摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 新城疫研究进展 | 第13-22页 |
1.1 新城疫概述 | 第13-16页 |
1.1.1 NDV的结构 | 第13-15页 |
1.1.2 NDV致病性和毒力 | 第15页 |
1.1.3 临床表现 | 第15-16页 |
1.2 病毒受体 | 第16-17页 |
1.2.1 病毒受体的特征 | 第16-17页 |
1.2.2 病毒受体与致病性的关系 | 第17页 |
1.3 唾液酸的基本生物学特性 | 第17-20页 |
1.3.1 唾液酸作为病毒受体 | 第18-19页 |
1.3.2 唾液酸作为NDV受体 | 第19页 |
1.3.3 唾液酸受体的组织分布 | 第19-20页 |
1.3.4 新城疫病毒嗜性与唾液酸的关系 | 第20页 |
1.4 病毒的神经嗜性 | 第20-22页 |
第二章 NDV对鸡脑组织唾液酸受体的影响 | 第22-34页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 病毒 | 第22页 |
2.1.2 鸡胚及动物 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
2.1.4 主要试剂 | 第22页 |
2.1.5 试剂配制 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-27页 |
2.2.1 病毒尿囊液的制备 | 第23页 |
2.2.2 血凝试验(HA) | 第23页 |
2.2.3 病毒感染SPF鸡 | 第23页 |
2.2.4 动物组织采集与处理 | 第23-24页 |
2.2.5 切片的HE染色 | 第24页 |
2.2.6 凝集素免疫组织化学鉴定组织中糖链连接形式 | 第24页 |
2.2.7 免疫组化光密度值分析 | 第24-25页 |
2.2.8 TCID_(50)测定 | 第25页 |
2.2.9 NDV核蛋白(NP)多克隆抗体制备 | 第25页 |
2.2.10 组织免疫荧光染色 | 第25页 |
2.2.11 组织免疫荧光染色 | 第25-26页 |
2.2.12 引物合成 | 第26页 |
2.2.13 组织RNA的提取 | 第26-27页 |
2.2.14 RNA反转录 | 第27页 |
2.2.15 荧光定量PCR(q-PCR) | 第27页 |
2.3 结果 | 第27-31页 |
2.3.1 攻毒鸡临床症状 | 第27-28页 |
2.3.2 鸡脑组织病理学分析 | 第28页 |
2.3.3 病毒半数组织培养感染剂量(TCID_(50))的测定结果 | 第28-29页 |
2.3.4 凝集素免疫组化分析 | 第29-31页 |
2.3.5 免疫荧光结果 | 第31页 |
2.3.6 脑组织ST3Gal3和ST6Gal1的表达 | 第31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
2.5 小结 | 第33-34页 |
第三章 唾液酸在鸡神经细胞对NDV结合和复制能力的影响 | 第34-44页 |
3.1 材料 | 第34页 |
3.1.1 病毒、细胞 | 第34页 |
3.1.2 主要试剂 | 第34页 |
3.1.3 试剂配制 | 第34页 |
3.1.4 主要仪器 | 第34页 |
3.2 方法 | 第34-37页 |
3.2.1 鸡原代神经元细胞培养 | 第34-35页 |
3.2.2 细胞爬片的制备 | 第35页 |
3.2.3 神经原代细胞接毒 | 第35页 |
3.2.4 细胞病毒滴度测定 | 第35-36页 |
3.2.5 免疫细胞化学和免疫荧光 | 第36-37页 |
3.2.6 神经细胞RNA提取 | 第37页 |
3.2.7 RNA反转录及荧光定量PCR | 第37页 |
3.2.8 受体结合实验 | 第37页 |
3.2.9 神经氨酸酶预处理鸡原代神经元细胞 | 第37页 |
3.3 结果 | 第37-42页 |
3.3.1 鸡原代神经元细胞中NDV的复制 | 第37-38页 |
3.3.2 鸡原代神经元细胞表面唾液酸受体分布 | 第38-39页 |
3.3.3 鸡原代神经元细胞免疫荧光染色 | 第39-40页 |
3.3.4 鸡原代神经元细胞ST3Gal3和ST6Gal1的表达 | 第40-41页 |
3.3.5 NDV强弱毒株的细胞结合能力测定 | 第41页 |
3.3.6 神经氨酸酶预处理后NDV强弱毒株结合和复制能力测定 | 第41-42页 |
3.4 讨论 | 第42-43页 |
3.5 小结 | 第43-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者简介 | 第54页 |