摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略词 | 第13-14页 |
文献综述 | 第14-22页 |
1 Ezrin概述 | 第14-17页 |
1.1 Ezrin及ERM蛋白家族 | 第14-15页 |
1.2 Ezrin的表达和定位 | 第15-16页 |
1.3 Ezrin的生物学功能 | 第16页 |
1.4 Ezrin的活化 | 第16-17页 |
2 Ezrin与哺乳动物生殖 | 第17-22页 |
2.1 Ezrin与雌性动物生殖 | 第17-20页 |
2.1.1 Ezrin对卵母细胞发育及成熟的影响 | 第17-19页 |
2.1.2 Ezrin对卵泡发育的影响 | 第19页 |
2.1.3 Ezrin对胚胎着床的影响 | 第19-20页 |
2.2 Ezrin与雄性动物生殖 | 第20页 |
2.4 Ezrin与早期胚胎发育 | 第20-21页 |
2.5 NSC668394对Ezrin功能的影响 | 第21-22页 |
引言 | 第22-23页 |
1 材料与方法 | 第23-33页 |
1.1 材料 | 第23-25页 |
1.1.1 试验动物 | 第23页 |
1.1.2 试验主要试剂 | 第23-24页 |
1.1.3 试验抗体 | 第24页 |
1.1.4 溶液的配制 | 第24-25页 |
1.1.5 试验仪器 | 第25页 |
1.2 试验方法 | 第25-30页 |
1.2.1 不同阶段卵的获取 | 第25-26页 |
1.2.1.1 GV期卵母细胞的获取 | 第25-26页 |
1.2.1.2 MII期卵母细胞的获取 | 第26页 |
1.2.1.3 原核胚的获取 | 第26页 |
1.2.2 卵母细胞体外成熟及体外受精 | 第26页 |
1.2.3 体内成熟卵体外受精 | 第26-27页 |
1.2.4 原核早期胚胎体外培养 | 第27页 |
1.2.5 Ezrin T567D质粒体外转录 | 第27页 |
1.2.6 显微固定针和注射针的制备 | 第27页 |
1.2.7 显微注射 | 第27-28页 |
1.2.8 免疫荧光染色 | 第28页 |
1.2.9 样本卵巢及睾丸的采集 | 第28页 |
1.2.10 Western Blot | 第28-29页 |
1.2.11 卵巢及睾丸HE染色 | 第29-30页 |
1.2.12 卵巢及睾丸的免疫荧光染色 | 第30页 |
1.3 试验设计 | 第30-33页 |
1.3.1 NSC668394对p-Ezrin (Thr567)及Ezrin蛋白的表达的影响 | 第30页 |
1.3.2 体外成熟液中添加不同浓度的NSC668394对卵母细胞体外成熟、体外受精及早期胚胎发育的影响 | 第30-31页 |
1.3.3 体外受精液中添加不同浓度的NSC668394对卵母细胞体外受精及早期胚胎发育的影响 | 第31页 |
1.3.4 胚胎培养液中添加不同浓度的NSC668394对原核胚早期胚胎发育的影响 | 第31页 |
1.3.5 显微注射Ezrin-T567D mRNA对小鼠MII卵母细胞内Ezrin及p-Ezrin(Thr567)的表达的影响 | 第31页 |
1.3.6 显微注射Ezrin-T567D mRNA挽救由体外成熟培养液中NSC668394导致的卵母细胞体外成熟、体外受精及早期胚胎发育障碍 | 第31-32页 |
1.3.7 显微注射Ezrin-T567D mRNA挽救由体外受精培养液中NSC668394导致的卵母细胞体外受精及早期胚胎发育障碍 | 第32页 |
1.3.8 显微注射Ezrin-T567D mRNA挽救由胚胎培养液中NSC668394导致的早期胚胎发育障碍 | 第32页 |
1.3.9 断奶期小鼠腹腔注射NSC668394后卵巢及睾丸的Ezrin及p-Ezrin(Thr567)蛋白的表达变化 | 第32页 |
1.3.10 断奶期小鼠腹腔注射NSC668394对小鼠卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响 | 第32-33页 |
1.3.11 断奶期ICR雌鼠腹腔注射NSC668394对小鼠早期胚胎发育的影响 | 第33页 |
1.3.12 胎儿期注射NSC668394对小鼠初情期性腺发育的影响 | 第33页 |
1.3.13 断奶期小鼠注射NSC668394对小鼠性成熟期性腺发育的影响 | 第33页 |
1.4 统计学分析 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-60页 |
2.1 添加不同浓度NSC668394后p-Ezrin(Thr567)及Ezrin蛋白的表达情况 | 第33-35页 |
2.2 成熟培养液中添加不同浓度的NSC668394对小鼠卵母细胞体外成熟、受精及早期胚胎发育的影响 | 第35-36页 |
2.3 受精液中添加NSC668394对小鼠体外受精及早期胚胎发育的影响 | 第36-38页 |
2.4 胚胎培养液中添加NSC668394添加对早期胚胎发育的影响 | 第38-39页 |
2.5 Ezrin-T567D质粒的构建及体外转录 | 第39-40页 |
2.5.1 Ezrin-T567D质粒的构建 | 第39页 |
2.5.2 重组质粒体外转录RNA质量检测 | 第39-40页 |
2.6 显微注射Ezrin-T567D mRNA在小鼠MII卵母细胞上Ezrin及p-Ezrin(Thr567)的表达的影响 | 第40-41页 |
2.7 显微注射Ezrin-T567D mRNA挽救了由成熟培养液中NSC668394导致的卵母细胞体外成熟、体外受精及早期胚胎发育障碍 | 第41-42页 |
2.8 显微注射T567D mRNA挽救了由体外受精液中NSC668394导致的体内成熟卵母细胞体外受精及早期胚胎发育障碍 | 第42-43页 |
2.9 显微注射T567D mRNA挽救了由胚胎培养液中的NSC668394导致的早期胚胎发育障碍 | 第43-44页 |
2.10 Ezrin及p-Ezrin (Thr567)蛋白在腹腔注射NSC668394性成熟鼠卵巢及睾丸的表达 | 第44-45页 |
2.11 断奶期ICR雌鼠腹腔注射NSC668394对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 | 第45-46页 |
2.12 断奶期ICR雌鼠腹腔注射NSC668394对小鼠早期胚胎发育的影响 | 第46-47页 |
2.13 腹腔注射NSC668394对小鼠生长发育的影响 | 第47-49页 |
2.13.1 孕鼠腹腔注射NSC668394对孕鼠和仔鼠生长发育的影响 | 第47-48页 |
2.13.2 断奶期小鼠腹腔注射NSC668394对小鼠生长发育的影响 | 第48-49页 |
2.14 新生小鼠断奶卵巢及睾丸的形态学结构(孕期注射NSC668394出生的鼠) | 第49-51页 |
2.14.1 新生小鼠断奶期睾丸组织学结构 | 第49-50页 |
2.14.2 新生小鼠断奶期卵巢组织学结构 | 第50-51页 |
2.15 性成熟鼠卵巢及睾丸组织学结构 | 第51-53页 |
2.15.1 性成熟鼠睾丸组织学结构 | 第51-52页 |
2.15.2 性成熟小鼠卵巢组织学结构 | 第52-53页 |
2.16 Ezrin及p-Ezrin Thr567在新生鼠断奶期睾丸与卵巢的表达与定位 | 第53-56页 |
2.16.1 Ezrin在新生鼠断奶期睾丸及卵巢的表达与定位 | 第53-55页 |
2.16.2 p-Ezrin (Thr567)在断奶期鼠睾丸及卵巢的表达与定位 | 第55-56页 |
2.17 Ezrin及p-Ezrin Thr567在性成熟鼠卵巢及睾丸的表达与定位 | 第56-60页 |
2.17.1 Ezrin在性成熟鼠睾丸及卵巢的表达与定位 | 第56-58页 |
2.17.2 p-Ezrin (Thr567)在性成熟鼠睾丸及卵巢的表达与定位 | 第58-60页 |
3 讨论 | 第60-65页 |
3.1 添加NSC668394对卵母细胞发育的影响 | 第60-61页 |
3.2 添加NSC668394对成熟卵母细胞体外受精的影响 | 第61-62页 |
3.3 添加NSC668394对早期胚胎发育的影响 | 第62-63页 |
3.4 腹腔注射NSC668394对小鼠生长发育的影响 | 第63-64页 |
3.5 腹腔注射NSC668394对小鼠睾丸发育的影响 | 第64页 |
3.6 腹腔注射NSC668394对小鼠卵巢发育的影响 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简历 | 第72页 |