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天然产物银线草醇对哺乳动物细胞糖脂代谢的调控作用研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第1章 绪论第13-41页
   ·化学生物学第13-16页
     ·化学生物学概述第13-14页
     ·化学生物学的研究方法第14-16页
     ·化学遗传学的应用前景第16页
   ·银线草第16-17页
     ·银线草概述第17页
     ·银线草成分和已知生物学功能第17页
   ·糖代谢网络及其调控第17-27页
     ·葡萄糖摄取和GLUT4上膜第17-20页
     ·葡萄糖的氧化分解第20-22页
     ·葡萄糖异生第22-24页
     ·糖原的合成与分解第24-26页
     ·AMPK和糖代谢的调控第26-27页
   ·脂代谢网络及其调控第27-31页
     ·脂的种类第27-28页
     ·脂肪酸的合成第28-29页
     ·脂肪酸的氧化分解第29-30页
     ·AMPK与脂代谢网络的调控第30-31页
   ·能量代谢网络及其调控第31-36页
     ·高能化合物第31-32页
     ·线粒体结构及其膜电位第32-33页
     ·电子传递链和氧化磷酸化第33-35页
     ·AMPK与能量代谢的调控第35-36页
   ·糖脂代谢异常与代谢疾病第36-41页
     ·糖脂代谢异常与糖尿病第36-38页
     ·糖脂代谢异常与心血管疾病第38-41页
第2章 银线草醇D调控肝细胞脂代谢的研究第41-65页
   ·实验材料第41-45页
     ·细胞株第41页
     ·化学试剂第41-45页
   ·实验方法第45-49页
     ·银线草醇D的提取和纯化第45页
     ·HepG2细胞的培养第45页
     ·MTT细胞毒性检测第45-46页
     ·细胞甘油三酯和胆固醇的检测第46页
     ·siRNA转染第46页
     ·高糖诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗第46页
     ·免疫共沉淀第46页
     ·SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹分析第46-47页
     ·线粒体膜电位检测第47页
     ·细胞内腺苷酸的检测第47页
     ·细胞线粒体提取及纯度检测第47-48页
     ·细胞以及线粒体耗氧量的检测第48页
     ·乳酸含量检测第48页
     ·棕榈酸含量检测第48-49页
   ·实验结果第49-60页
     ·银线草醇D的细胞毒性的检测第49-50页
     ·银线草醇D激活了肝细胞内的AMPK-ACC信号通路第50-51页
     ·银线草醇D降低细胞内甘油三酯和胆固醇含量第51-53页
     ·银线草醇D调控脂代谢的作用依赖于AMPK第53-55页
     ·银线草醇D不影响AMPK上游—LKB1第55-56页
     ·银线草醇D引起线粒体功能的紊乱第56-57页
     ·银线草醇D抑制细胞的氧消耗但不影响电子呼吸链的功能第57-60页
   ·结论与讨论第60-65页
     ·银线草醇D调控肝细胞内的脂代谢第60-61页
     ·银线草醇D调节脂代谢的作用依赖于AMPK第61页
     ·银线草醇D激活AMPK的机制分析第61-65页
第3章 银线草醇F调控糖代谢的研究第65-87页
   ·实验材料第65-70页
     ·细胞株第65页
     ·实验动物第65页
     ·化学试剂第65-70页
   ·实验方法第70-75页
     ·L6细胞培养和分化第70页
     ·MTT细胞毒性检测第70页
     ·细胞膜和细胞质组分的分离第70页
     ·葡萄糖摄取检测第70-71页
     ·SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹分析第71页
     ·细胞免疫荧光第71页
     ·小鼠原代肝细胞分离第71页
     ·原代肝细胞糖异生实验第71-72页
     ·糖原含量检测第72页
     ·RNA提取第72页
     ·逆转录PCR和实时荧光定量PCR第72页
     ·小鼠肝脏组织线粒体的提取第72-73页
     ·细胞以及线粒体耗氧量的检测第73页
     ·细胞腺苷酸的检测第73页
     ·乳酸含量检测第73页
     ·线粒体膜电位检测第73页
     ·小鼠灌胃和腹腔注射给药第73-74页
     ·小鼠空腹血糖检测第74页
     ·丙酮酸和葡萄糖耐受实验第74-75页
   ·实验结果第75-83页
     ·银线草醇F促进L6细胞葡萄糖摄取并加强葡萄糖氧化第75-77页
     ·银线草醇F改变线粒体膜电位且抑制能量生产第77-78页
     ·银线草醇F抑制线粒体电子呼吸链复合体Ⅰ的功能第78-79页
     ·银线草醇F在原代肝细胞中的毒性检测第79-80页
     ·银线草醇F抑制原代肝细胞的葡萄糖异生第80-81页
     ·银线草醇F抑制小鼠的葡萄糖异生作用第81-83页
   ·结论与讨论第83-87页
     ·银线草醇F促进肌肉细胞对葡萄糖摄取第83页
     ·银线草醇F通过抑制线粒体呼吸链复合物Ⅰ来激活AMPK第83-84页
     ·银线草醇F抑制了葡萄糖异生第84-87页
参考文献第87-109页
附录第109-110页
致谢第110-112页
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果第112页

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