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唾液酸受体在新城疫病毒神经嗜性中的作用

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 新城疫研究进展第13-22页
    1.1 新城疫概述第13-16页
        1.1.1 NDV的结构第13-15页
        1.1.2 NDV致病性和毒力第15页
        1.1.3 临床表现第15-16页
    1.2 病毒受体第16-17页
        1.2.1 病毒受体的特征第16-17页
        1.2.2 病毒受体与致病性的关系第17页
    1.3 唾液酸的基本生物学特性第17-20页
        1.3.1 唾液酸作为病毒受体第18-19页
        1.3.2 唾液酸作为NDV受体第19页
        1.3.3 唾液酸受体的组织分布第19-20页
        1.3.4 新城疫病毒嗜性与唾液酸的关系第20页
    1.4 病毒的神经嗜性第20-22页
第二章 NDV对鸡脑组织唾液酸受体的影响第22-34页
    2.1 材料第22-23页
        2.1.1 病毒第22页
        2.1.2 鸡胚及动物第22页
        2.1.3 主要仪器第22页
        2.1.4 主要试剂第22页
        2.1.5 试剂配制第22-23页
    2.2 方法第23-27页
        2.2.1 病毒尿囊液的制备第23页
        2.2.2 血凝试验(HA)第23页
        2.2.3 病毒感染SPF鸡第23页
        2.2.4 动物组织采集与处理第23-24页
        2.2.5 切片的HE染色第24页
        2.2.6 凝集素免疫组织化学鉴定组织中糖链连接形式第24页
        2.2.7 免疫组化光密度值分析第24-25页
        2.2.8 TCID_(50)测定第25页
        2.2.9 NDV核蛋白(NP)多克隆抗体制备第25页
        2.2.10 组织免疫荧光染色第25页
        2.2.11 组织免疫荧光染色第25-26页
        2.2.12 引物合成第26页
        2.2.13 组织RNA的提取第26-27页
        2.2.14 RNA反转录第27页
        2.2.15 荧光定量PCR(q-PCR)第27页
    2.3 结果第27-31页
        2.3.1 攻毒鸡临床症状第27-28页
        2.3.2 鸡脑组织病理学分析第28页
        2.3.3 病毒半数组织培养感染剂量(TCID_(50))的测定结果第28-29页
        2.3.4 凝集素免疫组化分析第29-31页
        2.3.5 免疫荧光结果第31页
        2.3.6 脑组织ST3Gal3和ST6Gal1的表达第31页
    2.4 讨论第31-33页
    2.5 小结第33-34页
第三章 唾液酸在鸡神经细胞对NDV结合和复制能力的影响第34-44页
    3.1 材料第34页
        3.1.1 病毒、细胞第34页
        3.1.2 主要试剂第34页
        3.1.3 试剂配制第34页
        3.1.4 主要仪器第34页
    3.2 方法第34-37页
        3.2.1 鸡原代神经元细胞培养第34-35页
        3.2.2 细胞爬片的制备第35页
        3.2.3 神经原代细胞接毒第35页
        3.2.4 细胞病毒滴度测定第35-36页
        3.2.5 免疫细胞化学和免疫荧光第36-37页
        3.2.6 神经细胞RNA提取第37页
        3.2.7 RNA反转录及荧光定量PCR第37页
        3.2.8 受体结合实验第37页
        3.2.9 神经氨酸酶预处理鸡原代神经元细胞第37页
    3.3 结果第37-42页
        3.3.1 鸡原代神经元细胞中NDV的复制第37-38页
        3.3.2 鸡原代神经元细胞表面唾液酸受体分布第38-39页
        3.3.3 鸡原代神经元细胞免疫荧光染色第39-40页
        3.3.4 鸡原代神经元细胞ST3Gal3和ST6Gal1的表达第40-41页
        3.3.5 NDV强弱毒株的细胞结合能力测定第41页
        3.3.6 神经氨酸酶预处理后NDV强弱毒株结合和复制能力测定第41-42页
    3.4 讨论第42-43页
    3.5 小结第43-44页
结论第44-45页
参考文献第45-53页
致谢第53-54页
作者简介第54页

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