摘要 | 第1-11页 |
ABSTRACT | 第11-15页 |
缩略语 | 第15-18页 |
前言 | 第18-20页 |
第一部分 文献综述 | 第20-48页 |
第一章 WD40结构域细胞功能的概述 | 第20-30页 |
一、WD40结构域具有多种细胞功能 | 第20-21页 |
二、WD40结构域在真核生物的蛋白质组中含量丰富 | 第21-22页 |
三、WD40:细胞中最普遍的互作因子? | 第22-27页 |
(一) β转运蛋白:与α、γ亚基组成复合体的WD40原型 | 第22-24页 |
(二) WD40-WD40互作为复合体组装提供平台 | 第24页 |
(三) WD40蛋白Sro7起支架调控作用 | 第24页 |
(四) WD40蛋白为肽链基序互作提供特殊平台 | 第24-25页 |
(五) β-发夹为WD40-蛋白互作提供平台 | 第25-26页 |
(六) 通过核孔复合体蛋白中的供体片完成螺旋桨结构 | 第26页 |
(七) WD40-DNA与紫外DNA-损失结合复合体的互作 | 第26-27页 |
四、为什么形成WD40结构域? | 第27-28页 |
五、结语 | 第28-30页 |
第二章 植物生长素信号通路的概述 | 第30-36页 |
一、生长素的受体 | 第31-32页 |
二、ARFs和Aux/IAA的作用机制研究 | 第32-34页 |
三、生长素与植物防卫反应 | 第34-36页 |
第三章 植物防卫反应与抗病信号传导通路 | 第36-48页 |
一、植物的抗病反应 | 第36-37页 |
二、植物防卫病害的机制 | 第37-39页 |
三、参与植物防卫反应的信号分子 | 第39-41页 |
(一) 水杨酸(SA) | 第39-40页 |
(二) 茉莉酸(jasmonic acid,JA)和乙烯(ethylene,ET) | 第40页 |
(三) 过氧化氢(H_2O_2) | 第40-41页 |
四、植物防卫信号传导通路 | 第41-46页 |
(一) 依赖SA的防卫反应信号传导通路 | 第41-42页 |
(二) 抗病基因介导的防卫信号传导通路 | 第42-43页 |
(三) H_2O_2介导的信号传导通路 | 第43-45页 |
(四) 植物防卫反应信号传导通路拮抗及协同作用 | 第45-46页 |
(五) 依赖于茉莉酸和乙烯的防卫信号途径 | 第46页 |
五、结语 | 第46-48页 |
第二部分 研究内容 | 第48-124页 |
第一章 烟草NtTTG2基因全长cDNA的克隆与序列分析 | 第48-64页 |
摘要 | 第48-49页 |
1 材料与方法 | 第49-56页 |
·植物材料 | 第49页 |
·菌株和载体 | 第49页 |
·主要生化试剂 | 第49页 |
·RACE (rapid amplification of cDNA ends)实验 | 第49-52页 |
·生物信息学分析 | 第52页 |
·TMV、CMV、Pcc、NAA及SA处理烟草 | 第52-53页 |
·Northern blot测定NtTTG2组织表达及被NAA和病原菌处理后表达的情况 | 第53-55页 |
·NtTTG2的亚细胞定位 | 第55-56页 |
2 结果与分析 | 第56-61页 |
3 讨论 | 第61-63页 |
ABSTRACT | 第63-64页 |
第二章 NtTTG2激活生长素信号通路但抑制水杨酸信号通路 | 第64-78页 |
摘要 | 第64-65页 |
1 材料和方法 | 第65-71页 |
·研究材料 | 第65页 |
·NtTTG2沉默载体的构建 | 第65-67页 |
·NtTTG2过表达载体的构建 | 第67页 |
·烟草转化及筛选 | 第67-70页 |
·生长素信号通路ARF相关基因的表达情况 | 第70-71页 |
2 结果与分析 | 第71-73页 |
·转基因植株的产生及鉴定 | 第71-72页 |
·TTG2影响ARF8的表达 | 第72-73页 |
·转基因植株中生长素(ARF8,GH3)和水杨酸信号通路(PR-1α,PR-2α)基因表达情况 | 第73页 |
3 讨论 | 第73-76页 |
ABSTRACT | 第76-78页 |
第三章 NtTTG2通过影响生长素信号通路促进烟草生长发育 | 第78-92页 |
摘要 | 第78-79页 |
1 材料与方法 | 第79-82页 |
·植物材料 | 第79页 |
·烟草生长的测定 | 第79-80页 |
·花色素苷含量的测定方法 | 第80页 |
·烟草种子数量 | 第80页 |
·基因的表达与检测 | 第80-81页 |
·IAA的提取与测定 | 第81-82页 |
·转录激活功能分析 | 第82页 |
·数据处理 | 第82页 |
2 结果与分析 | 第82-88页 |
·NtTTG2沉默后抑制烟草的生长 | 第82-83页 |
·NtTTG2沉默后影响花瓣着色并且种子数量减少 | 第83-85页 |
·NtTTG2过表达后促进烟草生长及花瓣着色并且种子数量增加 | 第85-87页 |
·NtTTG2不影响植物生长素的含量 | 第87页 |
·ARF8具有转录激活因子活性 | 第87-88页 |
3 讨论 | 第88-90页 |
ABSTRACT | 第90-92页 |
第四章 NtTTG2抑制SA/NPR1信号通路介导的防卫反应 | 第92-108页 |
摘要 | 第92-94页 |
1 材料与方法 | 第94-98页 |
·菌株 | 第94-95页 |
·植物材料 | 第95页 |
·不同基因型烟草的产生 | 第95-96页 |
·CMV和TMV及Pcc的处理及检测 | 第96-97页 |
·烟草的抗病性分子检测 | 第97页 |
·水杨酸提取与测定 | 第97-98页 |
2 结果与分析 | 第98-105页 |
·NtTTG2沉默和过表达烟草接种病原物后发病症状观察 | 第98-99页 |
·NtTTG2沉默和过表达烟草接种病原物后发病情况定量分析 | 第99-101页 |
·NtTTG2不影响烟草内源SA的生成 | 第101页 |
·NtTTG2抑制SA/NPR1信号通路介导的防卫反应 | 第101-105页 |
3 讨论 | 第105-106页 |
ABSTRACT | 第106-108页 |
第五章 NtTTG2通过影响ARF8和NPR1的核定位而调节生长素信号和水杨酸信号通路的下游基因 | 第108-124页 |
摘要 | 第108-109页 |
1 材料与方法 | 第109-115页 |
·植物材料 | 第109页 |
·烟草根部细胞基因瞬时表达 | 第109-110页 |
·酵母双杂交验证NtTTG2与ARF8或NPR1的互作 | 第110-112页 |
·BiFC验证TTG2与ARF8或NPR1的互作 | 第112-114页 |
·基因表达检测 | 第114-115页 |
2 结果与分析 | 第115-119页 |
·NtTTG2与ARF8或NPR1不发生互作 | 第115-116页 |
·NtTTG2促进ARF8定位细胞核而将NPR1扣留在细胞质 | 第116-118页 |
·NtTTG2通过调节ARF8和NPR1的表达影响GH3和PR基因的表达 | 第118-119页 |
3 讨论 | 第119-123页 |
·NtTTG2通过影响ARF8和NPR1的核定位,调节生长素信号和水杨酸信号通路的下游基因表达 | 第119-121页 |
·参与NtTTG2调节植物的生长和抗病防卫的其他作用因子 | 第121-123页 |
ABSTRACT | 第123-124页 |
总结与展望 | 第124-126页 |
一、全文总结 | 第124页 |
二、研究展望 | 第124-126页 |
参考文献 | 第126-142页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第142-144页 |
致谢 | 第144页 |