| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| ·MAPK级联信号途径 | 第13-16页 |
| ·植物MAPK级联信号途径的结构特点 | 第14页 |
| ·植物MAPK级联途径的分类 | 第14-15页 |
| ·已发现的植物MAPK级联途径 | 第15-16页 |
| ·植物中MAPKKKs的生物学功能 | 第16-19页 |
| ·MAPKKKs与生物、非生物胁迫信号传递 | 第17页 |
| ·MAPKKKs与植物生长发育和细胞凋亡 | 第17-18页 |
| ·MAPKKKs与活性氧 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-36页 |
| ·实验材料 | 第20-23页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·菌株与质粒 | 第20页 |
| ·生化试剂 | 第20页 |
| ·引物及程序 | 第20-23页 |
| ·实验方法 | 第23-36页 |
| ·棉花的培养与处理 | 第23-24页 |
| ·c DNA的提取 | 第24-27页 |
| ·Trizol法提取植物总RNA | 第24-25页 |
| ·总RNA中基因组的去除 | 第25页 |
| ·甲醛变性凝胶电泳 | 第25-26页 |
| ·c DNA第一链的合成 | 第26页 |
| ·c DNA的纯化 | 第26页 |
| ·c DNA的 5′末端加尾 | 第26-27页 |
| ·目的片段的序列测定 | 第27-29页 |
| ·目的片段的回收 | 第27页 |
| ·回收产物与载体连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌DH5α 感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌DH5α 感受态细胞的转化 | 第28页 |
| ·大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第29页 |
| ·DNA序列测序 | 第29页 |
| ·c DNA全长序列的测定 | 第29-30页 |
| ·中间片段的获得 | 第29页 |
| ·5′端序列的获得 | 第29-30页 |
| ·3′端序列的获得 | 第30页 |
| ·c DNA全长的获得 | 第30页 |
| ·植物基因组的提取 | 第30-31页 |
| ·CTAB法提取棉花基因组DNA | 第30页 |
| ·小量法提取基因组DNA | 第30-31页 |
| ·基因组序列的获得 | 第31页 |
| ·启动子序列的获得 | 第31页 |
| ·实时荧光定量PCR检测目的基因表达量 | 第31页 |
| ·真核表达载体的构建及转基因植株的获得及鉴定 | 第31-33页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第31-32页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第32页 |
| ·农杆菌感受态细胞的转化 | 第32页 |
| ·农杆菌介导的本生烟转化 | 第32-33页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第33页 |
| ·转基因植株抗病功能分析 | 第33-35页 |
| ·接种细菌 | 第33-34页 |
| ·接种真菌 | 第34页 |
| ·3,3′-二氨基联苯胺（DAB）染色 | 第34页 |
| ·植株抗氧化酶活性测定 | 第34页 |
| ·转基因植株抗病性数据统计 | 第34-35页 |
| ·酵母试验 | 第35页 |
| ·网络资源及数据库 | 第35页 |
| ·生物学软件 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-63页 |
| ·棉花Gh MAPKKK49基因的克隆及序列分析 | 第36-41页 |
| ·Gh MAPKKK49中间片段的分离 | 第36页 |
| ·Gh MAPKKK493′端片段的分离 | 第36-37页 |
| ·Gh MAPKKK495′端片段的分离 | 第37页 |
| ·Gh MAPKKK49 c DNA序列的分离 | 第37-38页 |
| ·Gh MAPKKK49核苷酸序列的分析 | 第38页 |
| ·Gh MAPKKK49氨基酸序列的分析 | 第38-40页 |
| ·Gh MAPKKK49进化关系分析 | 第40-41页 |
| ·棉花Gh MAPKKK49基因的相关生物学功能分析 | 第41-45页 |
| ·Gh MAPKKK49 m RNA水平表达谱分析 | 第41-44页 |
| ·非生物胁迫对Gh MAPKKK49 m RNA水平变化的影响 | 第41-42页 |
| ·生物胁迫对Gh MAPKKK49 m RNA水平变化的影响 | 第42-43页 |
| ·信号分子对Gh MAPKKK49 m RNA水平变化的影响 | 第43-44页 |
| ·Gh MAPKKK49与棉花MAPKKs的蛋白相互作用 | 第44-45页 |
| ·棉花Gh MAPKKK65基因的分离及序列分析 | 第45-51页 |
| ·Gh MAPKKK65全长c DNA序列的分离 | 第45-46页 |
| ·Gh MAPKKK65编码的氨基酸序列分析和进化树分析 | 第46-49页 |
| ·Gh MAPKKK65的基因组DNA分离与分析 | 第49-50页 |
| ·Gh MAPKKK65启动子序列的分离与分析 | 第50-51页 |
| ·棉花Gh MAPKKK65基因的相关生物学功能分析 | 第51-63页 |
| ·Gh MAPKKK65的表达模式分析 | 第51-54页 |
| ·非生物胁迫对Gh MAPKKK65 m RNA水平变化的影响 | 第51-52页 |
| ·生物胁迫对Gh MAPKKK65 m RNA水平变化的影响 | 第52-53页 |
| ·信号分子对Gh MAPKKK65 m RNA水平变化的影响 | 第53-54页 |
| ·Gh MAPKKK65基因超表达转基因本生烟的获取 | 第54-56页 |
| ·Gh MAPKKK65基因正义表达载体的构建 | 第54-55页 |
| ·超表达Gh MAPKKK65本生烟的获得 | 第55-56页 |
| ·Gh MAPKKK65超表达植株对生物胁迫的抗性分析 | 第56-61页 |
| ·Gh MAPKKK65超表达植株提高了植株对烟草青枯病原菌的敏感性 | 第56-57页 |
| ·Gh MAPKKK65超表达叶片对青枯菌的敏感性分析 | 第57-59页 |
| ·Gh MAPKKK65超表达植株提高了植株对棉花立枯病原菌的敏感性 | 第59-60页 |
| ·Gh MAPKKK65超表达叶片对立枯菌的敏感性分析 | 第60-61页 |
| ·Gh MAPKKK65与棉花MAPKKs的蛋白相互作用 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-68页 |
| 5 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第75页 |
