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鸭坦布苏病毒弱毒株反向遗传操作系统的建立

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
图表目录第11-13页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-21页
   ·鸭坦布苏病毒概述及研究进展第14-15页
     ·鸭坦布苏病毒的概述第14页
     ·黄病毒属病毒的分子生物学特性第14-15页
     ·鸭坦布苏病毒的研究进展第15页
   ·黄病毒的反向遗传操作系统概述第15-20页
     ·反向遗传操作系统的概念第15-16页
     ·黄病毒的反向遗传操作系统的研究进展第16-18页
     ·黄病毒反向遗传操作系统的应用第18-20页
     ·表达外源蛋白的重组黄病毒反向遗传操作系统的应用第20页
   ·研究的目的及意义第20-21页
第二章 鸭坦布苏病毒弱毒株反向遗传操作系统的建立与病毒的拯救第21-39页
 摘要第21页
   ·材料第21-23页
     ·病毒与细胞第21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·主要仪器第22-23页
   ·方法第23-32页
     ·病毒RNA的提取第23页
     ·特异性反转录引物的设计与反转录第23-24页
     ·全长基因组的分片段引物设计及克隆第24-28页
     ·质粒3-N-pSIMPLE的构建第28-29页
     ·融合PCR方法得到鸭坦布苏病毒FX2010-180P株的全长PCR产物第29-30页
     ·鸭坦布苏病毒FX2010-180P株病毒的拯救第30-32页
     ·拯救病毒的生长特性的分析第32页
   ·结果第32-37页
     ·分段PCR的结果第32-33页
     ·质粒3-N-pSIMPLE酶切结果第33页
     ·片段T7-1-4052的PCR结果第33-34页
     ·全长PCR产物的扩增第34-35页
     ·病毒拯救的结果第35-36页
     ·拯救病毒的生长动力学曲线第36-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 表达外源蛋白的重组鸭坦布苏病毒弱毒株的反向遗传操作系统的研究第39-52页
 摘要第39页
   ·材料第39-41页
     ·病毒与细胞第39页
     ·主要试剂第39-40页
     ·主要仪器第40-41页
   ·方法第41-46页
     ·外源基因的插入位点选择与引物设计第41-42页
     ·质粒3-EGFP-N-pSIMPLE的构建第42-44页
     ·融合PCR方法得到重组病毒的全长PCR产物第44-45页
     ·重组病毒的拯救第45-46页
     ·拯救重组病毒的传代第46页
     ·拯救病毒全基因组测序第46页
   ·结果第46-50页
     ·片段9-EG-N的PCR结果第46-47页
     ·质粒3-EG-N-pSIMPLE酶切结果第47页
     ·重组病毒全长PCR产物的扩增第47-48页
     ·重组病毒的拯救结果第48-49页
     ·重组病毒的测序结果第49-50页
   ·讨论第50-52页
第四章 全文结论第52-53页
参考文献第53-58页
附录第58-60页
致谢第60-61页
作者简历第61页

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