| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| ·抗肿瘤药物筛选现状和发展 | 第10-12页 |
| ·动物水平的药物筛选 | 第10-11页 |
| ·细胞水平的药物筛选 | 第11-12页 |
| ·分子水平的药物筛选 | 第12页 |
| ·基于启动子的药物筛选系统 | 第12-18页 |
| ·原理 | 第13-15页 |
| ·概述 | 第15-16页 |
| ·优势和发展 | 第16-18页 |
| ·c-myc 基因和肿瘤发生 | 第18-21页 |
| ·c-myc 基因和人类肿瘤 | 第18-19页 |
| ·c-myc 启动子的转录调控 | 第19-21页 |
| ·本课题采用的技术路线 | 第21页 |
| ·本章小结 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-38页 |
| ·实验材料 | 第23-26页 |
| ·质粒和细胞株 | 第23-24页 |
| ·分子生物学试剂和材料 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·溶液配制 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-37页 |
| ·c-myc-β-gal 质粒的构建和鉴定 | 第26-30页 |
| ·c-myc-β-gal-U2OS 稳定表达株的建立 | 第30-31页 |
| ·药物对稳定表达株的作用 | 第31-32页 |
| ·药物对稳定表达株的作用的验证 | 第32-34页 |
| ·药物作用机理的研究 | 第34-35页 |
| ·碱性磷酸酶基因的克隆表达和活性测试 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 实验结果 | 第38-52页 |
| ·c-myc-β-gal 质粒的构建和鉴定 | 第38-40页 |
| ·对c-myc/pGL2-Basic 和PmeI-β-gal 进行酶切和片段回收 | 第38页 |
| ·c-myc-β-gal 重组质粒的酶切鉴定 | 第38-40页 |
| ·药物对 c-myc-β-gal-U2OS 稳定表达株的作用及验证 | 第40-42页 |
| ·药物对 c-myc-β-gal/U2OS 稳定表达株的作用 | 第40页 |
| ·半定量RT-PCR 检测c-myc 基因表达 | 第40-41页 |
| ·MTT 法检测阿霉素对 U2OS 细胞的作用 | 第41-42页 |
| ·碱性磷酸酶基因的克隆和表达 | 第42-47页 |
| ·碱性磷酸酶基因的克隆 | 第42-45页 |
| ·碱性磷酸酶基因的表达和内参条件的确定 | 第45-47页 |
| ·药物作用机理的研究 | 第47-51页 |
| ·c-myc 启动子突变缺失型的构建 | 第47-50页 |
| ·阿霉素对c-myc 启动子突变缺失型的作用 | 第50-51页 |
| ·本章小结 | 第51-52页 |
| 第四章 分析与讨论 | 第52-56页 |
| ·c-myc-β-gal-U2OS 筛选模型的建立 | 第52-53页 |
| ·基于 c-myc 启动子的药物筛选模型筛选抗骨肉瘤药物 | 第53-54页 |
| ·阿霉素对 c-myc 启动子缺失突变型的作用 | 第54页 |
| ·碱性磷酸酶做内参控制转染效率 | 第54-56页 |
| 第五章 结论 | 第56-57页 |
| ·主要结论 | 第56页 |
| ·研究展望 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 攻读硕士学位期间已发表或录用的论文 | 第61页 |
