| 符号说明 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-29页 |
| ·蛋白质中半胱氨酸的巯基/二硫键转换 | 第13-16页 |
| ·蛋白质中半胱氨酸侧链巯基的修饰 | 第13-14页 |
| ·蛋白质中半胱氨酸残基的巯基/二硫键的转换机制 | 第14-15页 |
| ·半胱氨酸的巯基/二硫键对蛋白质功能的调控作用 | 第15-16页 |
| ·催化二硫键形成的酶系统及半胱氨酸位点的功能分析 | 第16-20页 |
| ·大肠杆菌Dsb酶系统中半胱氨酸位点的功能分析 | 第16-17页 |
| ·结核分支杆菌VKOR酶系统中半胱氨酸位点的功能分析 | 第17-18页 |
| ·哺乳动物VKOR酶系统中半胱氨酸位点的功能分析 | 第18-19页 |
| ·聚球藻VKOR酶系统中半胱氨酸位点的功能分析 | 第19-20页 |
| ·植物叶绿体中类囊体蛋白的研究 | 第20-26页 |
| ·植物类囊体的蛋白家族 | 第20-22页 |
| ·植物类囊体蛋白的转运及氧化折叠 | 第22-24页 |
| ·植物类囊体蛋白对环境的响应 | 第24-25页 |
| ·植物类囊体中光系统II（PSII）的组装及修复 | 第25页 |
| ·植物类囊体中的光保护机制的研究 | 第25-26页 |
| ·植物维生素K环氧化物还原酶（VKOR）的研究进展 | 第26-28页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-49页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·菌株和质粒 | 第29页 |
| ·植物材料 | 第29-30页 |
| ·酶、试剂盒与各种生化试剂 | 第30页 |
| ·PCR引物 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-49页 |
| ·半胱氨酸突变的AtVKOR克隆载体的构建 | 第31-38页 |
| ·半胱氨酸突变的AtVKOR序列的扩增 | 第31-33页 |
| ·Cysteine-mutant AtVKORs克隆载体的构建 | 第33-35页 |
| ·AtVKOR信号肽序列的扩增 | 第35页 |
| ·AtVKOR信号肽克隆载体的构建 | 第35-37页 |
| ·添加信号肽的cysteine-mutant AtVKORs克隆载体的构建 | 第37-38页 |
| ·Cysteine-mutant AtVKORs植物表达载体的构建 | 第38-40页 |
| ·酶切cysteine-mutant AtVKORs重组质粒和表达载体pBI121质粒 | 第38-39页 |
| ·连接Cysteine-mutant AtVKORs与pBI121载体及转化 | 第39-40页 |
| ·Cysteine-mutant AtVKORs表达载体转化农杆菌 | 第40-41页 |
| ·根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第40页 |
| ·重组质粒cysteine-mutant AtVKORs转化农杆菌GV3101（热激法） | 第40页 |
| ·重组质粒cysteine-mutant AtVKORs转农杆菌的鉴定 | 第40-41页 |
| ·农杆菌浸染拟南芥 | 第41-43页 |
| ·植物材料培养与处理 | 第41页 |
| ·野生型拟南芥WT与突变体vkor杂合体的获得及筛选 | 第41-42页 |
| ·微量法快速提取拟南芥基因组 | 第42页 |
| ·T-DNA插入纯合体的筛选 | 第42-43页 |
| ·农杆菌浸染拟南芥花絮 | 第43页 |
| ·转基因植株的获得及筛选 | 第43-45页 |
| ·转外源基因的筛选 | 第43-44页 |
| ·转基因植株vkor突变体背景的筛选 | 第44-45页 |
| ·检测转基因植株中cysteine-mutant AtVKORs的表达量 | 第45-46页 |
| ·Trizol法提取拟南芥总RNA | 第45页 |
| ·cDNA反转录 | 第45-46页 |
| ·半定量RT-PCR检测 | 第46页 |
| ·转基因植株生理指标的测定 | 第46-47页 |
| ·植物地上部分鲜重的测定及叶绿素含量测定 | 第46页 |
| ·叶绿素荧光参数的测定 | 第46-47页 |
| ·Western blot蛋白印迹分析 | 第47-48页 |
| ·类囊体的提取 | 第47页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第47页 |
| ·半干法转移蛋白 | 第47页 |
| ·免疫检测 | 第47-48页 |
| ·化学发光法检测蛋白质 | 第48页 |
| ·H2O2与O2·-含量的测定 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-63页 |
| ·构建cysteine-mutant AtVKORs植物表达载体 | 第49-52页 |
| ·Cysteine-mutant AtVKORs片段的扩增及克隆载体的构建 | 第49-50页 |
| ·At VKOR信号肽序列的扩增及添加 | 第50-51页 |
| ·构建cysteine-mutant AtVKORs植物表达载体及转化农杆菌 | 第51-52页 |
| ·Cysteine-mutant AtVKORs转基因植株的获得 | 第52-55页 |
| ·野生型拟南芥与vkor缺失突变体杂交材料的获得 | 第52页 |
| ·农杆菌浸染花絮及转基因植株的获得 | 第52-54页 |
| ·转基因植株纯合体的筛选及鉴定 | 第54-55页 |
| ·AtVKOR半胱氨酸位点对植物生长的影响 | 第55-57页 |
| ·AtVKOR半胱氨酸位点对植物光系统II（PSII）反应中心的影响 | 第57-58页 |
| ·正常光照下AtVKOR半胱氨酸位点对PSII活性的影响 | 第57-58页 |
| ·强光条件下AtVKOR半胱氨酸位点对PSII活性的影响 | 第58页 |
| ·AtVKOR半胱氨酸位点对植物PSII核心蛋白-D1周转的影响 | 第58-61页 |
| ·AtVKOR半胱氨酸位点对植株体内ROS积累量的影响 | 第61-63页 |
| 4 讨论 | 第63-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第78页 |
