| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 英文缩写一览表 | 第10-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 CAMRs的结构和功能 | 第12-13页 |
| 1.2 RyR的结构和功能 | 第13-14页 |
| 1.3 PP2A的结构和功能 | 第14-15页 |
| 1.4 PP2B的结构和功能 | 第15-17页 |
| 1.5 CAMR1、CAMR2与心脏肥大 | 第17-20页 |
| 1.5.1 CAMR1、CAMR2与RyR钙离子释放通道 | 第17-19页 |
| 1.5.2 PP2A与心脏肥大 | 第19页 |
| 1.5.3 调控心脏肥大的Ca~(2+)-NFATc信号通路 | 第19-20页 |
| 1.6 本课题的研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 第2章 材料与方法 | 第22-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-30页 |
| 2.1.1 活体材料 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.3 溶液配制 | 第24-29页 |
| 2.1.4 常用仪器设备 | 第29-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-48页 |
| 2.2.1 分子克隆 | 第30-39页 |
| 2.2.2 细胞培养的系统操作 | 第39-42页 |
| 2.2.3 Western blot | 第42-44页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR | 第44-46页 |
| 2.2.5 统计学分析 | 第46-48页 |
| 第3章 实验结果与分析 | 第48-78页 |
| 3.1 表达载体的构建 | 第48-53页 |
| 3.1.1 CAMR1和CAMR2基因的克隆 | 第48-49页 |
| 3.1.2 共表达载体和融合表达载体的构建 | 第49-53页 |
| 3.2 细胞瞬时转染 | 第53-56页 |
| 3.2.1 磷酸钙共沉淀法瞬时转染重组质粒进入HEK293细胞 | 第53-54页 |
| 3.2.2 PEI法瞬时转染重组质粒进入C2C12,NIH/3T3和CHO细胞 | 第54-56页 |
| 3.3 CAMR1和CAMR2对细胞体积的影响 | 第56-60页 |
| 3.3.1 CAMR1和CAMR2对HEK293细胞体积的影响 | 第56-58页 |
| 3.3.2 CAMR1和CAMR2对CHO细胞体积的影响 | 第58-60页 |
| 3.4 CAMR1和CAMR2对心脏肥大相关基因蛋白水平表达的影响 | 第60-67页 |
| 3.4.1 BCA法测定蛋白质的浓度 | 第60-61页 |
| 3.4.2 CAMR1和CAMR2对PP2A蛋白表达的影响 | 第61-64页 |
| 3.4.3 CAMR1和CAMR2对PP2B蛋白表达的影响 | 第64-67页 |
| 3.5 CAMR1和CAMR2对心脏肥大相关基因mRNA水平表达的影响 | 第67-78页 |
| 3.5.1 总RNA质量检测 | 第67-68页 |
| 3.5.2 引物及模板质量检测 | 第68-70页 |
| 3.5.3 目的基因与内参基因扩增效率一致性检测 | 第70-73页 |
| 3.5.4 CAMR1和CAMR2对PP2A、PP2B mRNA水平表达的影响 | 第73-78页 |
| 第4章 讨论 | 第78-84页 |
| 4.1 细胞特性和转染介质与转染效率的相关性 | 第78-80页 |
| 4.2 CAMR1和CAMR2调节细胞体积的变化 | 第80页 |
| 4.3 CAMR1和CAMR2调控心脏肥大相关基因的表达 | 第80-82页 |
| 4.4 结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 攻读硕士学位期间的科研成果 | 第96页 |
