| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第6-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| ·压力耐受性菌株的概述和研究进展 | 第9-12页 |
| ·微生物菌株应用过程中面对的各种压力 | 第9页 |
| ·微生物菌株压力条件下的适应行为 | 第9-10页 |
| ·压力耐受性菌株的发现和创建 | 第10-12页 |
| ·耐辐射异常球菌和全局转录因子IrrE的概述 | 第12-15页 |
| ·耐辐射异常球菌的概述 | 第12-13页 |
| ·全局转录因子IrrE的概述 | 第13-15页 |
| ·全局转录因子IrrE在提高微生物压力耐受性方面的研究进展 | 第15页 |
| ·易错PCR技术及其在蛋白定向进化中的应用 | 第15-17页 |
| ·易错PCR技术概述 | 第16页 |
| ·突变文库的构建和筛选 | 第16-17页 |
| ·易错PCR技术在蛋白定向进化中的应用进展 | 第17页 |
| ·大肠杆菌概述 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌的理化性质 | 第17页 |
| ·大肠杆菌的应用和研究价值 | 第17-18页 |
| ·大肠杆菌表达系统 | 第18页 |
| ·本课题的立题意义及研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-33页 |
| ·实验材料 | 第19-23页 |
| ·菌株与质粒 | 第19页 |
| ·主要化学试剂 | 第19-21页 |
| ·主要实验仪器 | 第21-22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·主要储存液和缓冲液 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-33页 |
| ·耐辐射异常球菌(D.radiodurans)R1的培养和生长特性分析 | 第23-24页 |
| ·耐辐射异常球菌总DNA和质粒提取方法 | 第24页 |
| ·irrE基因的扩增 | 第24-26页 |
| ·DNA片段的回收与纯化 | 第26-27页 |
| ·DNA片段的酶切与连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第27-28页 |
| ·IrrE蛋白的表达与纯化 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第28-29页 |
| ·野生型IrrE表达对大肠杆菌生长特性的影响 | 第29页 |
| ·野生型IrrE表达对大肠杆菌压力耐受能力的影响 | 第29-30页 |
| ·野生型IrrE表达对大肠杆菌底物代谢谱的影响 | 第30页 |
| ·高乙醇耐性突变体的筛选和验证 | 第30-32页 |
| ·突变型IrrE表达对大肠杆菌生长特性的影响 | 第32页 |
| ·突变型IrrE表达对大肠杆菌压力耐受能力的影响 | 第32页 |
| ·IrrE突变位点的分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与讨论 | 第33-51页 |
| ·耐辐射异常球菌的培养和野生型irrE基因的克隆 | 第33-36页 |
| ·耐辐射异常球菌R1的菌落形态及理化特性观察 | 第33页 |
| ·耐辐射异常球菌R1的生长曲线 | 第33-34页 |
| ·野生型irrE基因的克隆 | 第34-36页 |
| ·野生型IrrE重组大肠杆菌的构建和性能分析 | 第36-42页 |
| ·野生型IrrE重组大肠杆菌的构建 | 第36-39页 |
| ·野生型IrrE表达对大肠杆菌生长特性的影响 | 第39页 |
| ·野生型IrrE表达对大肠杆菌压力耐受能力的影响 | 第39-40页 |
| ·野生型IrrE表达对大肠杆菌底物代谢谱的影响 | 第40-42页 |
| ·突变型IrrE重组大肠杆菌的构建和性能分析 | 第42-48页 |
| ·IrrE突变文库的构建和优良突变株的筛选鉴定 | 第42-46页 |
| ·突变型IrrE表达对大肠杆菌生长特性的影响 | 第46页 |
| ·突变型IrrE表达对大肠杆菌压力耐受能力的影响 | 第46-48页 |
| ·IrrE突变位点的分析 | 第48-51页 |
| 4 结论 | 第51-52页 |
| 5 展望 | 第52-53页 |
| 6 参考文献 | 第53-60页 |
| 7 攻读学位期间发表的论文 | 第60-61页 |
| 8 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62页 |