鉴别牛羊布鲁菌实时荧光定量PCR方法的建立
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 插图和附表清单 | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| ·布鲁菌病的流行病学研究进展 | 第9-11页 |
| ·国外布鲁菌病疫情 | 第9-10页 |
| ·国内布鲁菌病疫情 | 第10-11页 |
| ·布鲁菌病诊断方法的研究进展 | 第11-19页 |
| ·传统布鲁菌病诊断方法 | 第11-14页 |
| ·现代布鲁菌病检测技术 | 第14-19页 |
| ·本研究目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·试剂与仪器 | 第20-21页 |
| ·引物和探针 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-27页 |
| ·标准阳性质粒模板的制备 | 第21-25页 |
| ·实时荧光定量PCR试验参数的优化 | 第25页 |
| ·实时荧光定量PCR反应体系与反应参数的建立 | 第25-26页 |
| ·多重实时荧光定量PCR标准曲线的制备 | 第26页 |
| ·特异性试验 | 第26页 |
| ·敏感性试验 | 第26-27页 |
| ·重复性试验 | 第27页 |
| ·多重实时荧光定量PCR检测临床样品 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-39页 |
| ·标准阳性质粒模板的制备 | 第27-29页 |
| ·常规PCR的扩增结果 | 第27页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第27-28页 |
| ·目的基因片段测序结果 | 第28-29页 |
| ·质粒拷贝数计算结果 | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR试验参数的优化结果 | 第29-33页 |
| ·引物浓度优化结果 | 第29-30页 |
| ·探针浓度优化结果 | 第30-31页 |
| ·退火温度优化结果 | 第31-33页 |
| ·多重实时荧光定量PCR标准曲线的制备结果 | 第33-34页 |
| ·特异性试验结果 | 第34页 |
| ·敏感性试验结果 | 第34-37页 |
| ·单重实时荧光定量PCR敏感性结果 | 第34-36页 |
| ·多重实时荧光定量PCR敏感性结果 | 第36-37页 |
| ·重复性试验结果 | 第37-38页 |
| ·多重实时荧光定量PCR检测临床样品结果 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
