48页 |
| 2.3 芯片检测miR-296 在小鼠碱烧伤角膜新生血管FGF23信号通路的蛋白表达水平 | 第48页 |
| 2.4 miR-296 靶基因生物信息学预测筛选差异的基因分析 | 第48-49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 全文结论 | 第52-53页 |
| 问题与展望 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附图 | 第62-68页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第68-69页 |
| 综述 角膜新生血管的研究进展 | 第69-77页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
