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家蝇蛹中抗肿瘤多肽的分离纯化及其作用机理研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
1 前言第10-21页
   ·家蝇第10-11页
     ·家蝇概述第10页
     ·家蝇开发历史第10页
     ·家蝇研究现状第10-11页
   ·多肽第11-13页
     ·多肽概述第11页
     ·抗肿瘤多肽研究现状第11-12页
     ·多肽分离纯化第12-13页
   ·肿瘤第13-14页
     ·肿瘤概述第13页
     ·肿瘤治疗第13-14页
   ·细胞凋亡第14-15页
     ·细胞凋亡概述第14页
     ·细胞凋亡形态学特征第14-15页
     ·细胞凋亡与疾病第15页
   ·细胞凋亡信号转导通路第15-19页
     ·细胞凋亡信号转导通路概述第15-16页
     ·ROS与细胞凋亡第16页
     ·MAPK家族与细胞凋亡第16-17页
     ·Akt与细胞凋亡第17-18页
     ·NF-κB与细胞凋亡第18页
     ·Bcl-2家族与细胞凋亡第18-19页
     ·细胞色素c(Cyto c)的释放与细胞凋亡第19页
     ·Caspase家族的活化与细胞凋亡第19页
   ·本论义的研究目的及意义第19-20页
   ·本论文的主要研究内容第20-21页
2 材料与方法第21-39页
   ·实验材料第21-25页
     ·蝇种及细胞株第21页
     ·主要药品第21-23页
     ·仪器与设备第23-24页
     ·主要溶液第24-25页
   ·实验方法第25-39页
     ·家蝇蛹抗肿瘤多肽的分离纯化第25-26页
     ·家蝇蛹抗肿瘤多肽初步鉴定第26-28页
     ·考马斯亮蓝试剂盒测定MATP的蛋白含量第28-29页
     ·MATP凝血活性的检测第29页
     ·细胞体外培养第29-30页
     ·细胞体外增殖抑制(MTT)实验第30-31页
     ·细胞形态学观察第31-32页
     ·流式细胞术分析细胞凋亡率和细胞周期阻滞第32-33页
     ·免疫荧光染色观察NF-κB p65的入核第33页
     ·细胞内ROS水平的检测第33-34页
     ·蛋白抽提实验第34-35页
     ·BCA试剂盒测定细胞蛋白浓度第35-36页
     ·免疫印迹实验第36-39页
3 结果与讨论第39-57页
   ·家蝇蛹抗肿瘤多肽的分离纯化第39-41页
     ·SephadexG-50凝胶过滤色谱分离家蝇蛹抗肿瘤多肽粗品第39页
     ·DEAE Sepharose F.F.阴离子交换色谱纯化家蝇蛹抗肿瘤多肽第39-41页
   ·家蝇蛹抗肿瘤多肽的初步鉴定第41-43页
     ·Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定家蝇蛹抗肿瘤多肽(MATP)第41-42页
     ·反相高效液相色谱鉴定MATP第42页
     ·原子力显微镜观察MATP第42-43页
     ·考马斯亮蓝试剂盒测定MATP的蛋白含量第43页
     ·MATP凝血活性的检测第43页
   ·细胞体外增殖抑制实验(MTT)第43-44页
   ·细胞形态学观察实验第44-46页
     ·苏木精-伊红染色(HE染色)检测细胞凋亡第44-45页
     ·吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染检测细胞凋亡第45-46页
     ·Hoechst 33342/PI双染检测细胞凋亡第46页
   ·流式细胞术分析细胞周期阻滞和细胞凋亡率第46-48页
   ·NF-κB p65在MATP诱导HepG2细胞凋亡过程中的作用第48-50页
     ·MATP对HepG2细胞NF-κB p65入核的影响第48-49页
     ·NF-κB p65入核对MATP作用的HepG2细胞凋亡率的影响 #、40第49-50页
   ·ROS在MATP诱导HepG2细胞凋亡过程中的作用第50-51页
     ·MATP对HepG2细胞内ROS水平的影响第50-51页
     ·ROS对MATP作用的HepG2细胞凋亡率的影响第51页
   ·MAPK和Akt通路在MATP诱导HepG2细胞凋亡过程中的作用第51-54页
     ·MATP对HepG2细胞MAPK和Akt通路相关蛋白表达的影响第51-53页
     ·JNK和Akt对MATP作用的HepG2细胞凋亡率的影响第53-54页
   ·ROS/JNK和Akt和MATP阻止HepG2细胞NF-κB p65入核中的作用第54页
   ·Bcl-2和Caspase家族成员在MATP诱导HepG2细胞凋亡过程中的作用第54-57页
4 结论第57-58页
5 展望第58-59页
6 参考文献第59-68页
7 攻读硕士学位期间发表论文情况第68-69页
8 致谢第69页

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