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PRRSV的分离鉴定和VLPs的构建

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
第1章 综述第10-22页
 1 PRRSV病原学第10-13页
   ·PRRSV形态结构特征第10页
   ·PRRSV基因组及其编码的蛋白第10-11页
   ·病毒的复制第11页
   ·理化特性第11-12页
   ·培养特性第12页
   ·生物学特性第12-13页
 2 PRRS的发生和流行现状第13页
 3 临床特征及病理变化第13-14页
   ·临床特征第13-14页
   ·病理变化第14页
 4 PRRS的防治第14-17页
   ·灭活疫苗第15页
   ·弱毒疫苗第15-16页
   ·基因工程疫苗第16-17页
 5 病毒样颗粒疫苗第17-22页
   ·VLPs的形成及特点第17页
   ·VLPs的免疫机制第17-18页
   ·VLPs的表达系统第18页
   ·VLPs疫苗的优势第18页
   ·VLPs的国内外研究进展第18-22页
第2章 引言第22-24页
第3章 重庆株PRRSV的分离鉴定第24-34页
 1 材料和方法第24-28页
   ·病料来源第24页
   ·细胞株第24页
   ·主要试剂第24页
   ·主要仪器设备第24-25页
   ·主要溶液和试剂配制第25-26页
   ·毒株的分离第26页
   ·毒株的鉴定第26-28页
 2 结果第28-31页
   ·基因RT-PCR扩增第28-29页
   ·病毒分离第29页
   ·毒株TCID50检测第29-30页
   ·基因序列分析第30-31页
 3 讨论第31-34页
第4章 PRRSV-VLPs的构建第34-48页
 1 材料与方法第34-43页
   ·菌株和质粒第34页
   ·主要试剂第34-35页
   ·主要仪器设备第35页
   ·主要溶液和试剂配制第35-36页
   ·基因与引物的设计合成第36页
   ·穿梭质粒pFastBacI-GP5-M的构建第36-38页
   ·重组杆状病毒质粒的构建第38-40页
   ·Sf9细胞培养及重组杆状病毒的产生第40-42页
   ·重组蛋白的表达及鉴定第42-43页
 2 结果第43-47页
   ·穿梭质粒和重组杆粒的鉴定第43页
   ·重组杆状病毒的产生及P2代毒TCID50的测定第43-44页
   ·重组蛋白的SDS-PAGE和Western blotting鉴定第44-45页
   ·VLPs纯化后SDS-PAGE鉴定第45页
   ·VLPs的电镜观察第45-47页
 3 讨论第47-48页
第5章 PRRSV-VLPs免疫活性的测定第48-56页
 1 材料与方法第48-50页
   ·主要试剂第48页
   ·主要溶液和试剂配制第48-49页
   ·BCA法测定蛋白质浓度第49页
   ·制作疫苗第49页
   ·疫苗的功能检测第49-50页
 2 结果第50-53页
   ·抗原浓度检测第50-51页
   ·安全性评价第51-52页
   ·GP5抗体检测第52页
   ·体外中和抗体检测第52-53页
   ·细胞免疫应答检测第53页
 3 讨论第53-56页
第6章 结论第56-58页
参考文献第58-70页
附录第70-74页
致谢第74-76页
在学期间发表的文章第76页

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