摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第6-8页 |
插图和附表清单 | 第8-9页 |
縮略语表 | 第9-10页 |
1 引言 | 第10-18页 |
·S-层蛋白结构特点 | 第10页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白的基本特征 | 第10-11页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白基因 | 第11-13页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白基因的特征 | 第11页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白基因的转录与表达 | 第11-13页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白结构与自我组装 | 第13-15页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白的结构特征 | 第13-14页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白的自我组装 | 第14-15页 |
·S-层蛋白的提取、分离、纯化技术 | 第15页 |
·乳酸杆菌S-层蛋白的粘附特性研究 | 第15-17页 |
·对细胞和细胞外基质粘附的介导作用 | 第15-16页 |
·在细菌外膜上的锚定作用 | 第16页 |
·影响乳酸杆菌粘附的因素 | 第16页 |
·S-层蛋白质粘附性研究的相关技术 | 第16-17页 |
·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 短小乳杆菌S-层蛋白质的原核表达载体pGEX-slp的构建及其鉴定试验 | 第18-30页 |
·材料 | 第18-19页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·主要仪器设备 | 第18-19页 |
·引物设计 | 第19页 |
·方法 | 第19-24页 |
·slp基因的PCR扩增 | 第19-20页 |
·slp基因PCR扩增产物胶回收 | 第20页 |
·slp基因PCR纯化产物双酶切和回收 | 第20页 |
·质粒pGEX-4T-3双酶切和回收 | 第20-21页 |
·连接反应 | 第21-22页 |
·slp基因连接产物的转化 | 第22-23页 |
·重组质粒pGEX-slp的鉴定 | 第23-24页 |
·slp基因IPTG诱导表达条件的优化 | 第24页 |
·Western blot鉴定重组融合蛋白GST-SLP | 第24页 |
·结果 | 第24-29页 |
·slp基因的PCR扩增结果 | 第24-25页 |
·重组表达质粒pGEX-slp的酶切鉴定 | 第25页 |
·重组表达质粒pGEX-slp的PCR鉴定 | 第25-26页 |
·基因测序结果 | 第26-27页 |
·重组表达载体pGEX-slp最佳IPTG诱导表达条件的确定 | 第27-28页 |
·重组融合蛋白GST-SLP的Western blot检测结果 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
3 重组S-层蛋白质的分离纯化及其体外粘附性的初步鉴定试验 | 第30-39页 |
·材料 | 第30-31页 |
·菌株和质粒 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·主要仪器设备 | 第31页 |
·方法 | 第31-34页 |
·重组S-层蛋白质的大量诱导表达 | 第31页 |
·LiCl法提取和纯化重组S-层蛋白质 | 第31-32页 |
·纯化的重组S-层蛋白质的浓度测定 | 第32-33页 |
·ELISA法鉴定重组融合蛋白GST-SLP的粘附性 | 第33页 |
·IFA法鉴定重组融合蛋白GST-SLP的粘附性 | 第33-34页 |
·结果 | 第34-37页 |
·重组融合蛋白GST-SLP的纯化结果 | 第34页 |
·重组融合蛋白GST-SLP的ELISA鉴定结果 | 第34-35页 |
·重组融合蛋白GST-SLP的IFA鉴定结果 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
·重组S-层蛋白的提取和纯化 | 第37页 |
·S-层蛋白粘附性的研究 | 第37-38页 |
·重组融合蛋白GST-SLP的体外粘附性鉴定的研究 | 第38-39页 |
4 全文结论 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |