摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
图表目录 | 第11-13页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-21页 |
·鸭坦布苏病毒概述及研究进展 | 第14-15页 |
·鸭坦布苏病毒的概述 | 第14页 |
·黄病毒属病毒的分子生物学特性 | 第14-15页 |
·鸭坦布苏病毒的研究进展 | 第15页 |
·黄病毒的反向遗传操作系统概述 | 第15-20页 |
·反向遗传操作系统的概念 | 第15-16页 |
·黄病毒的反向遗传操作系统的研究进展 | 第16-18页 |
·黄病毒反向遗传操作系统的应用 | 第18-20页 |
·表达外源蛋白的重组黄病毒反向遗传操作系统的应用 | 第20页 |
·研究的目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 鸭坦布苏病毒弱毒株反向遗传操作系统的建立与病毒的拯救 | 第21-39页 |
摘要 | 第21页 |
·材料 | 第21-23页 |
·病毒与细胞 | 第21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-32页 |
·病毒RNA的提取 | 第23页 |
·特异性反转录引物的设计与反转录 | 第23-24页 |
·全长基因组的分片段引物设计及克隆 | 第24-28页 |
·质粒3-N-pSIMPLE的构建 | 第28-29页 |
·融合PCR方法得到鸭坦布苏病毒FX2010-180P株的全长PCR产物 | 第29-30页 |
·鸭坦布苏病毒FX2010-180P株病毒的拯救 | 第30-32页 |
·拯救病毒的生长特性的分析 | 第32页 |
·结果 | 第32-37页 |
·分段PCR的结果 | 第32-33页 |
·质粒3-N-pSIMPLE酶切结果 | 第33页 |
·片段T7-1-4052的PCR结果 | 第33-34页 |
·全长PCR产物的扩增 | 第34-35页 |
·病毒拯救的结果 | 第35-36页 |
·拯救病毒的生长动力学曲线 | 第36-37页 |
·讨论 | 第37-39页 |
第三章 表达外源蛋白的重组鸭坦布苏病毒弱毒株的反向遗传操作系统的研究 | 第39-52页 |
摘要 | 第39页 |
·材料 | 第39-41页 |
·病毒与细胞 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39-40页 |
·主要仪器 | 第40-41页 |
·方法 | 第41-46页 |
·外源基因的插入位点选择与引物设计 | 第41-42页 |
·质粒3-EGFP-N-pSIMPLE的构建 | 第42-44页 |
·融合PCR方法得到重组病毒的全长PCR产物 | 第44-45页 |
·重组病毒的拯救 | 第45-46页 |
·拯救重组病毒的传代 | 第46页 |
·拯救病毒全基因组测序 | 第46页 |
·结果 | 第46-50页 |
·片段9-EG-N的PCR结果 | 第46-47页 |
·质粒3-EG-N-pSIMPLE酶切结果 | 第47页 |
·重组病毒全长PCR产物的扩增 | 第47-48页 |
·重组病毒的拯救结果 | 第48-49页 |
·重组病毒的测序结果 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-52页 |
第四章 全文结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
附录 | 第58-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简历 | 第61页 |