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不结球白菜抗真菌病基因的克隆与表达分析

摘要第1-11页
Abstract第11-14页
缩略词表第14-15页
引言第15-16页
第一部分 文献综述第16-33页
 第一章 植物抗病性以及病程相关蛋白基因的研究进展第16-33页
  1.植物抗病性研究进展第16-20页
   ·植物抗病性的反应第16-17页
   ·植物抗病性的鉴定第17页
   ·植物抗病性的机制第17-20页
  2.植物病程相关蛋白基因的研究进展第20-23页
   ·PR基因的类型第20-21页
   ·PR基因的表达第21-22页
   ·PR蛋白的功能第22-23页
  3.植物抗病基因克隆方法研究进展第23-30页
   ·图位克隆第23-24页
   ·转座子标签法第24-25页
   ·功能基因克隆第25页
   ·差异显示第25-30页
     ·差异显示反转录PCR(DDRT-PCR)第25-26页
     ·cDNA代表性差异分析(RDA)第26页
     ·抑制性扣除杂交技术(SSH)第26-27页
     ·cDNA-AFLP技术第27-30页
     ·RACE技术第30页
  参考文献第30-33页
第二部分 研究报告第33-110页
 第二章 不结球白菜几丁质酶基因Bcchi的克隆与表达分析第33-56页
  1.材料与方法第35-46页
   ·材料第35-36页
   ·方法第36-46页
     ·植物材料的准备第36页
     ·接种液制备及接种方法第36页
     ·基因组DNA,总RNA的提取第36-37页
     ·单链cDNA的合成第37页
     ·引物的设计第37-38页
     ·PCR扩增第38页
     ·3'RACE第38-39页
     ·5'RACE第39-41页
     ·目的片段的回收及克隆第41-42页
     ·质粒的提取及重组质粒的鉴定第42页
     ·序列测定及分析第42页
     ·Southern杂交分析第42-43页
     ·Northern杂交分析第43-44页
     ·Bcchi基因杂交探针的制备第44页
     ·实时定量PCR分析第44-46页
  2.结果与分析第46-53页
   ·不结球白菜总RNA的提取第46页
   ·不结球白菜Bcchi基因cDNA全长的克隆第46-47页
     ·不结球白菜Bcchi基因cDNA中间片段RT-PCR的扩增第46页
     ·3'RACE第46页
     ·5'RACE第46-47页
   ·不结球白菜Bcchi基因cDNA全长的拼接及序列分析第47-48页
   ·不结球白菜Bcchi基因的同源性分析第48-51页
   ·Southern杂交检测Bcchi基因的拷贝数第51页
   ·霜霉病菌接种处理对不结球白菜Bcchi基因表达的影响第51-53页
     ·不结球白菜Bcchi基因表达的Northern杂交分析第51-52页
     ·不结球白菜Bcchi基因表达的实时定量PCR分析第52-53页
  3.讨论第53-54页
  参考文献第54-56页
 第三章 不结球白菜植物防卫素基因BcAF的克隆与表达分析第56-72页
  1.材料与方法第57-62页
   ·材料第57-58页
   ·方法第58-62页
     ·植物材料的准备第58页
     ·接种液制备及接种方法第58页
     ·基因组DNA,总RNA的提取第58页
     ·单链cDNA的合成第58页
     ·引物的设计第58-59页
     ·PCR扩增第59页
     ·3'RACE第59-60页
     ·5'RACE第60页
     ·目的片段的回收及克隆第60页
     ·序列测定及分析第60页
     ·Southern杂交分析第60-61页
     ·Northern杂交分析第61页
     ·BcAF基因杂交探针的制备第61页
     ·实时定量PCR分析第61-62页
  2.结果与分析第62-69页
   ·不结球白菜总RNA的提取第62-63页
   ·不结球白菜BcAF基因cDNA全长的克隆第63-64页
     ·不结球白菜BcAF基因cDNA中间片段RT-PCR的扩增第63-64页
     ·3'RACE第64页
     ·5'RACE第64页
   ·不结球白菜BcAF基因cDNA全长的拼接及序列分析第64-65页
   ·不结球白菜BcAF基因的同源性分析第65-66页
   ·Southern杂交检测BcAF基因的拷贝数第66-67页
   ·霜霉病菌接种处理对不结球白菜BcAF基因表达的影响第67-69页
     ·不结球白菜BcAF基因表达的Northern杂交分析第67-68页
     ·不结球白菜BcAF基因表达的实时定量PCR分析第68-69页
  3.讨论第69-70页
  参考文献第70-72页
 第四章 不结球白菜PR4蛋白基因的克隆与表达分析第72-88页
  1.材料与方法第73-79页
   ·材料第73-74页
   ·方法第74-79页
     ·植物材料的准备第74页
     ·接种液制备及接种方法第74页
     ·基因组DNA,总RNA的提取第74页
     ·单链cDNA的合成第74页
     ·引物的设计第74-75页
     ·PCR扩增第75页
     ·3'RACE第75-77页
     ·5'RACE第77页
     ·目的片段的回收及克隆第77页
     ·序列测定与分析第77页
     ·Southern 杂交第77-78页
     ·实时定量RT-PCR分析方法第78-79页
  2.结果与分析第79-85页
   ·不结球白菜总RNA的提取第79页
   ·不结球白菜BcPR4基因cDNA全长的克隆第79-80页
     ·不结球白菜BcPR4基因cDNA片段的RT-PCR扩增第79-80页
     ·3'RACE第80页
     ·5'RACE第80页
   ·不结球白菜BcPR4基因cDNA全长的拼接及序列分析第80-82页
   ·不结球白菜BcPR4基因的同源性分析第82-83页
   ·Southern杂交检测BcPR4基因的拷贝数第83-84页
   ·不结球白菜BcPR4基因表达的实时定量PCR分析第84-85页
     ·实时定量标准曲线第84页
     ·SA和P.parasitica诱导不结球白菜BcPR4基因表达第84-85页
  3.讨论第85-86页
  参考文献第86-88页
 第五章 不结球白菜新型几丁质酶基因的克隆与表达分析第88-110页
  1.材料与方法第89-98页
   ·材料第89-90页
   ·方法第90-98页
     ·植物材料的准备第90页
     ·接种液和诱导液制备以及诱导程序第90-91页
     ·基因组DNA,总RNA的提取第91页
     ·去除总RNA中痕量DNA污染第91-92页
     ·双链cDNA的合成第92-93页
     ·cDNA-AFLP分析第93-96页
     ·不结球白菜Bcenchi基因克隆与表达分析第96-98页
  2.结果与分析第98-105页
   ·不结球白菜总RNA的提取第98-99页
   ·链cDNA的合成与纯化第99页
   ·cDNA-AFLP显示差异结果分析第99-100页
     ·丙烯酰胺凝胶电泳结果第99页
     ·目的片段的克隆和测序第99-100页
   ·不结球白菜几丁质酶基因的克隆与序列分析第100-104页
   ·基因组Southern杂交分析第104页
   ·实时定量PCR分析第104-105页
  3.讨论第105-107页
  参考文献第107-110页
全文结论第110-112页
本文创新之处第112-114页
在读期间发表的学术论文第114-116页
致谢第116页

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