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海洋链霉菌Streptomyces griseoaurantiacus M045基因组结构及功能基因簇研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
英文缩写符号及中英文对照表第11-13页
第一章 链霉菌基因组学和生物合成基因簇研究进展第13-49页
   ·链霉菌基因组学研究第14-25页
     ·天蓝色链霉菌Streptomyces coelicolor A3(2)的基因组研究第14-21页
     ·阿维链霉菌Streptomyces avermitilis的基因组研究第21-25页
   ·链霉菌次级代谢生物合成基因簇研究第25-33页
     ·Ⅰ型聚酮合酶(Ⅰ型PKS)途径第26页
     ·Ⅱ型聚酮合酶(Ⅱ型PKS)途径第26-27页
     ·Ⅲ型聚酮合酶(Ⅲ型PKS)途径第27-28页
     ·聚醚类抗生素合成途径第28-30页
     ·非核糖体聚肽合酶(NRPS)途径第30-31页
     ·抗生素的组合生物合成第31-33页
   ·海洋放线菌及其次级代谢产物第33-40页
   ·专性海洋放线菌Salinispora tropica基因组学研究第40-43页
   ·手霉素类天然化合物研究进展第43-48页
   ·本论文研究内容及意义第48-49页
第二章 海洋链霉菌Streptomyces griseoaurantiacus M045基因组结构研究第49-85页
   ·材料和方法第50-52页
     ·海洋链霉菌M045培养和基因组DNA提取第50-51页
     ·全基因组shotgun测序和序列拼接第51页
     ·基因预测和功能注释第51-52页
     ·预测蛋白的亚细胞定位第52页
     ·利用KEGG注释代谢通路第52页
     ·预测基因组岛第52页
     ·多序列比对和系统发育分析第52页
   ·结果和讨论第52-84页
     ·链霉菌M045大片段基因组DNA的提取第52-53页
     ·链霉菌M045全基因组测序结果第53-55页
     ·蛋白功能的分类第55-57页
     ·预测蛋白的亚细胞定位第57-59页
     ·链霉菌M045的分泌系统第59-67页
     ·链霉菌M045的气囊合成蛋白第67-71页
     ·链霉菌M045的初级代谢过程第71-76页
     ·链霉菌M045的次级代谢过程第76-82页
     ·链霉菌M045的基因组岛分析第82-84页
   ·小结第84-85页
第三章 手霉素A和中尼霉素生物合成基因簇解析第85-117页
   ·实验材料和方法第86-92页
     ·链霉菌M045基因组fosmid文库的构建第86-89页
     ·链霉菌M045基因组fosmid文库的筛选第89-91页
     ·基因簇功能基因注释第91-92页
   ·结果和讨论第92-114页
     ·链霉菌M045基因组fosmid文库第92-95页
     ·5-氨基乙酰丙酸合成酶基因的克隆和文库筛选第95-98页
     ·基因簇相关功能基因的注释第98-103页
     ·手霉素A生物合成基因簇解析第103-110页
     ·中尼霉素A生物合成基因簇解析第110-114页
   ·小结第114-117页
第四章 手霉素A和中尼霉素生物合成基因簇的关键基因功能验证第117-139页
   ·实验材料和方法第119-127页
     ·功能基因的克隆第119-120页
     ·基因敲除载体构建第120-122页
     ·大肠杆菌—链霉菌间的接合转移第122-123页
     ·接合转化子的分子检测第123-126页
     ·转化子的代谢产物分析第126-127页
   ·结果和讨论第127-136页
     ·ChiD2和ChiA1功能基因的克隆第127-129页
     ·基因敲除载体的构建第129页
     ·大肠杆菌—链霉菌间的接合转移第129-130页
     ·链霉菌M045转化子的分子检测第130-132页
     ·链霉菌M045及转化子代谢产物的化学分析第132-136页
   ·小结第136-139页
工作展望第139-141页
主要结论和创新点第141-143页
参考文献第143-161页
攻读博士期间完成论文和专利情况第161-163页
附录第163-177页
致谢第177-178页

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