| 缩略词表 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-26页 |
| ·甘露聚糖(Mannan) | 第10-16页 |
| ·甘露聚糖的概念 | 第10页 |
| ·甘露聚糖的结构 | 第10-11页 |
| ·甘露聚糖的分类 | 第11-16页 |
| ·甘露聚糖酶(Mannase) | 第16-25页 |
| ·甘露聚糖酶的定义 | 第16-17页 |
| ·甘露聚糖酶的作用机制 | 第17-19页 |
| ·甘露聚糖酶的生产 | 第19-21页 |
| ·甘露聚糖酶的特性 | 第21-23页 |
| ·甘露聚糖酶的应用 | 第23-25页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第25-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·菌株与质粒 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27页 |
| ·溶液 | 第27-29页 |
| ·培养基 | 第29页 |
| ·菌种的筛选与鉴定 | 第29-32页 |
| ·固体培养基初筛 | 第29-30页 |
| ·摇瓶发酵复筛 | 第30页 |
| ·甘露聚糖酶的活力测定 | 第30页 |
| ·菌种鉴定 | 第30-32页 |
| ·甘露聚糖酶菌株产酶条件的优化 | 第32-33页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第32页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第32页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第32页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第32页 |
| ·培养基装液量对产酶的影响 | 第32-33页 |
| ·发酵液粗酶的酶学性质 | 第33页 |
| ·最适pH | 第33页 |
| ·pH稳定性 | 第33页 |
| ·最适反应温度 | 第33页 |
| ·热稳定性 | 第33页 |
| ·金属离子和化合物对酶活的影响 | 第33页 |
| ·甘露聚糖酶基因的克隆 | 第33-37页 |
| ·甘露聚糖酶基因表达片段的扩增 | 第33-34页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第34-35页 |
| ·甘露聚糖酶基因的克隆 | 第35-37页 |
| ·甘露聚糖酶基因在BL21(DE3)中诱导表达 | 第37-38页 |
| ·大肠杆菌BL21 CaCl_2法感受态的制备 | 第37页 |
| ·转化 | 第37页 |
| ·重组蛋白在不同温度下的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·不同浓度IPTG对重组蛋白的诱导 | 第38页 |
| ·重组甘露聚糖酶酶学性质研究 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-61页 |
| ·高活性甘露聚糖酶产生菌筛选及鉴定 | 第40-43页 |
| ·高活性甘露聚糖酶产生菌的筛选 | 第40页 |
| ·产甘露聚糖酶活性菌株的鉴定 | 第40-43页 |
| ·培养条件对产酶的影响 | 第43-46页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第43-44页 |
| ·培养温度对产酶的影响 | 第44页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第44-45页 |
| ·氮源对产酶的影响 | 第45页 |
| ·培养基装液量对产酶的影响 | 第45-46页 |
| ·甘露聚糖酶活力的测定 | 第46-50页 |
| ·甘露糖的标准曲线 | 第46页 |
| ·酶反应的最适pH和pH稳定性 | 第46-47页 |
| ·酶的最适反应温度和稳定性 | 第47-48页 |
| ·各种金属离子对酶活的影响 | 第48-49页 |
| ·发酵液中酶与底物的水解时间影响 | 第49-50页 |
| ·甘露聚糖酶的大肠杆菌重组克隆 | 第50-55页 |
| ·芽孢杆菌总DNA的抽提 | 第50页 |
| ·甘露聚糖酶基因的扩增 | 第50-51页 |
| ·阳性克隆的筛选及鉴定 | 第51-52页 |
| ·序列与结构分析 | 第52-55页 |
| ·甘露聚糖酶的重组表达 | 第55-59页 |
| ·常规条件下甘露聚糖酶的重组表达 | 第55-56页 |
| ·不同条件下重组蛋白的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·不同浓度IPTG对重组蛋白的诱导表达 | 第57-59页 |
| ·重组甘露聚糖酶的pH和温度特性 | 第59-61页 |
| ·重组甘露聚糖酶的最适pH和pH稳定性 | 第59页 |
| ·重组甘露聚糖酶的最适温度和温度稳定性 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-65页 |
| ·Bacillus amyloliquefaciens和甘露聚糖酶 | 第61页 |
| ·Bacillus amyloliquefaciens T27甘露聚糖酶的发酵优化 | 第61-62页 |
| ·甘露聚糖酶的表达 | 第62-64页 |
| ·甘露聚糖酶的酶学性质 | 第64-65页 |
| 总结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75页 |