摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 前言 | 第10-26页 |
1.1 引论 | 第10页 |
1.2 L-色氨酸的理化性质 | 第10页 |
1.3 L-色氨酸的应用 | 第10-12页 |
1.3.1 L-色氨酸在食品领域的应用 | 第10-11页 |
1.3.2 L-色氨酸在医药领域的应用 | 第11页 |
1.3.3 L-色氨酸在饲料领域的应用 | 第11-12页 |
1.3.4 L-色氨酸在农业及环境检测领域的应用 | 第12页 |
1.4 L-色氨酸生产的发展概况 | 第12-13页 |
1.5 L-色氨酸生产菌的构建 | 第13-22页 |
1.5.1 L-色氨酸合成途径的分析 | 第13-17页 |
1.5.2 Red重组系统 | 第17-18页 |
1.5.3 L-色氨酸工程菌的构建历程 | 第18-19页 |
1.5.4 L-色氨酸工程菌的构建策略 | 第19-22页 |
1.6 L-色氨酸的市场分析及工业生产概况 | 第22-23页 |
1.7 本课题研究内容 | 第23-26页 |
1.7.1 增加前体物的合成 | 第23页 |
1.7.2 强化支路代谢乙醛酸循环 | 第23-24页 |
1.7.3 强化能量货币-ATP的合成 | 第24-25页 |
1.7.4 优化初始发酵培养基 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-42页 |
2.1 实验材料 | 第26-31页 |
2.1.1 实验菌种 | 第26-28页 |
2.1.2 主要仪器 | 第28-29页 |
2.1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
2.1.4 主要溶液 | 第30-31页 |
2.2 培养基 | 第31-35页 |
2.2.1 LB培养基 | 第31-32页 |
2.2.2 斜面培养基 | 第32页 |
2.2.3 摇瓶培养种子初始培养基 | 第32-33页 |
2.2.4 摇瓶培养发酵初始培养基 | 第33-34页 |
2.2.5 5L发酵罐培养种子初始培养基 | 第34页 |
2.2.6 30L发酵罐分批发酵初始培养基 | 第34-35页 |
2.2.7 其他培养基 | 第35页 |
2.3 实验方法 | 第35-42页 |
2.3.1 分子实验方法 | 第35-40页 |
2.3.2 发酵培养方法 | 第40-41页 |
2.3.3 发酵液相关测定方法 | 第41-42页 |
3 结果与讨论 | 第42-63页 |
3.1 增加L-色氨酸前体物对L-色氨酸发酵的影响 | 第42-49页 |
3.1.1 E.coli TRTHΔptsG菌株的构建 | 第42-43页 |
3.1.2 E.coli TRTH(pSTV28-KTF)ΔptsG菌株的构建 | 第43-45页 |
3.1.3 TRTH(pSTV28-KTF)ΔptsG, TRTH (pSTV28)ΔptsG和TRTH的发酵对比实验 | 第45-46页 |
3.1.4 E.coli TRTHΔppc菌株的构建 | 第46-48页 |
3.1.5 E.coli TRTHΔppc菌株的摇瓶分批补料发酵结果 | 第48-49页 |
3.2 增加乙醛酸循环支路代谢对L-色氨酸的影响 | 第49-54页 |
3.2.1 E.coli TRTHΔic1R菌株的构建 | 第49-50页 |
3.2.2 iclR基因缺失对L-色氨酸发酵的影响 | 第50-53页 |
3.2.3 讨论 | 第53-54页 |
3.3 增加能量代谢对L-色氨酸发酵的影响 | 第54-60页 |
3.3.1 TRTHΔysaA、TRTHΔydaS和TRTHΔybiX菌株的构建 | 第54-55页 |
3.3.2 TRTHΔysaAΔydaS菌株的构建 | 第55页 |
3.3.3 菌株的发酵验证 | 第55-60页 |
3.4 优化发酵培养基对L-色氨酸发酵的影响 | 第60-63页 |
4 结论 | 第63-64页 |
5 展望 | 第64-65页 |
6 参考文献 | 第65-71页 |
7 研究生期间所发表论文情况 | 第71-72页 |
8 致谢 | 第72页 |