| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 猪脑心肌炎病毒研究进展 | 第11-29页 |
| 1 病原学 | 第11-13页 |
| ·病毒基因组结构 | 第11-12页 |
| ·病毒基因组所编码蛋白 | 第12-13页 |
| 2 流行病学 | 第13-14页 |
| 3 致病机理 | 第14-17页 |
| ·病毒致病的分子基础 | 第14-15页 |
| ·组织器官的损伤与免疫应答 | 第15-17页 |
| ·组织器官的损伤 | 第15-16页 |
| ·免疫应答 | 第16-17页 |
| 4 诊断技术 | 第17-19页 |
| ·临床症状与病理变化 | 第17页 |
| ·实验室诊断方法 | 第17-19页 |
| ·病毒抗原检测技术 | 第17-19页 |
| 5 疾病防制 | 第19-20页 |
| 6 公共卫生学 | 第20-22页 |
| 参考文献 | 第22-29页 |
| 第二章 猪脑心肌炎病毒VP1基因的原核表达与抗体制备 | 第29-41页 |
| 摘要 | 第29页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| ·实验动物、重组质粒、载体及菌株 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| 2 方法 | 第30-32页 |
| ·重组质粒pET28a-VP1的构建 | 第30-31页 |
| ·引物 | 第30页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第30页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第30页 |
| ·目的基因与表达载体pET28a的酶切 | 第30页 |
| ·目的基因与表达载体的连接 | 第30-31页 |
| ·重组质粒的转化 | 第31页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第31页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第31页 |
| ·序列测定 | 第31页 |
| ·重组蛋白在大肠杆菌中的表达以及蛋白的纯化 | 第31-32页 |
| ·重组菌的诱导表达及表达条件的优化 | 第31-32页 |
| ·重组蛋白的Western blot鉴定 | 第32页 |
| ·重组蛋白的大量表达及纯化 | 第32页 |
| ·重组蛋白VP1抗血清的制备与鉴定 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-37页 |
| ·EMCV VP1基因的扩增 | 第32-33页 |
| ·重组质粒pET28a-VP1的酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组菌的诱导表达与SDS-PAGE电泳分析 | 第34页 |
| ·重组蛋白VP1的Western blot鉴定 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白VP1的纯化 | 第36页 |
| ·重组蛋白VP1抗血清的制备与鉴定 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-40页 |
| Abstract | 第40-41页 |
| 第三章 猪脑心肌炎病毒VP1蛋白单克隆抗体的研制 | 第41-55页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 1 材料 | 第41-42页 |
| ·实验动物、细胞系以及毒株 | 第41-42页 |
| ·主要试剂 | 第42页 |
| 2 方法 | 第42-45页 |
| ·免疫原的制备 | 第42页 |
| ·免疫方案 | 第42页 |
| ·细胞融合 | 第42-44页 |
| ·细胞融合前准备工作 | 第42-43页 |
| ·细胞融合 | 第43-44页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第44页 |
| ·阳性孔的亚克隆 | 第44页 |
| ·杂交瘤细胞的培养与上清抗体效价的测定 | 第44页 |
| ·腹水的制备与抗体效价的测定 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第45页 |
| ·单克隆抗体Ig类及亚类的鉴定 | 第45页 |
| ·抗体分泌稳定性的测定 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-49页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选与单抗效价的测定 | 第45-46页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第46-48页 |
| ·单克隆抗体Ig类及亚类的鉴定 | 第48页 |
| ·腹水抗体效价的测定 | 第48页 |
| ·抗体分泌稳定性的测定 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-53页 |
| Abstract | 第53-55页 |
| 全文总结 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |