| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1. 前言 | 第8-14页 |
| ·枯草芽孢杆菌表达系统 | 第8页 |
| ·枯草芽孢杆菌简介 | 第8页 |
| ·枯草芽孢杆菌基因工程和表达系统 | 第8页 |
| ·枯草芽孢杆菌的一般分泌途径 | 第8-10页 |
| ·Sec 型信号肽 | 第9页 |
| ·依赖Sec-SRP 的分泌途径 | 第9-10页 |
| ·乳糖酶简介 | 第10-12页 |
| ·乳糖酶的来源 | 第10-11页 |
| ·乳糖酶在食品方面的应用 | 第11-12页 |
| ·高温乳糖酶的研究与应用 | 第12-13页 |
| ·高温乳糖酶的应用优势 | 第12-13页 |
| ·嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热乳糖酶 | 第13页 |
| ·课题研究意义和内容 | 第13-14页 |
| ·课题的研究意义 | 第13页 |
| ·主要研究内容 | 第13-14页 |
| 2. 材料与方法 | 第14-20页 |
| ·实验材料 | 第14-16页 |
| ·菌株与质粒 | 第14页 |
| ·工具酶与试剂 | 第14-15页 |
| ·培养基与培养条件 | 第15页 |
| ·PCR 引物 | 第15页 |
| ·实验仪器与设备 | 第15-16页 |
| ·实验方法 | 第16-20页 |
| ·枯草芽孢杆菌染色体DNA 的提取 | 第16页 |
| ·质粒DNA 的操作 | 第16-17页 |
| ·引物合成、PCR 反应和DNA 片段的测序 | 第17页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第17页 |
| ·枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第17-18页 |
| ·乳糖酶活力的定性检测和定量检测 | 第18页 |
| ·重组菌株各成分的获得 | 第18页 |
| ·SDS-PAGE 蛋白质凝胶电泳 | 第18-19页 |
| ·Western blot | 第19-20页 |
| 3. 结果与讨论 | 第20-35页 |
| ·信号肽对耐热乳糖酶表达的影响 | 第20-24页 |
| ·bgaB 的克隆及其分泌表达载体的构建 | 第20-22页 |
| ·重组菌株耐热乳糖酶表达活性的定性和定量检测 | 第22-23页 |
| ·重组菌SDS-PAGE 和Western blot 检测 | 第23-24页 |
| ·耐热乳糖酶强疏水区对其分泌的影响 | 第24-29页 |
| ·bgaB 强疏水性区域的删除 | 第24-25页 |
| ·删除后基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·重组质粒的枯草芽孢杆菌转化和筛选 | 第26页 |
| ·SDS-PAGE 和Western blot | 第26-29页 |
| ·耐热乳糖酶长度对其分泌的影响 | 第29-35页 |
| ·不同长度的bgaB 基因的获得 | 第29-30页 |
| ·不同长度的bgaB 基因的克隆 | 第30页 |
| ·重组质粒的枯草芽孢杆菌转化和筛选 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE 和Western blot | 第30-35页 |
| 主要结论 | 第35-36页 |
| 存在问题与展望 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第43页 |