| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第4-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-26页 |
| ·哺乳动物牙齿的发育过程 | 第10-11页 |
| ·哺乳动物牙齿早期发育启动的分子机制 | 第11-15页 |
| ·介导牙齿发生的生长因子(Growth Factors,GF) | 第11-13页 |
| ·转录因子在牙齿发育中的作用 | 第13-15页 |
| ·Msx | 第13-14页 |
| ·Barx1 | 第14页 |
| ·Dlx | 第14页 |
| ·Pax9 | 第14页 |
| ·Lef1 | 第14-15页 |
| ·Wnt信号通路 | 第15-18页 |
| ·Wnt信号的四条传导通路 | 第15-16页 |
| ·Wnt信号通路的分泌型拮抗剂 | 第16-17页 |
| ·在牙齿发育过程中表达的Wnt基因 | 第17-18页 |
| ·慢病毒载体 | 第18-20页 |
| ·HIV-1慢病毒载体的结构特点 | 第18页 |
| ·慢病毒载体的基因结构及其特点 | 第18-19页 |
| ·HIV-1慢病毒的生活史 | 第19页 |
| ·慢病毒载体转导非分裂期细胞的分子机制 | 第19页 |
| ·HIV-1慢病毒载体的构建 | 第19-20页 |
| ·RNA干扰 | 第20-24页 |
| ·RNA干扰技术的概念 | 第20-21页 |
| ·RNA干扰技术的原理 | 第21-22页 |
| ·慢病毒载体介导RNA干扰 | 第22-23页 |
| ·RNA干扰技术的应用 | 第23-24页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
| 第2章 材料与方法 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·菌株和载体 | 第26页 |
| ·细胞 | 第26页 |
| ·实验动物 | 第26页 |
| ·实验仪器与设备 | 第26页 |
| ·主要药品 | 第26-27页 |
| ·耗材 | 第27页 |
| ·试剂配制 | 第27-29页 |
| ·Realtime PCR引物和探针 | 第29页 |
| ·方法 | 第29-40页 |
| ·慢病毒的生产 | 第29-34页 |
| ·质粒的抽提 | 第29-30页 |
| ·酶切鉴定 | 第30-31页 |
| ·293T细胞扩培与冻存 | 第31-32页 |
| ·磷酸钙法转染293T细胞,生产慢病毒 | 第32-33页 |
| ·慢病毒液的收集与浓缩 | 第33页 |
| ·感染293T细胞及病毒滴度的计算 | 第33页 |
| ·最佳MOI的确定 | 第33-34页 |
| ·Realtime RT-PCR | 第34-36页 |
| ·总RNA抽提 | 第34-35页 |
| ·RT | 第35页 |
| ·cDNA的Realtime PCR反应 | 第35-36页 |
| ·牙胚组织重组、病毒感染和器官培养 | 第36-38页 |
| ·器官培养 | 第36-37页 |
| ·肾囊膜下培养 | 第37页 |
| ·牙胚组织重组 | 第37-38页 |
| ·形态学分析 | 第38-40页 |
| ·HE染色 | 第38-39页 |
| ·Azon染色法 | 第39-40页 |
| 第3章 实验结果 | 第40-56页 |
| ·慢病毒的生产 | 第40-44页 |
| ·酶切鉴定pNL-EGFP-U6-shsFrp3-Ⅱ质粒 | 第40页 |
| ·三质粒共转染293T细胞,生产慢病毒 | 第40-41页 |
| ·病毒滴度的计算 | 第41-42页 |
| ·最佳MOI的确定 | 第42-44页 |
| ·标准曲线 | 第44-45页 |
| ·总RNA质量的鉴定 | 第44页 |
| ·Realtime RT-PCR | 第44-45页 |
| ·sFrp3 mRNA含量标准曲线 | 第45页 |
| ·sFrp3 RNAi对磨牙发育的影响 | 第45-56页 |
| ·RNAi对sFrp3表达抑制的效率 | 第45-50页 |
| ·体外培养的组织学分析 | 第50-52页 |
| ·体内培养的组织学分析 | 第52-54页 |
| ·牙胚重组植块的组织学分析 | 第54-56页 |
| 第4章 分析与讨论 | 第56-60页 |
| ·影响慢病毒转染效率的因素及MOI的确定 | 第56-57页 |
| ·RNAi抑制sFrp3表达 | 第57页 |
| ·RNAi抑制小鼠sFrp3的表达会促进牙齿发育加快 | 第57-60页 |
| 结论 | 第60-62页 |
| 附录 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第70-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 个人简历 | 第74-76页 |
