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烟草WD40蛋白TTG2对生长发育和抗病性的调控作用

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
缩略语第15-18页
前言第18-20页
第一部分 文献综述第20-48页
 第一章 WD40结构域细胞功能的概述第20-30页
  一、WD40结构域具有多种细胞功能第20-21页
  二、WD40结构域在真核生物的蛋白质组中含量丰富第21-22页
  三、WD40:细胞中最普遍的互作因子?第22-27页
   (一) β转运蛋白:与α、γ亚基组成复合体的WD40原型第22-24页
   (二) WD40-WD40互作为复合体组装提供平台第24页
   (三) WD40蛋白Sro7起支架调控作用第24页
   (四) WD40蛋白为肽链基序互作提供特殊平台第24-25页
   (五) β-发夹为WD40-蛋白互作提供平台第25-26页
   (六) 通过核孔复合体蛋白中的供体片完成螺旋桨结构第26页
   (七) WD40-DNA与紫外DNA-损失结合复合体的互作第26-27页
  四、为什么形成WD40结构域?第27-28页
  五、结语第28-30页
 第二章 植物生长素信号通路的概述第30-36页
  一、生长素的受体第31-32页
  二、ARFs和Aux/IAA的作用机制研究第32-34页
  三、生长素与植物防卫反应第34-36页
 第三章 植物防卫反应与抗病信号传导通路第36-48页
  一、植物的抗病反应第36-37页
  二、植物防卫病害的机制第37-39页
  三、参与植物防卫反应的信号分子第39-41页
   (一) 水杨酸(SA)第39-40页
   (二) 茉莉酸(jasmonic acid,JA)和乙烯(ethylene,ET)第40页
   (三) 过氧化氢(H_2O_2)第40-41页
  四、植物防卫信号传导通路第41-46页
   (一) 依赖SA的防卫反应信号传导通路第41-42页
   (二) 抗病基因介导的防卫信号传导通路第42-43页
   (三) H_2O_2介导的信号传导通路第43-45页
   (四) 植物防卫反应信号传导通路拮抗及协同作用第45-46页
   (五) 依赖于茉莉酸和乙烯的防卫信号途径第46页
  五、结语第46-48页
第二部分 研究内容第48-124页
 第一章 烟草NtTTG2基因全长cDNA的克隆与序列分析第48-64页
  摘要第48-49页
  1 材料与方法第49-56页
   ·植物材料第49页
   ·菌株和载体第49页
   ·主要生化试剂第49页
   ·RACE (rapid amplification of cDNA ends)实验第49-52页
   ·生物信息学分析第52页
   ·TMV、CMV、Pcc、NAA及SA处理烟草第52-53页
   ·Northern blot测定NtTTG2组织表达及被NAA和病原菌处理后表达的情况第53-55页
   ·NtTTG2的亚细胞定位第55-56页
  2 结果与分析第56-61页
  3 讨论第61-63页
  ABSTRACT第63-64页
 第二章 NtTTG2激活生长素信号通路但抑制水杨酸信号通路第64-78页
  摘要第64-65页
  1 材料和方法第65-71页
   ·研究材料第65页
   ·NtTTG2沉默载体的构建第65-67页
   ·NtTTG2过表达载体的构建第67页
   ·烟草转化及筛选第67-70页
   ·生长素信号通路ARF相关基因的表达情况第70-71页
  2 结果与分析第71-73页
   ·转基因植株的产生及鉴定第71-72页
   ·TTG2影响ARF8的表达第72-73页
   ·转基因植株中生长素(ARF8,GH3)和水杨酸信号通路(PR-1α,PR-2α)基因表达情况第73页
  3 讨论第73-76页
  ABSTRACT第76-78页
 第三章 NtTTG2通过影响生长素信号通路促进烟草生长发育第78-92页
  摘要第78-79页
  1 材料与方法第79-82页
   ·植物材料第79页
   ·烟草生长的测定第79-80页
   ·花色素苷含量的测定方法第80页
   ·烟草种子数量第80页
   ·基因的表达与检测第80-81页
   ·IAA的提取与测定第81-82页
   ·转录激活功能分析第82页
   ·数据处理第82页
  2 结果与分析第82-88页
   ·NtTTG2沉默后抑制烟草的生长第82-83页
   ·NtTTG2沉默后影响花瓣着色并且种子数量减少第83-85页
   ·NtTTG2过表达后促进烟草生长及花瓣着色并且种子数量增加第85-87页
   ·NtTTG2不影响植物生长素的含量第87页
   ·ARF8具有转录激活因子活性第87-88页
  3 讨论第88-90页
  ABSTRACT第90-92页
 第四章 NtTTG2抑制SA/NPR1信号通路介导的防卫反应第92-108页
  摘要第92-94页
  1 材料与方法第94-98页
   ·菌株第94-95页
   ·植物材料第95页
   ·不同基因型烟草的产生第95-96页
   ·CMV和TMV及Pcc的处理及检测第96-97页
   ·烟草的抗病性分子检测第97页
   ·水杨酸提取与测定第97-98页
  2 结果与分析第98-105页
   ·NtTTG2沉默和过表达烟草接种病原物后发病症状观察第98-99页
   ·NtTTG2沉默和过表达烟草接种病原物后发病情况定量分析第99-101页
   ·NtTTG2不影响烟草内源SA的生成第101页
   ·NtTTG2抑制SA/NPR1信号通路介导的防卫反应第101-105页
  3 讨论第105-106页
  ABSTRACT第106-108页
 第五章 NtTTG2通过影响ARF8和NPR1的核定位而调节生长素信号和水杨酸信号通路的下游基因第108-124页
  摘要第108-109页
  1 材料与方法第109-115页
   ·植物材料第109页
   ·烟草根部细胞基因瞬时表达第109-110页
   ·酵母双杂交验证NtTTG2与ARF8或NPR1的互作第110-112页
   ·BiFC验证TTG2与ARF8或NPR1的互作第112-114页
   ·基因表达检测第114-115页
  2 结果与分析第115-119页
   ·NtTTG2与ARF8或NPR1不发生互作第115-116页
   ·NtTTG2促进ARF8定位细胞核而将NPR1扣留在细胞质第116-118页
   ·NtTTG2通过调节ARF8和NPR1的表达影响GH3和PR基因的表达第118-119页
  3 讨论第119-123页
   ·NtTTG2通过影响ARF8和NPR1的核定位,调节生长素信号和水杨酸信号通路的下游基因表达第119-121页
   ·参与NtTTG2调节植物的生长和抗病防卫的其他作用因子第121-123页
  ABSTRACT第123-124页
总结与展望第124-126页
 一、全文总结第124页
 二、研究展望第124-126页
参考文献第126-142页
攻读学位期间发表的学术论文第142-144页
致谢第144页

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