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短小乳杆菌S-层蛋白质的原核表达及其体外粘附性的初步鉴定

摘要第1-4页
Abstract第4-6页
目录第6-8页
插图和附表清单第8-9页
縮略语表第9-10页
1 引言第10-18页
   ·S-层蛋白结构特点第10页
   ·乳酸杆菌S-层蛋白的基本特征第10-11页
   ·乳酸杆菌S-层蛋白基因第11-13页
     ·乳酸杆菌S-层蛋白基因的特征第11页
     ·乳酸杆菌S-层蛋白基因的转录与表达第11-13页
   ·乳酸杆菌S-层蛋白结构与自我组装第13-15页
     ·乳酸杆菌S-层蛋白的结构特征第13-14页
     ·乳酸杆菌S-层蛋白的自我组装第14-15页
   ·S-层蛋白的提取、分离、纯化技术第15页
   ·乳酸杆菌S-层蛋白的粘附特性研究第15-17页
     ·对细胞和细胞外基质粘附的介导作用第15-16页
     ·在细菌外膜上的锚定作用第16页
     ·影响乳酸杆菌粘附的因素第16页
     ·S-层蛋白质粘附性研究的相关技术第16-17页
   ·本研究的目的和意义第17-18页
2 短小乳杆菌S-层蛋白质的原核表达载体pGEX-slp的构建及其鉴定试验第18-30页
   ·材料第18-19页
     ·菌株和质粒第18页
     ·主要试剂第18页
     ·主要仪器设备第18-19页
     ·引物设计第19页
   ·方法第19-24页
     ·slp基因的PCR扩增第19-20页
     ·slp基因PCR扩增产物胶回收第20页
     ·slp基因PCR纯化产物双酶切和回收第20页
     ·质粒pGEX-4T-3双酶切和回收第20-21页
     ·连接反应第21-22页
     ·slp基因连接产物的转化第22-23页
     ·重组质粒pGEX-slp的鉴定第23-24页
     ·slp基因IPTG诱导表达条件的优化第24页
     ·Western blot鉴定重组融合蛋白GST-SLP第24页
   ·结果第24-29页
     ·slp基因的PCR扩增结果第24-25页
     ·重组表达质粒pGEX-slp的酶切鉴定第25页
     ·重组表达质粒pGEX-slp的PCR鉴定第25-26页
     ·基因测序结果第26-27页
     ·重组表达载体pGEX-slp最佳IPTG诱导表达条件的确定第27-28页
     ·重组融合蛋白GST-SLP的Western blot检测结果第28-29页
   ·讨论第29-30页
3 重组S-层蛋白质的分离纯化及其体外粘附性的初步鉴定试验第30-39页
   ·材料第30-31页
     ·菌株和质粒第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·主要仪器设备第31页
   ·方法第31-34页
     ·重组S-层蛋白质的大量诱导表达第31页
     ·LiCl法提取和纯化重组S-层蛋白质第31-32页
     ·纯化的重组S-层蛋白质的浓度测定第32-33页
     ·ELISA法鉴定重组融合蛋白GST-SLP的粘附性第33页
     ·IFA法鉴定重组融合蛋白GST-SLP的粘附性第33-34页
   ·结果第34-37页
     ·重组融合蛋白GST-SLP的纯化结果第34页
     ·重组融合蛋白GST-SLP的ELISA鉴定结果第34-35页
     ·重组融合蛋白GST-SLP的IFA鉴定结果第35-37页
   ·讨论第37-39页
     ·重组S-层蛋白的提取和纯化第37页
     ·S-层蛋白粘附性的研究第37-38页
     ·重组融合蛋白GST-SLP的体外粘附性鉴定的研究第38-39页
4 全文结论第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-47页

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