| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 专业词汇中英文对照表 | 第11-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-38页 |
| ·DNA损伤修复与耐受 | 第16-17页 |
| ·跨损伤DNA合成(Translesion DNA Synthesis,TLS) | 第17-19页 |
| ·TLS聚合酶 | 第19-28页 |
| ·Y家族TLS聚合酶Pol | 第21-26页 |
| ·其它Y-家族TLS聚合酶 | 第26-28页 |
| ·泛素与泛素化 | 第28-29页 |
| ·泛素系统 | 第28-29页 |
| ·泛素化过程及种类 | 第29页 |
| ·PCNA与DNA损伤修复 | 第29-30页 |
| ·PCNA单泛素化及调控机理 | 第30-32页 |
| ·错配修复(Mismatch Repair,MMR)与MSH2 | 第32-36页 |
| ·错配修复系统 | 第32-36页 |
| ·错配修复蛋白MSH2 | 第36页 |
| ·研究意义 | 第36-38页 |
| 第二章 材料与方法 | 第38-60页 |
| ·实验材料 | 第38-43页 |
| ·细胞系信息 | 第38页 |
| ·质粒信息 | 第38页 |
| ·抗体信息 | 第38-39页 |
| ·引物序列 | 第39-40页 |
| ·siRNA序列 | 第40页 |
| ·化学试剂及试剂盒 | 第40-42页 |
| ·实验仪器 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-60页 |
| ·质粒构建 | 第43-44页 |
| ·基因定点突变 | 第44页 |
| ·质粒转化 | 第44-45页 |
| ·GST融合蛋白表达及纯化 | 第45-46页 |
| ·细胞培养 | 第46页 |
| ·质粒转染 | 第46-47页 |
| ·siRNA转染 | 第47页 |
| ·慢病毒包装与感染 | 第47-48页 |
| ·稳定细胞系的建立 | 第48页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第48-51页 |
| ·染色 | 第51-52页 |
| ·免疫印迹(Western Blot) | 第52-53页 |
| ·用于质谱分析的蛋白样品制备及预处理 | 第53-55页 |
| ·免疫共沉淀技术 | 第55页 |
| ·免疫荧光技术 | 第55-56页 |
| ·细胞周期阻滞 | 第56页 |
| ·流式细胞术检测细胞周期 | 第56-57页 |
| ·激光微辐射共聚焦显微镜检测蛋白质招募 | 第57页 |
| ·Foci形成实验 | 第57-58页 |
| ·染色质分离(Chromatin Fraction)实验 | 第58页 |
| ·克隆形成实验(Colony Assay) | 第58页 |
| ·碱性彗星电泳分析 | 第58-60页 |
| 第三章 研究结果 | 第60-86页 |
| ·TLS聚合酶Polκ相互作用蛋白质的鉴定和验证 | 第60-63页 |
| ·免疫共沉淀结合质谱技术检测Polκ潜在作用蛋白 | 第60-61页 |
| ·验证Polκ与MSH2相互作用 | 第61-63页 |
| ·MSH2调控Polκ参与UV处理后TLS的分子机制 | 第63-77页 |
| ·MSH2影响UV处理后TLS聚合酶的招募 | 第63-67页 |
| ·MSH2调控UV处理后PCNA单泛素化水平 | 第67-68页 |
| ·MSH2调控UV辐射处理后RAD18和RPA foci的形成 | 第68-71页 |
| ·MSH2还通过PCNA单泛素化不依赖的途径调控TLS聚合酶的招募 | 第71-74页 |
| ·MSH2调控UV诱导的光产物的跨损伤合成 | 第74-77页 |
| ·Polκ的新功能研究 | 第77-86页 |
| ·GFP-Polκ在激光微辐射处理产生的损伤位点发生聚集 | 第78-80页 |
| ·Polκ缺失的细胞链断裂修复能力降低 | 第80-82页 |
| ·Polκ缺失引发细胞单、双链断裂修复产生缺陷 | 第82-86页 |
| 第四章 分析讨论 | 第86-90页 |
| 参考文献 | 第90-106页 |
| 作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第106-107页 |
