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壳聚糖修饰表面以及雷洛昔芬对细胞形态、增殖、分化、迁移的影响

摘要第1-8页
Abstract第8-11页
缩写词表第11-12页
第一部分 综述第12-50页
 第一章 生物材料表面性质对细胞的影响第12-31页
     ·组织工程第12-26页
       ·组织工程的定义及主要组成要素第12-13页
       ·生物材料第13-15页
       ·生物材料的表面修饰第15-17页
       ·细胞—生物材料表面相互作用第17-19页
       ·细胞活性因子对细胞行为的影响第19-26页
     ·结语与展望第26-27页
  参考文献第27-31页
 第二章 脂肪干细胞在组织工程中的应用第31-50页
     ·种子细胞概述第31-33页
       ·自体细胞第31页
       ·同种异体细胞和异种细胞第31页
       ·干细胞第31-33页
     ·脂肪干细胞生物学特性及应用第33-38页
       ·脂肪干细胞的鉴定第33-34页
       ·脂肪干细胞的分离第34页
       ·脂肪干细胞的培养第34-35页
       ·脂肪干细胞的诱导分化潜能第35-36页
       ·脂肪干细胞的的其他应用第36-37页
       ·脂肪干细胞在骨组织工程的应用第37-38页
     ·成骨分化相关影响因素的研究进展第38-43页
       ·影响成骨细胞分化的调控因素第38-41页
       ·一氧化氮与骨的影响第41-43页
     ·雷洛昔芬的功能及临床应用第43-44页
     ·结语与展望第44-45页
  参考文献第45-50页
第二部分 实验部分第50-110页
 第三章 小鼠来源成纤维细胞系L929在壳聚糖修饰聚乳酸(PLLA)膜表面形态、粘附、增殖、迁移的研究第50-78页
     ·前言第50-51页
     ·实验材料和仪器第51-52页
     ·实验方法第52-61页
       ·聚乳酸膜的准备第52页
       ·等离子处理聚乳酸表面及壳聚糖表面接枝反应第52-53页
       ·细胞培养以及生物材料的无菌处理第53页
       ·细胞增殖实验第53页
       ·细胞形态的观察第53页
       ·蛋白吸附实验第53页
       ·细胞粘附实验第53-54页
       ·细胞周期实验第54页
       ·细胞迁移实验第54页
       ·定量PCR检测不同材料表面细胞功能蛋白的表达第54-56页
       ·Western blotting免疫印迹法检测第56-59页
       ·不同材料表面添加碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)对L929细胞增殖的影响第59页
       ·不同材料表面对血清以及碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)活性保护作用的比较第59-61页
       ·统计分析第61页
     ·实验结果第61-71页
       ·细胞增殖实验第61页
       ·细胞形态观察第61-62页
       ·蛋白吸附实验第62-63页
       ·细胞粘附实验第63-64页
       ·细胞周期实验第64-65页
       ·细胞迁移实验第65-66页
       ·不同材料表面对L929蛋白分泌的影响第66-68页
       ·Western blotting分析不同材料表面对L929蛋白分泌及磷酸化的影响第68-69页
       ·不同材料表面对生长因子活性的影响第69-71页
     ·实验讨论第71-74页
  参考文献第74-78页
 第四章 脂肪干细胞分离、增殖、分化鉴定第78-91页
     ·前言第78页
     ·实验材料第78-79页
       ·实验动物第78页
       ·主要试剂第78-79页
     ·实验步骤第79-84页
       ·主要溶液配制第79页
       ·脂肪干细胞分离步骤第79-80页
       ·脂肪干细胞培养及传代第80页
       ·骨髓间充质干细胞分离步骤第80页
       ·骨髓间充质干细胞培养与传代第80-81页
       ·脂肪干细胞和骨髓间充质干细胞增殖速率的比较第81页
       ·脂肪干细胞脂肪分化能力鉴定第81-82页
       ·脂肪干细胞成骨分化能力鉴定第82-83页
     ·脂肪干细胞软骨分化能力鉴定第83-84页
       ·脂肪干细胞肌样细胞诱导分化第84页
   ·实验结果第84-89页
       ·脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞形态比较第84-85页
       ·脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞增殖速率比较第85-86页
       ·脂肪干细胞脂肪分化能力鉴定第86页
       ·脂肪干细胞成骨分化能力鉴定第86-87页
       ·脂肪干细胞软骨分化能力鉴定第87-89页
       ·脂肪干细胞心肌分化能力鉴定第89页
     ·实验讨论第89-90页
  参考文献第90-91页
 第五章 雷洛昔芬对脂肪干细胞成骨分化的影响第91-110页
     ·前言第91-92页
     ·实验材料第92页
     ·实验方法第92-97页
       ·细胞培养第92页
       ·Ral对脂肪干细胞一氧化氮释放的测定第92-93页
       ·免疫荧光检测内皮型一氧化氮合成酶磷酸化水平第93页
       ·Western blotting检测AKT和ERK磷酸化水平第93页
       ·Ral对脂肪干细胞中可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)和雌激素受体表达的影响第93-94页
       ·Ral对脂肪干细胞cGMP释放的影响第94页
       ·免疫细胞化学检测Ral对脂肪干细胞BMP2和Col-Ⅰ的合成的影响第94-95页
       ·Ral对脂肪干细胞成骨分化标志蛋白mRNA水平表达的影响第95页
       ·Ral对脂肪干细胞成骨分化中ALP表达的影响第95页
       ·Ral对脂肪干细胞钙离子沉积的影响第95页
       ·Ral对脂肪干细胞矿化结节形成的影响第95-96页
       ·Ral对脂肪干细胞细胞毒性的研究第96页
       ·Ral对脂肪干细胞细胞周期的影响第96页
       ·统计分析第96-97页
     ·实验结果第97-107页
       ·Ral对脂肪干细胞NO释放的检测第97-98页
       ·免疫荧光检测内皮型一氧化氮合成酶磷酸化水平第98页
       ·Western blotting检测AKT和ERK磷酸化水平第98-100页
       ·Ral对脂肪干细胞可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)表达的影响第100-101页
       ·Ral对脂肪干细胞cGMP的释放的影响第101页
       ·Ral介导的NO/cGMP通路对脂肪干细胞成骨分化的影响第101-105页
       ·Ral介导的NO/cGMP通路对脂肪干细胞成骨分化钙离子沉积和矿化结节的影响第105-106页
       ·Ral对脂肪干细胞增殖的影响第106-107页
     ·实验讨论第107-108页
  参考文献第108-110页
研究特色与创新第110-111页
致谢第111-112页

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