| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·烟草的起源及全烟气的组成 | 第11页 |
| ·全烟气导致机体损伤的机理 | 第11-12页 |
| ·自由基理论 | 第11-12页 |
| ·DNA 及染色体突变学说 | 第12页 |
| ·国内外全烟气及 TSNA 安全评价方法研究进展 | 第12-15页 |
| ·国内外卷烟烟气安全评价方法研究进展 | 第13-14页 |
| ·体外安全评价研究 | 第13-14页 |
| ·体内安全评价研究—动物模型的建立 | 第14页 |
| ·TSNA 的安全评价研究 | 第14-15页 |
| ·组织制片技术 | 第15-16页 |
| ·蛋白质凝胶电泳技术 | 第16页 |
| ·荧光定量 PCR 技术 | 第16-19页 |
| ·荧光定量 PCR 技术简介 | 第16页 |
| ·荧光定量 PCR 技术的应用 | 第16-18页 |
| ·Nrf2 基因及 GCLC 基因简介 | 第18-19页 |
| ·本课题的研究内容及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 全烟气及 TSNA 动物模型的建立 | 第21-27页 |
| ·实验材料、仪器和试剂 | 第21-23页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·实验仪器 | 第21-22页 |
| ·实验试剂 | 第22页 |
| ·实验试剂配制 | 第22页 |
| ·全烟气染毒箱的设计 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-24页 |
| ·全烟气动物模型的建立 | 第23页 |
| ·TSNA 动物模型的建立 | 第23-24页 |
| ·小鼠组织器官的采集 | 第24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-25页 |
| ·全烟气动物模型 | 第24页 |
| ·TSNA 动物模型 | 第24-25页 |
| ·本章小结 | 第25-27页 |
| 第三章 各组织器官的切片制作 | 第27-41页 |
| ·实验材料、仪器及试剂 | 第27-29页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·实验仪器 | 第27页 |
| ·实验试剂 | 第27-28页 |
| ·实验试剂配制 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·石蜡组织切片的制作 | 第29-30页 |
| ·免疫组化实验操作步骤 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-39页 |
| ·制作切片注意事项 | 第31页 |
| ·HE 染色结果分析 | 第31-39页 |
| ·本章小结 | 第39-41页 |
| 第四章 小鼠肺、肝中水溶性总蛋白的表达 | 第41-49页 |
| ·实验材料、仪器及试剂 | 第41-44页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验仪器 | 第41-42页 |
| ·实验试剂 | 第42-43页 |
| ·实验试剂配制 | 第43-44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·小鼠肺、肝组织水溶性总蛋白的提取 | 第44页 |
| ·蛋白质浓度的测定-考马斯亮蓝法 | 第44-45页 |
| ·蛋白质的 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-48页 |
| ·蛋白质提取、定量及 SDS-PAGE 电泳注意事项 | 第46页 |
| ·水溶性总蛋白的浓度 | 第46-48页 |
| ·本章小结 | 第48-49页 |
| 第五章 抗氧化基因 Nrf2 及 GCLC 在小鼠肺、肝中的表达量 | 第49-67页 |
| ·实验材料、仪器及试剂 | 第49-51页 |
| ·实验材料 | 第49页 |
| ·实验仪器 | 第49-50页 |
| ·实验试剂 | 第50-51页 |
| ·实验试剂配制 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-56页 |
| ·小鼠肺、肝组织总 RNA 的提取 | 第51-53页 |
| ·总 RNA 提取前的准备工作 | 第51-52页 |
| ·小鼠肺、肝组织中总 RNA 的提取 | 第52页 |
| ·DNA 的消化 | 第52页 |
| ·总 RNA 完整性的检测 | 第52-53页 |
| ·cDNA 第一条链的合成 | 第53页 |
| ·PCR 引物的制备 | 第53-55页 |
| ·PCR 引物的设计 | 第53-54页 |
| ·PCR 模版的制备 | 第54页 |
| ·PCR 引物特异性分析 | 第54-55页 |
| ·荧光定量 PCR 检测小鼠肺、肝中抗氧化基因 Nrf2 和 GCLC 的表达量 | 第55-56页 |
| ·小鼠肺、肝中抗氧化基因 Nrf2 和 GCLC 相对表达量的检测 | 第55页 |
| ·计算方法 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-65页 |
| ·小鼠肺、肝组织总 RNA 的完整性 | 第56-57页 |
| ·PCR 引物的特异性分析 | 第57-58页 |
| ·Nrf2、GCLC 以及 GAPDH 三个基因的相对表达量 | 第58-65页 |
| ·本章小结 | 第65-67页 |
| 第六章 结论与展望 | 第67-69页 |
| ·结论 | 第67页 |
| ·展望 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| ABSTRACT | 第74-76页 |
| 附录 攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第76页 |
