| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第12-21页 |
| 第一章 禽流感及血红素加氧酶1研究进展 | 第12-21页 |
| 1.1 禽流感（AI）简述 | 第12-16页 |
| 1.1.1 禽流感病毒病原学 | 第12-14页 |
| 1.1.2 禽流感病毒的复制 | 第14-15页 |
| 1.1.3 禽流感的流行与危害 | 第15-16页 |
| 1.2 H9N2 AIV研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2.1 H9N2 AIV的流行历史 | 第17页 |
| 1.2.2 H9N2禽流感的临床症状 | 第17-18页 |
| 1.2.3 H9N2 AIV的遗传变异 | 第18页 |
| 1.3 血红素加氧酶-1(HO-1)的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 HO-1 的生物学特征 | 第18-19页 |
| 1.3.2 HO-1 在病毒感染中的作用 | 第19-20页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 试验研究 | 第21-44页 |
| 第二章 H9N2 AIV感染对COEC中HO-1 表达的影响 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 实验动物、毒株及抗体 | 第21页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.4 相关试剂的配制 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 鸡输卵管上皮细胞的制备及鉴定 | 第23-25页 |
| 2.2.1.1 COEC的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.1.2 COEC的传代培养 | 第24页 |
| 2.2.1.3 COEC的鉴别 | 第24-25页 |
| 2.2.2 病毒的增殖 | 第25页 |
| 2.2.3 H9N2流感病毒TCID50的测定 | 第25页 |
| 2.2.4 COEC的接毒及样品收集 | 第25-26页 |
| 2.2.5 定量检测HO-1 及H9N2 AIV mRNA水平的表达情况 | 第26-27页 |
| 2.2.5.1 细胞总RNA的提取 | 第26页 |
| 2.2.5.2 将RNA反转录成c DNA | 第26页 |
| 2.2.5.3 引物的设计与合成 | 第26-27页 |
| 2.2.5.4 实时荧光定量PCR检测 | 第27页 |
| 2.2.6 Western Blot检测HO-1 及H9N2 AIV的蛋白含量变化 | 第27-29页 |
| 2.2.6.1 细胞样品的制备 | 第27页 |
| 2.2.6.2 SDS-PAGE | 第27-28页 |
| 2.2.6.3 转膜(湿转) | 第28页 |
| 2.2.6.4 免疫反应 | 第28-29页 |
| 2.2.6.5 ECL发光检测 | 第29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-33页 |
| 2.3.1 鸡原代输卵管上皮细胞的形态观察 | 第29-30页 |
| 2.3.2 鸡输卵管上皮细胞的鉴定 | 第30页 |
| 2.3.3 H9N2感染COEC后不同时间段细胞的病变情况 | 第30-31页 |
| 2.3.4 H9N2感染COEC不同时间段HO-1 mRN A含量变化 | 第31-32页 |
| 2.3.5 H9N2感染COEC不同时间段HO-1 蛋白的含量变化 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 2.5 小结 | 第34-35页 |
| 第三章 COEC中HO-1表达变化对H9N2 AIV增殖的影响 | 第35-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 细胞、毒株和抗体 | 第35页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第36页 |
| 3.1.4 相关试剂的配制 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 3.2.1 ZnPP抑制HO-1 的表达后对H9N2 AIV增殖水平的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.1.1 ZnPP处理对鸡的输卵管上皮细胞活性的影响 | 第36-37页 |
| 3.2.1.2 不同浓度的ZnPP处理对H9N2 AIV增殖的影响 | 第37页 |
| 3.2.1.3 ZnPP抑制HO-1 的表达后检测H9N2 AIV蛋白含量的变化 | 第37页 |
| 3.2.2 siRNA干扰HO-1 的表达对H9N2 AIV增殖的影响 | 第37-39页 |
| 3.2.2.1 siRN A干扰HO-1 表达时工作浓度的筛选 | 第37-38页 |
| 3.2.2.2 siRN A干扰HO-1 的表达后检测H9N2 AIV的蛋白含量变化 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-42页 |
| 3.3.1 ZnPP抑制HO-1 表达对H9N2 AIV增殖的影响 | 第39-41页 |
| 3.3.1.1 ZnPP处理对COEC活性的影响 | 第39页 |
| 3.3.1.2 不同浓度ZnPP抑制对COEC中HO-1 表达的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.1.3 ZnPP抑制COEC中HO-1 表达对H9N2增殖的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.2 siRNA干扰HO-1 的表达对H9N2 AIV增殖的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.2.1 确定siRN A的工作浓度 | 第41页 |
| 3.3.2.2 siRN A干扰HO-1 表达对H9N2 AIV蛋白含量的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 3.5 小结 | 第43-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 缩略词表 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 个人简介 | 第53页 |
