| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 英文缩略词表 | 第14-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-21页 |
| 1.1 中草药在肿瘤研究中的应用现状分析 | 第15-16页 |
| 1.2 中草药逆转肿瘤多药耐药研究 | 第16-17页 |
| 1.2.1 肿瘤细胞的多药耐药性 | 第16-17页 |
| 1.2.2 中药逆转肿瘤多药耐药的研究 | 第17页 |
| 1.3 天然药物活性成分诱导肿瘤细胞凋亡的研究 | 第17-19页 |
| 1.3.1 细胞凋亡概述 | 第17-18页 |
| 1.3.2 天然药物活性成分诱导肿瘤细胞凋亡的机制研究 | 第18-19页 |
| 1.4 药用苔藓类大金发藓的药理活性研究 | 第19-21页 |
| 第2章 研究论文的立论依据、内容和目的意义 | 第21-23页 |
| 第3章 PC-EEF制备及化学成分分析 | 第23-29页 |
| 3.1 引言 | 第23页 |
| 3.2 材料 | 第23-24页 |
| 3.2.1 试剂与配制 | 第23页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第23-24页 |
| 3.3 方法 | 第24-26页 |
| 3.3.1 PC-EEF的制备 | 第24-25页 |
| 3.3.2 总黄酮含量测定 | 第25页 |
| 3.3.3 HPLC分析 | 第25页 |
| 3.3.4 统计学分析 | 第25-26页 |
| 3.4 结果 | 第26-27页 |
| 3.4.1 PC-EEF总黄酮含量测定 | 第26页 |
| 3.4.2 PC-EEF中黄酮类化合物的HPLC分析 | 第26-27页 |
| 3.5 讨论 | 第27-28页 |
| 3.6 小结 | 第28-29页 |
| 第4章 PC-EEF对人白血病K562和K562/DOX细胞的杀伤作用研究 | 第29-43页 |
| 4.1 引言 | 第29页 |
| 4.2 材料 | 第29-31页 |
| 4.2.1 细胞来源 | 第29页 |
| 4.2.2 试剂与配制 | 第29-30页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第30-31页 |
| 4.3 方法 | 第31-34页 |
| 4.3.1 K562、K562/DOX细胞的常规培养、冻存和复苏 | 第31页 |
| 4.3.2 人外周血单核细胞(PBMCs)分离 | 第31页 |
| 4.3.3 细胞存活率测定 | 第31-32页 |
| 4.3.4 台盼蓝染色实验 | 第32页 |
| 4.3.5 克隆形成实验 | 第32页 |
| 4.3.6 EdU插入实验 | 第32页 |
| 4.3.7 扫描电子显微镜观察 | 第32-33页 |
| 4.3.8 细胞质膜通透性检测 | 第33页 |
| 4.3.9 细胞质膜电位测定 | 第33页 |
| 4.3.10 细胞核形态观察 | 第33页 |
| 4.3.11 细胞凋亡率定量测定 | 第33页 |
| 4.3.12 统计学分析 | 第33-34页 |
| 4.4 结果 | 第34-39页 |
| 4.4.1 PC-EEF抑制K562、K562/DOX细胞存活力 | 第34页 |
| 4.4.2 PC-EEF对PBMCs细胞存活力的影响 | 第34-35页 |
| 4.4.3 PC-EEF对K562细胞的增殖抑制作用 | 第35-36页 |
| 4.4.4 PC-EEF对K562、K562/DOX细胞的细胞膜损伤效应 | 第36-37页 |
| 4.4.5 PC-EEF诱导K562、K562/DOX细胞凋亡 | 第37-39页 |
| 4.5 讨论 | 第39-41页 |
| 4.6 小结 | 第41-43页 |
| 第5章 Ca~(2+)调控PC-EEF诱导的K562细胞凋亡 | 第43-55页 |
| 5.1 引言 | 第43页 |
| 5.2 材料 | 第43-46页 |
| 5.2.1 细胞来源 | 第43页 |
| 5.2.2 试剂与配制 | 第43-46页 |
| 5.2.3 仪器设备 | 第46页 |
| 5.3 方法 | 第46-50页 |
| 5.3.1 细胞内Ca~(2+)水平分析 | 第46-47页 |
| 5.3.2 线粒体膜电位变化 | 第47页 |
| 5.3.3 细胞色素C转定位观察 | 第47页 |
| 5.3.4 Western Blotting检测 | 第47-49页 |
| 5.3.5 Ca~(2+)螯合剂实验 | 第49-50页 |
| 5.3.6 统计学分析 | 第50页 |
| 5.4 结果 | 第50-53页 |
| 5.4.1 PC-EEF触发K562细胞内Ca~(2+)稳态扰乱 | 第50页 |
| 5.4.2 PC-EEF诱导K562细胞发生线粒体依赖性凋亡 | 第50-52页 |
| 5.4.3 Ca~(2+)调控PC-EEF诱导的K562细胞凋亡 | 第52-53页 |
| 5.5 讨论 | 第53页 |
| 5.6 小结 | 第53-55页 |
| 第6章 PC-EEF协同增敏DOX对K562/DOX细胞的抗癌效应 | 第55-73页 |
| 6.1 引言 | 第55页 |
| 6.2 材料 | 第55-56页 |
| 6.2.1 细胞来源 | 第55页 |
| 6.2.2 试剂与配制 | 第55-56页 |
| 6.2.3 仪器设备 | 第56页 |
| 6.3 方法 | 第56-60页 |
| 6.3.1 K562/DOX细胞耐药性检测 | 第56-57页 |
| 6.3.2 PC-EEF联合DOX对细胞存活力的影响 | 第57页 |
| 6.3.3 联合指数分析 | 第57页 |
| 6.3.4 Guava Viacount实验 | 第57页 |
| 6.3.5 PC-EEF联合DOX对细胞凋亡的影响 | 第57-58页 |
| 6.3.6 P-gp功能检测 | 第58页 |
| 6.3.7 免疫荧光测定P-gp表达的变化 | 第58页 |
| 6.3.8 细胞内ROS水平分析 | 第58-59页 |
| 6.3.9 DNA损伤检测 | 第59页 |
| 6.3.10 线粒体膜电位测定 | 第59页 |
| 6.3.11 Western Blotting检测 | 第59页 |
| 6.3.12 ROS抑制剂实验 | 第59-60页 |
| 6.3.13 统计学分析 | 第60页 |
| 6.4 结果 | 第60-69页 |
| 6.4.1 K562/DOX细胞对DOX、PC-EEF敏感性的比较 | 第60页 |
| 6.4.2 PC-EEF协同增敏DOX对K562/DOX细胞的抗癌效应 | 第60-62页 |
| 6.4.3 PC-EEF协同DOX增强K562/DOX细胞凋亡 | 第62页 |
| 6.4.4 PC-EEF抑制P-gp的功能和表达 | 第62-64页 |
| 6.4.5 PC-EEF联合DOX抑制PI3K/Akt信号通路活化 | 第64页 |
| 6.4.6 PC-EEF协同DOX诱导K562/DOX细胞产生内源性ROS | 第64-65页 |
| 6.4.7 PC-EEF联合DOX加剧K562/DOX细胞DNA损伤 | 第65-66页 |
| 6.4.8 PC-EEF联合DOX诱发的线粒体损伤研究 | 第66-67页 |
| 6.4.9 ROS在联合用药诱导K562/DOX细胞凋亡中的作用 | 第67-69页 |
| 6.5 讨论 | 第69-70页 |
| 6.6 小结 | 第70-73页 |
| 第7章 结论 | 第73-77页 |
| 参考文献 | 第77-87页 |
| 致谢 | 第87-89页 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 | 第89-90页 |
