| 摘要 | 第10-14页 |
| ABSTRACT | 第14-19页 |
| 英文缩略语 | 第20-22页 |
| 第1章 文献综述 | 第22-44页 |
| 1.1 昆虫嗅觉感受机制 | 第22-24页 |
| 1.2 昆虫气味结合蛋白的研究进展 | 第24-33页 |
| 1.2.1 气味结合蛋白的数量和分类 | 第24-25页 |
| 1.2.2 气味结合蛋白的表达分布 | 第25-27页 |
| 1.2.3 气味结合蛋白的三维结构及其对气味分子的结合与释放机制 | 第27-31页 |
| 1.2.4 气味结合蛋白的功能研究进展 | 第31-33页 |
| 1.3 昆虫化学感受蛋白的研究进展 | 第33-37页 |
| 1.3.1 化学感受蛋白的数量种类及命名 | 第34页 |
| 1.3.2 化学感受蛋白的三维结构 | 第34-36页 |
| 1.3.3 化学感受蛋白的表达分布与生理功能 | 第36-37页 |
| 1.4 昆虫气味受体的研究进展 | 第37-39页 |
| 1.4.1 气味受体的鉴定 | 第37页 |
| 1.4.2 昆虫气味受体的分子结构 | 第37-38页 |
| 1.4.3 典型性气味受体的功能研究 | 第38-39页 |
| 1.4.4 非典型性气味受体的功能研究 | 第39页 |
| 1.5 昆虫离子型受体的研究进展 | 第39-41页 |
| 1.5.1 昆虫离子型受体的鉴定 | 第39-40页 |
| 1.5.2 昆虫离子型受体的分子结构及功能 | 第40-41页 |
| 1.6 昆虫气味降解酶的研究进展 | 第41-42页 |
| 1.7 本研究的立题依据及意义 | 第42-44页 |
| 1.7.1 立题依据 | 第42-43页 |
| 1.7.2 研究意义 | 第43-44页 |
| 第2章 大草蛉嗅觉相关基因的鉴定、组织表达谱及数字基因表达谱分析 | 第44-68页 |
| 2.1 材料与方法 | 第44-53页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第44-45页 |
| 2.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第45页 |
| 2.1.3 总RNA的提取 | 第45-46页 |
| 2.1.4 cDNA的合成 | 第46-47页 |
| 2.1.5 cDNA文库构建和Illumina测序 | 第47页 |
| 2.1.6 转录组的拼接组装和注释 | 第47-48页 |
| 2.1.7 嗅觉相关基因的序列分析 | 第48页 |
| 2.1.8 CpalOR基因的半定量分析 | 第48-49页 |
| 2.1.9 嗅觉相关基因的表达谱分析(qPCR) | 第49-51页 |
| 2.1.10 DGE文库构建和测序 | 第51-52页 |
| 2.1.11 DGE数据分析 | 第52-53页 |
| 2.2 结果与分析 | 第53-66页 |
| 2.2.1 转录组测序产量统计 | 第53页 |
| 2.2.2 转录组与其它昆虫的同源比对 | 第53-54页 |
| 2.2.3 CpalOBP基因的鉴定及表达谱分析 | 第54-56页 |
| 2.2.4 CpalCSP基因的鉴定及表达谱分析 | 第56-58页 |
| 2.2.5 CpalOR基因的鉴定及表达谱分析 | 第58-64页 |
| 2.2.6 不同组织的DGE数据分析 | 第64-66页 |
| 2.3 讨论 | 第66-68页 |
| 第3章 中华通草蛉嗅觉相关基因的鉴定和组织表达谱分析 | 第68-84页 |
| 3.1 材料与方法 | 第68-72页 |
| 3.1.1 供试昆虫 | 第68-69页 |
| 3.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第69页 |
| 3.1.3 总RNA的提取 | 第69页 |
| 3.1.4 cDNA的合成 | 第69页 |
| 3.1.5 cDNA文库构建和Illumina测序 | 第69页 |
| 3.1.6 转录组的拼接组装和注释 | 第69页 |
| 3.1.7 嗅觉相关基因的序列分析 | 第69页 |
| 3.1.8 CsinOR基因的半定量研究 | 第69页 |
| 3.1.9 嗅觉相关基因的表达谱分析(qPCR) | 第69-72页 |
| 3.2 结果与分析 | 第72-83页 |
| 3.2.1 转录组测序产量统计 | 第72-73页 |
| 3.2.2 转录组与其它昆虫的同源比对 | 第73页 |
| 3.2.3 CsinOBP基因的鉴定及表达谱分析 | 第73-75页 |
| 3.2.4 CsinCSP基因的鉴定及表达谱分析 | 第75-77页 |
| 3.2.5 CsinOR基因的鉴定及表达谱分析 | 第77-83页 |
| 3.3 讨论 | 第83-84页 |
| 第4章 大草蛉与中华通草蛉嗅觉相关基因的比较分析 | 第84-94页 |
| 4.1 材料与方法 | 第84-85页 |
| 4.1.1 转录组数据的GO分类 | 第84-85页 |
| 4.1.2 转录本表达丰度的分析 | 第85页 |
| 4.1.3 中华通草蛉与大草蛉嗅觉相关基因的系统发育分析 | 第85页 |
| 4.1.4 中华通草蛉与大草蛉嗅觉相关基因的的半定量分析 | 第85页 |
| 4.2 结果与分析 | 第85-92页 |
| 4.2.1 转录本的GO分类 | 第85-86页 |
| 4.2.2 OBP基因的比较分析 | 第86-88页 |
| 4.2.3 CSP基因的比较分析 | 第88-89页 |
| 4.2.4 OR基因的比较分析 | 第89-92页 |
| 4.3 讨论 | 第92-94页 |
| 第5章 大草蛉气味结合蛋白的功能研究 | 第94-114页 |
| 5.1 材料与方法 | 第95-103页 |
| 5.1.1 供试昆虫 | 第95页 |
| 5.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第95-96页 |
| 5.1.3 总RNA的提取 | 第96页 |
| 5.1.4 cDNA的合成 | 第96页 |
| 5.1.5 PCR反应体系及反应程序 | 第96页 |
| 5.1.6 PCR产物纯化、克隆和测序 | 第96-97页 |
| 5.1.7 CaplOBP原核表达载体的构建 | 第97-100页 |
| 5.1.8 CaplOBP重组蛋白的诱导表达 | 第100页 |
| 5.1.9 重组蛋白层析纯化及肠激酶酶解 | 第100-101页 |
| 5.1.10 CaplOBP与气味物质的体外结合试验 | 第101-103页 |
| 5.1.11 “Y”形管双向生物活性测定 | 第103页 |
| 5.2 结果与分析 | 第103-111页 |
| 5.2.1 CpalOBP的体外表达和纯化 | 第103-104页 |
| 5.2.2 1-NPN与CpalOBP的结合曲线测定 | 第104-105页 |
| 5.2.3 CpalOBP与气味物质的结合能力 | 第105-109页 |
| 5.2.4 “Y”形管双向生物活性测定 | 第109-111页 |
| 5.3 讨论 | 第111-114页 |
| 第6章 中华通草蛉气味结合蛋白的功能研究 | 第114-126页 |
| 6.1 材料与方法 | 第115-117页 |
| 6.1.1 供试昆虫 | 第115页 |
| 6.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第115页 |
| 6.1.3 总RNA的提取 | 第115页 |
| 6.1.4 cDNA的合成 | 第115页 |
| 6.1.5 PCR反应体系及反应程序 | 第115页 |
| 6.1.6 PCR产物纯化、克隆和测序 | 第115页 |
| 6.1.7 CsinOBP原核表达载体引物的设计及构建 | 第115-117页 |
| 6.1.8 CsinOBP重组蛋白的诱导表达 | 第117页 |
| 6.1.9 重组蛋白层析纯化及凝血酶酶解 | 第117页 |
| 6.1.10 CsinOBP与气味物质的体外结合试验 | 第117页 |
| 6.2 结果与分析 | 第117-123页 |
| 6.2.1 CsinOBP的体外表达和纯化 | 第117-118页 |
| 6.2.2 1-NPN与CsinOBP的结合曲线测定 | 第118-119页 |
| 6.2.3 CsinOBP与气味物质的结合能力 | 第119-123页 |
| 6.3 讨论 | 第123-126页 |
| 第7章 棉铃虫2个特殊气味结合蛋白的分子鉴定及功能研究 | 第126-142页 |
| 7.1 材料与方法 | 第127-130页 |
| 7.1.1 供试昆虫 | 第127页 |
| 7.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第127-128页 |
| 7.1.3 总RNA的提取 | 第128页 |
| 7.1.4 cDNA的合成 | 第128页 |
| 7.1.5 PCR反应体系及反应程序 | 第128页 |
| 7.1.6 PCR产物纯化、克隆和测序 | 第128页 |
| 7.1.7 HarmOBP基因系统发育分析 | 第128页 |
| 7.1.8 HarmOBP基因的表达谱分析 | 第128页 |
| 7.1.9 HarmOBP原核表达载体引物的设计及构建 | 第128页 |
| 7.1.10 HarmOBP突变体的原核表达载体引物的设计及构建 | 第128-129页 |
| 7.1.11 HarmOBP重组蛋白的诱导表达 | 第129页 |
| 7.1.12 重组蛋白层析纯化及凝血酶酶解 | 第129-130页 |
| 7.1.13 不同pH下HarmOBP及其突变体与气味物质的体外结合试验 | 第130页 |
| 7.1.14 不同pH下HarmOBP及其突变体与气味物质的内荧光测定 | 第130页 |
| 7.2 结果与分析 | 第130-140页 |
| 7.2.1 HarmOBP基因的全长克隆及序列分析 | 第130页 |
| 7.2.2 HarmOBP基因的二维结构预测 | 第130-131页 |
| 7.2.3 HarmOBP基因的系统发育分析 | 第131-132页 |
| 7.2.4 HarmOBP基因的时空表达分析 | 第132-133页 |
| 7.2.5 HarmOBP的体外表达和纯化 | 第133-134页 |
| 7.2.6 荧光竞争结合试验检测HarmOBP与气味物质的结合能力 | 第134-136页 |
| 7.2.7 pH和C-末端对HarmOBP与气味物质的结合能力影响 | 第136-140页 |
| 7.3 讨论 | 第140-142页 |
| 第8章 棉铃虫化学感受蛋白的分子鉴定及功能研究 | 第142-160页 |
| 8.1 材料与方法 | 第143-149页 |
| 8.1.1 供试昆虫 | 第143页 |
| 8.1.2 主要试剂及仪器设备 | 第143-144页 |
| 8.1.3 总RNA的提取 | 第144页 |
| 8.1.4 cDNA的合成 | 第144页 |
| 8.1.5 PCR反应体系及反应程序 | 第144页 |
| 8.1.6 PCR产物纯化、克隆和测序 | 第144页 |
| 8.1.7 HarmCSP基因系统发育分析 | 第144页 |
| 8.1.8 HarmCSP基因的表达谱分析 | 第144-145页 |
| 8.1.9 HarmCSP原核表达载体引物的设计及构建 | 第145-146页 |
| 8.1.10 HarmCSP重组蛋白的诱导表达 | 第146页 |
| 8.1.11 重组蛋白层析纯化及凝血酶酶解 | 第146页 |
| 8.1.12 HarmCSP与气味物质的体外结合试验 | 第146页 |
| 8.1.13 HarmCSP6的三维结构预测 | 第146页 |
| 8.1.14 原位杂交 | 第146-149页 |
| 8.2 结果与分析 | 第149-157页 |
| 8.2.1 HarmCSP基因的全长克隆及序列分析 | 第149-150页 |
| 8.2.2 HarmCSP基因的系统发育分析 | 第150-151页 |
| 8.2.3 HarmCSP基因的组织及性别差异表达分析 | 第151-152页 |
| 8.2.4 HarmCSP的体外表达和纯化 | 第152-153页 |
| 8.2.5 HarmCSP与气味物质的结合能力 | 第153-154页 |
| 8.2.6 HarmCSP6在雌雄虫触角中的表达定位 | 第154-156页 |
| 8.2.7 HarmCSP6的三维结构预测 | 第156-157页 |
| 8.3 讨论 | 第157-160页 |
| 全文总结 | 第160-162页 |
| 参考文献 | 第162-174页 |
| 附录；攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第174-176页 |
| 致谢 | 第176页 |
