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猪多能性干细胞microRNAs的鉴定及其生物学功能分析

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩略词表第14-16页
第一部分 文献综述第16-40页
    第一章 干细胞特性建立及维持调控研究进展第16-27页
        1 转录因子第16-18页
        2 干细胞多能性的信号通路调控第18-20页
        3 干细胞多能性的表观遗传调控第20-25页
            3.1 DNA甲基化第21-22页
            3.2 组蛋白修饰第22-23页
            3.3 长链非编码RNA(Longnon-coding RNA,lncRNA)第23-24页
            3.4 N6-methyladenosine (m6A)第24-25页
        4 多能性转录因子、组蛋白修饰、信号通路和非编码RNA彼此协作第25-27页
            4.1 转录因子与信号通路第25页
            4.2 转录因子与表观修饰第25-27页
    第二章 miRNA与干细胞多能性调控第27-35页
        1 miRNA生物学特征及检测方法第27-30页
            1.1 miRNA生物学特征第27-29页
            1.2 miRNA表达谱检测方法第29-30页
        2 干细胞多能性建立及维持相关miRNA第30-35页
            2.1 miRNA在干细胞多能性维持及体细胞重编程中的作用第30-32页
            2.2 miRNAs与其他多能性调控因子的互作第32-35页
    第三章 猪多能性干细胞及调控机制研究第35-39页
        1 猪干细胞类型第35-38页
            1.1 猪ESCs第35-36页
            1.2 猪iPSCs第36-38页
            1.3 猪ASCs第38页
        2 猪干细胞多能性维持及调控第38-39页
            2.1 信号传导通路第38-39页
            2.2 表观修饰第39页
    小结第39-40页
第二部分 试验部分 猪多能性干细胞miRNA的鉴定及其生物学功能分析第40-104页
    1 材料与方法第41-48页
        1.1 试验细胞第41页
        1.2 主要试剂和试剂盒第41-42页
        1.3 主要仪器与耗材第42页
        1.4 细胞培养相关试剂配制第42-43页
        1.5 pADSCs的复苏及传代培养第43页
        1.6 pEFs传代培养方法与pADSCs一致第43页
        1.7 小鼠胚胎成纤维细胞系建立第43页
        1.8 饲养层的制备第43页
        1.9 pPiPSCs传代培养第43-44页
        1.10 NpiPSCs传代培养第44页
        1.11 总RNA提取第44页
        1.12 总RNA质量检测第44页
        1.13 miRNA测序文库构建及上机测序第44-45页
        1.14 测序数据初步的处理第45页
        1.15 测序数据的初步分析第45-46页
        1.16 数据分析软件第46页
        1.17 分析平台第46页
        1.18 数据库及软件第46页
        1.19 公共及特有序列分析第46页
        1.20 已知miRNAs比对第46页
        1.21 miRNAs碱基偏好性第46页
        1.22 新miRNA预测第46-47页
        1.23 已知miRNA的差异分析第47页
        1.24 已知miRNAs和新miRNAs的聚类分析第47页
        1.25 定量PCR验证第47-48页
    2 结果第48-96页
        2.1 总RNA的质量检测第48-50页
        2.2 序列文库质量处理第50-53页
        2.3 small RNA文库片段的长度分布第53-54页
        2.4 small RNA的特征分析第54-63页
        2.5 small RNA的文库分类注释第63-65页
        2.6 公共及特有序列分析第65-67页
        2.7 已知miRNA比对第67-68页
        2.8 miRNAs碱基偏好性第68-69页
        2.9 新miRNA的预测第69-70页
        2.10 已知miRNA的差异分析第70-72页
        2.11 已知miRNAs和新miRNAs的聚类分析第72-74页
        2.12 定量PCR验证第74-76页
        2.13 差异表达的已知miRNA的靶基因预测第76-78页
        2.14 差异表达的已知miRNA的GO富集分析第78-81页
        2.15 差异表达的已知miRNAs预测靶基因KEGG分析第81-83页
        2.16 差异表达的新mRNAs的靶基因预测第83-86页
        2.17 差异表达的新miRNA的GO富集分析第86-88页
        2.18 差异表达的新mRNAs的KEGG分析第88-90页
        2.19 候选miRNA-KEGG交联分析第90-94页
        2.20 候选miRNA的靶基因KEGG pathway富集分析第94-96页
    3 讨论第96-104页
        3.1 测序样品的选择第96-97页
        3.2 miRNAs区分不同多能性程度细胞第97-99页
        3.3 miRNA区分不同重编程程度细胞第99-100页
        3.4 猪干细胞多能性调控的潜在miRNAs第100-102页
        3.5 靶基因预测及KEGG Pathway富集鉴定潜在差异多能性miRNAs第102-104页
结论第104-105页
参考文献第105-119页
附录第119-142页
致谢第142-143页
个人简历第143-144页

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