| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-18页 |
| ·肿瘤的基本概况 | 第8-12页 |
| ·癌基因 | 第8-9页 |
| ·抑癌基因 | 第9-12页 |
| ·UTRN概述 | 第12-13页 |
| ·UTRN基因和蛋白结构 | 第12页 |
| ·UTRN基因的启动子和转录调节 | 第12-13页 |
| ·UTRN蛋白的分布和功能 | 第13页 |
| ·RNAi概述 | 第13-15页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第14页 |
| ·RNAi的应用 | 第14-15页 |
| ·课题来源及研究的目的和意义 | 第15-18页 |
| ·课题来源及前期工作基础 | 第15-16页 |
| ·研究的目的及意义 | 第16-18页 |
| 第2章 材料和方法 | 第18-36页 |
| ·材料 | 第18-25页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·细胞系 | 第18页 |
| ·肺癌细胞系的RNA样品 | 第18页 |
| ·质粒载体 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·缓冲液及其他溶液 | 第19-22页 |
| ·培养基及相关溶液 | 第22-23页 |
| ·实验中的相关引物及siRNA序列 | 第23-24页 |
| ·主要实验仪器 | 第24-25页 |
| ·主要软件 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-36页 |
| ·UTRN在肺癌细胞系中的表达 | 第25-26页 |
| ·UTRN在肺癌细胞中的定位 | 第26-28页 |
| ·siRNA的设计 | 第28-29页 |
| ·siRNA-pSilencer~(TM) 4.1-CMV neo vectors表达载体的构建 | 第29-32页 |
| ·siRNA稳定转染NIH3T3 细胞及转染细胞的筛选 | 第32页 |
| ·RNAi对UTRN基因封闭效果的半定量RT-PCR检测 | 第32-34页 |
| ·siRNA抑制UTRN基因表达对细胞增殖能力的影响 | 第34页 |
| ·siRNA抑制UTRN基因表达对细胞微丝骨架F-actin的影响 | 第34-35页 |
| ·本章小结 | 第35-36页 |
| 第3章 UTRN在肺癌细胞系中的表达定位分析 | 第36-44页 |
| ·全长UTRN在肺癌细胞系中的扩增结果 | 第36页 |
| ·UTRN蛋白在肺癌细胞系中的定位分析 | 第36-40页 |
| ·UTRN蛋白的Western blotting定位结果 | 第38页 |
| ·UTRN蛋白在肺癌细胞系A549 中的免疫荧光定位结果 | 第38-40页 |
| ·UTRN基因表达降低或缺失与肿瘤发生的关系 | 第40-41页 |
| ·UTRN截短蛋白的核转位与肿瘤发生的关系 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-44页 |
| 第4章 RNAi分析UTRN的细胞生物学作用 | 第44-53页 |
| ·RNAi沉默NIH3T3 细胞系UTRN基因表达效果分析 | 第44-48页 |
| ·siRNA的设计 | 第44页 |
| ·siRNA-pSilencer~(TM) 4.1-CMV neo vectors的构建和确认 | 第44-45页 |
| ·重组体的大量制备、质量检测及浓度测定 | 第45-48页 |
| ·稳定转染siRNA重组体的NIH3T3 细胞系的获得 | 第48页 |
| ·半定量RT-PCR方法检验siRNA封闭UTRN基因表达的效果 | 第48页 |
| ·UTRN的细胞生物学功能分析 | 第48-50页 |
| ·UTRN基因表达降低后细胞增殖能力的变化 | 第48-49页 |
| ·UTRN基因表达降低后细胞骨架微丝的变化 | 第49-50页 |
| ·UTRN对细胞增殖能力的影响 | 第50-51页 |
| ·UTRN对细胞骨架微丝的影响 | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 附录 1 pSilencer 重组子测序结果图 | 第58-60页 |
| 附录 2 增殖曲线计数数据 | 第60-61页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
