摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
引言 | 第11-19页 |
1 自然界中的单倍体 | 第11-14页 |
·有性生殖进化与单倍体 | 第11-12页 |
·单倍体发生方式 | 第12-14页 |
·孤雌生殖与单倍体 | 第12-13页 |
·孤雄生殖与单倍体 | 第13页 |
·无融合生殖与单倍体 | 第13页 |
·生殖细胞、体细胞减数分裂与单倍体 | 第13-14页 |
2 人工单倍体细胞系 | 第14-17页 |
·孤雄单倍体的多能性与功能 | 第14-17页 |
·孤雌单倍体的多能性与功能研究现状 | 第17页 |
3 研究目的意义 | 第17-19页 |
材料方法 | 第19-31页 |
1 材料 | 第19-20页 |
·实验动物 | 第19页 |
·细胞、质粒 | 第19页 |
·引物 | 第19-20页 |
·仪器 | 第20页 |
2 方法 | 第20-31页 |
·MEF制备 | 第20-21页 |
·成体小鼠原代细胞制备 | 第21页 |
·ES复苏、传代、冻存 | 第21-22页 |
·Ap染色 | 第22页 |
·质粒大提 | 第22-23页 |
·TRIZOL试剂提取RNA | 第23-24页 |
·核型分析 | 第24-25页 |
·目的带胶回收 | 第25页 |
·蛋白质的Westrn blotting实验 | 第25-26页 |
·脂质体转染ES细胞 | 第26页 |
·电穿孔转染ES细胞 | 第26-27页 |
·免疫荧光实验 | 第27-28页 |
·体外EB分化 | 第28页 |
·重亚硫酸盐处理测序 | 第28页 |
·建立小鼠孤雌单倍体ES细胞系 | 第28页 |
·显微操作 | 第28-31页 |
结果 | 第31-43页 |
1 建立荧光标记的孤雌单倍体系 | 第31-34页 |
2 孤雌单倍体胚胎干细胞的多能性 | 第34-40页 |
·多能性Marker表达 | 第34-36页 |
·基因表达谱分析 | 第36-37页 |
·体内分化实验 | 第37-40页 |
3 孤雌单倍体胚胎干细胞代替母源基因组支持动物发育到期 | 第40-43页 |
结论 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-53页 |
致谢 | 第53-55页 |
硕士期间发表论文 | 第55页 |