| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-20页 |
| 1 抗菌肽概况 | 第12页 |
| 2 抗菌肽的分类 | 第12-14页 |
| 3 抗菌肽的作用机制 | 第14-15页 |
| 4 鱼类抗菌肽的研究进展 | 第15-16页 |
| 5 抗菌肽Hepcidin简介 | 第16-17页 |
| 6 组蛋白H2A衍生抗菌肽简介 | 第17页 |
| 7 毕赤酵母表达系统 | 第17-18页 |
| 8 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第一章 基于SOE-PCR的两种鱼类hepcidin成熟肽的c DNA串联及重组表达载体的构建 | 第20-31页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·基于SOE-PCR的两种鱼类hepcidin基因串联及含Eco R I和Not I酶切位点的PCR扩增 | 第20-23页 |
| ·目的基因的克隆 | 第23-24页 |
| ·重组表达载体p PIC9K-m CH-m TH的构建及鉴定 | 第24-26页 |
| ·结果与讨论 | 第26-29页 |
| ·含Eco R I和Not I酶切位点的串联基因的PCR扩增结果 | 第26-28页 |
| ·菌落PCR和双酶切鉴定重组表达载体p PIC9K-m CH-m TH | 第28页 |
| ·重组表达载体p PIC9K-m CH-m TH的测序结果 | 第28-29页 |
| ·本章小结 | 第29-31页 |
| 第二章 m CH-m TH在毕赤酵母中的表达及纯化 | 第31-40页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-35页 |
| ·感受态酵母细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·重组表达载体p PIC9K-m CH-m TH转化毕赤酵母GS115 | 第33页 |
| ·高拷贝转化子的筛选和鉴定 | 第33-34页 |
| ·在毕赤酵母GS115中表达重组蛋白m CH-m TH | 第34-35页 |
| ·离子交换层析分离纯化重组蛋白m CH-m TH | 第35页 |
| ·Tricine-SDS-PAGE分析 | 第35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-38页 |
| ·高拷贝转化子的筛选和鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·m CH-m TH在毕赤酵母GS115中的诱导表达结果 | 第36-37页 |
| ·m CH-m TH的分离纯化结果 | 第37-38页 |
| ·本章小结 | 第38-40页 |
| 第三章 m CH-m TH的抑菌活性鉴定 | 第40-43页 |
| ·材料 | 第40页 |
| ·方法 | 第40-41页 |
| ·琼脂糖弥散法 | 第40页 |
| ·微量肉汤稀释法 | 第40-41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-42页 |
| ·m CH-m TH的抑菌活性鉴定结果 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 第四章 Hipposin基因的合成及其重组表达载体的构建 | 第43-48页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-45页 |
| ·Hipposin基因的优化合成 | 第43-44页 |
| ·重组表达载体p PICZαA-HIP的构建及阳性转化子的筛选和鉴定 | 第44-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-47页 |
| ·Hipposin基因序列 | 第45-46页 |
| ·阳性转化子的筛选和鉴定结果 | 第46-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第五章 Hipposin在毕赤酵母中的表达及纯化 | 第48-55页 |
| ·材料 | 第48-49页 |
| ·方法 | 第49-50页 |
| ·在毕赤酵母X-33中表达hipposin | 第49页 |
| ·Western Blot分析 | 第49-50页 |
| ·固化金属离子亲和层析（IMAC）分离纯化Hipposin | 第50页 |
| ·结果与讨论 | 第50-53页 |
| ·Hipposin在毕赤酵母GS115中的诱导表达结果 | 第50-51页 |
| ·Western Blot分析结果 | 第51-52页 |
| ·Hipposin的分离纯化结果 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-55页 |
| 第六章 全文总结及展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
