布氏锥虫elF4E蛋白的表达纯化与晶体生长
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 一、布氏锥虫eIF4E蛋白的表达纯化与晶体生长 | 第10-63页 |
| 第一章 前言 | 第10-14页 |
| eIF4E简介 | 第10页 |
| ·eIF4E在蛋白质翻译过程中的作用 | 第10-11页 |
| ·eIF4E的调控过程 | 第11-12页 |
| ·eIF4E的研究进展 | 第12-14页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第14-48页 |
| ·实验材料 | 第14-19页 |
| ·材料 | 第14页 |
| ·试剂及药品 | 第14-15页 |
| ·仪器耗材 | 第15-16页 |
| ·试剂的配制 | 第16-19页 |
| ·实验方法 | 第19-48页 |
| ·布氏锥虫eIF4E蛋白生物信息学分析 | 第20-27页 |
| ·目标基因的克隆 | 第27-34页 |
| ·布氏锥虫eIF4E小量表达测试 | 第34-36页 |
| ·布氏锥虫eIF4E蛋白表达纯化 | 第36页 |
| ·透析 | 第36-40页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第40页 |
| ·离子交换层析(AKTA自动层析系统) | 第40-42页 |
| ·生物大分子三维结构测定方法 | 第42-44页 |
| ·晶体培养 | 第44-45页 |
| ·目的蛋白晶体优化 | 第45-48页 |
| 第三章 实验结果 | 第48-62页 |
| ·TbeIF4E蛋白生物信息学分析结果 | 第48-52页 |
| ·蛋白基本理化性质分析结果 | 第48页 |
| ·eIF4E蛋白同源对比分析结果 | 第48-50页 |
| ·二级结构预测结果 | 第50-52页 |
| ·TbeIF4E重组质粒构建与鉴定 | 第52-62页 |
| ·布氏锥虫cDNA文库构建 | 第52-55页 |
| ·TbeIF4E蛋白表达纯化 | 第55-60页 |
| ·布氏锥虫eIF4E1的晶体学研究 | 第60-62页 |
| 第四章 讨论 | 第62-63页 |
| 二、斑马鱼MO25蛋白的表达纯化与初步晶体学研究 | 第63-90页 |
| 第一章 前言 | 第63-68页 |
| MO25蛋白简介 | 第63-64页 |
| ·MO25在肿瘤抑制中的作用 | 第64-65页 |
| ·MO25的调控过程 | 第65-66页 |
| ·MO25的研究进展 | 第66-68页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第68-78页 |
| ·实验材料 | 第68-72页 |
| ·菌株及质粒 | 第68页 |
| ·实验仪器及试剂 | 第68-69页 |
| ·仪器耗材 | 第69-70页 |
| ·主要实验试剂配方 | 第70-72页 |
| ·实验方法 | 第72-78页 |
| ·DrMo25重组质粒构建 | 第72-76页 |
| ·DrMO25蛋白的表达纯化 | 第76-78页 |
| 第三章 实验结果 | 第78-88页 |
| ·DrMO25蛋白生物信息学分析结果 | 第78-79页 |
| ·蛋白基本理化性质分析结果 | 第78页 |
| ·蛋白质结构域分析 | 第78-79页 |
| ·DrMo25二级结构预测 | 第79页 |
| ·DrMO25蛋白表达纯化 | 第79-88页 |
| ·DrMO25的晶体学研究 | 第82-85页 |
| ·DrMO25的结构解析 | 第85-88页 |
| 第四章 讨论 | 第88-90页 |
| 参考文献 | 第90-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第98页 |
