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斜纹夜蛾与棉铃虫化感基因鉴定及受体功能分析

摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
英文缩略语第15-16页
第一章 文献综述第16-34页
    1.1 昆虫的触角第16-19页
        1.1.1 昆虫触角感受器的类型及功能第16-17页
        1.1.2 昆虫触角感受气味分子的机制第17-19页
    1.2 鳞翅目昆虫性信息素第19-21页
    1.3 昆虫气味受体的研究进展第21-25页
        1.3.1 气味受体的鉴定第21页
        1.3.2 气味受体的结构特性第21-23页
        1.3.3 气味受体的功能研究第23-25页
    1.4 昆虫感觉神经元膜蛋白的研究进展第25-27页
        1.4.1 昆虫感觉神经元膜蛋白的鉴定及特点第25页
        1.4.2 昆虫感觉神经元膜蛋白的特点及分布第25-27页
        1.4.3 昆虫感觉神经元膜蛋白的功能研究第27页
    1.5 昆虫离子型受体的研究进展第27-28页
    1.6 昆虫气味结合蛋白的研究进展第28-30页
        1.6.1 昆虫气味结合蛋白的特征及分类第28-29页
        1.6.2 昆虫气味结合蛋白的功能研究第29-30页
    1.7 昆虫化学感受蛋白的研究进展第30-31页
    1.8 斜纹夜蛾与棉铃虫嗅觉研究进展第31-32页
    1.9 本研究的目的和意义第32-34页
第二章 斜纹夜蛾性信息素受体基因的克隆、表达及功能研究第34-50页
    2.1 材料与方法第35-41页
        2.1.1 供试昆虫第35页
        2.1.2 主要试剂及仪器设备第35-36页
        2.1.3 RNA的提取第36页
        2.1.4 第一链cDNA的合成第36-37页
        2.1.5 各类引物的设计第37页
        2.1.6 PCR反应体系及反应程序第37-38页
        2.1.7 RACE技术扩增ORs基因的cDNA全序列第38页
        2.1.8 PCR产物纯化、克隆和测序第38页
        2.1.9 序列分析第38-39页
        2.1.10 数据统计与分析第39页
        2.1.11 表达载体构建、cRNA合成和功能鉴定第39-41页
        2.1.12 斜纹夜蛾PR功能鉴定第41页
    2.2 结果与分析第41-48页
        2.2.1 斜纹夜蛾PR基因克隆及序列分析第41-44页
        2.2.3 斜纹夜蛾PR基因的组织表达谱第44页
        2.2.4 斜纹夜蛾PR的功能研究第44-48页
    2.3 讨论第48-50页
第三章 斜纹夜蛾普通气味受体基因的克隆、表达定位及功能研究第50-64页
    3.1 材料与方法第51-57页
        3.1.1 供试昆虫和组织收集第51页
        3.1.2 主要试剂及仪器设备第51-53页
        3.1.3 RNA的提取第53页
        3.1.4 第一链cDNA的合成第53页
        3.1.5 各类引物设计第53-54页
        3.1.6 PCR反应体系及反应程序第54页
        3.1.7 RACE技术扩增OR基因的cDNA全序列第54页
        3.1.8 PCR产物纯化、克隆和测序第54页
        3.1.9 斜纹夜蛾OR基因系统发育分析第54-55页
        3.1.10 探针合成及原位杂交第55-57页
        3.1.11 cRNA合成第57页
        3.1.12 斜纹夜蛾OR功能鉴定第57页
    3.2 结果与分析第57-61页
        3.2.1 斜纹夜蛾OR克隆和进化分析第57-58页
        3.2.2 斜纹夜蛾OR的组织表达谱第58-59页
        3.2.3 斜纹夜蛾OR功能鉴定第59页
        3.2.4 斜纹夜蛾OR12在触角中的表达定位第59-61页
    3.3 讨论第61-64页
第四章 斜纹夜蛾感觉神经元膜蛋白基因的克隆及表达定位第64-76页
    4.1 材料与方法第65-67页
        4.1.1 试虫及试虫收集第65页
        4.1.2 主要试剂及仪器设备第65页
        4.1.3 昆虫总RNA的提取及cDNA第一链的合成第65页
        4.1.4 斜纹夜蛾SNMPs基因引物设计第65-66页
        4.1.5 PCR反应体系及反应程序第66页
        4.1.6 RACE技术扩增SNMPs基因的cDNA全长序列第66页
        4.1.7 PCR产物纯化、克隆和测序第66页
        4.1.8 斜纹夜蛾SNMPs系统发育分析第66-67页
        4.1.9 探针合成及原位杂交第67页
    4.2 结果与分析第67-74页
        4.2.1 斜纹夜蛾SNMP基因的克隆第67-69页
        4.2.2 鳞翅目昆虫SNMP的序列比较及分析第69-71页
        4.2.3 斜纹夜蛾SNMP基因的组织表达谱第71-72页
        4.2.4 斜纹夜蛾SNMP在雄虫触角中的表达定位第72-74页
    4.3 讨论第74-76页
第五章 棉铃虫触角转录组测序及嗅觉感受基因的鉴定第76-94页
    5.1 材料与方法第77-82页
        5.1.1 供试昆虫第77页
        5.1.2 主要试剂及仪器设备第77页
        5.1.3 昆虫总RNA的提取第77页
        5.1.4 cDNA文库构建和Illumina测序第77页
        5.1.5 转录组的拼接组装和基因注释第77-78页
        5.1.6 嗅觉基因的注释第78页
        5.1.7 棉铃虫与烟青虫嗅觉基因系统发育分析第78-82页
    5.2 结果与分析第82-92页
        5.2.1 棉铃虫转录组组装及功能注释第82-83页
        5.2.2 棉铃虫气味受体基因的鉴定第83-87页
        5.2.3 棉铃虫离子型受体鉴定第87-88页
        5.2.4 棉铃虫气味结合蛋白鉴定第88-90页
        5.2.5 棉铃虫化学感受蛋白的鉴定第90-92页
        5.2.6 棉铃虫感觉神经元膜蛋白的鉴定第92页
    5.3 讨论第92-94页
第六章 棉铃虫气味受体的克隆、表达及功能鉴定第94-110页
    6.1 材料与方法第95-101页
        6.1.1 试虫及试虫收集第95页
        6.1.2 主要试剂及仪器设备第95-97页
        6.1.3 昆虫总RNA的提取及cDNA第一链的合成第97页
        6.1.4 棉铃虫OR基因引物设计第97-101页
        6.1.5 PCR反应体系及反应程序第101页
        6.1.6 RACE技术扩增OR基因的cDNA全序列第101页
        6.1.7 PCR产物纯化、克隆和测序第101页
        6.1.8 cRNA合成第101页
        6.1.9 斜纹夜蛾OR功能鉴定第101页
    6.2 结果与分析第101-109页
        6.2.1 棉铃虫OR基因组织表达分析第101-103页
        6.2.2 棉铃虫OR基因的全长克隆第103-105页
        6.2.3 棉铃虫OR功能研究第105-109页
    6.3 讨论第109-110页
全文总结第110-112页
参考文献第112-122页
附录: 攻读博士学位期间发表的学术论文及参加的学术会议第122-124页
致谢第124页

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