摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
缩略词表 | 第14-15页 |
引言 | 第15-16页 |
第一部分 文献综述 | 第16-33页 |
第一章 植物抗病性以及病程相关蛋白基因的研究进展 | 第16-33页 |
1.植物抗病性研究进展 | 第16-20页 |
·植物抗病性的反应 | 第16-17页 |
·植物抗病性的鉴定 | 第17页 |
·植物抗病性的机制 | 第17-20页 |
2.植物病程相关蛋白基因的研究进展 | 第20-23页 |
·PR基因的类型 | 第20-21页 |
·PR基因的表达 | 第21-22页 |
·PR蛋白的功能 | 第22-23页 |
3.植物抗病基因克隆方法研究进展 | 第23-30页 |
·图位克隆 | 第23-24页 |
·转座子标签法 | 第24-25页 |
·功能基因克隆 | 第25页 |
·差异显示 | 第25-30页 |
·差异显示反转录PCR(DDRT-PCR) | 第25-26页 |
·cDNA代表性差异分析(RDA) | 第26页 |
·抑制性扣除杂交技术(SSH) | 第26-27页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第27-30页 |
·RACE技术 | 第30页 |
参考文献 | 第30-33页 |
第二部分 研究报告 | 第33-110页 |
第二章 不结球白菜几丁质酶基因Bcchi的克隆与表达分析 | 第33-56页 |
1.材料与方法 | 第35-46页 |
·材料 | 第35-36页 |
·方法 | 第36-46页 |
·植物材料的准备 | 第36页 |
·接种液制备及接种方法 | 第36页 |
·基因组DNA,总RNA的提取 | 第36-37页 |
·单链cDNA的合成 | 第37页 |
·引物的设计 | 第37-38页 |
·PCR扩增 | 第38页 |
·3'RACE | 第38-39页 |
·5'RACE | 第39-41页 |
·目的片段的回收及克隆 | 第41-42页 |
·质粒的提取及重组质粒的鉴定 | 第42页 |
·序列测定及分析 | 第42页 |
·Southern杂交分析 | 第42-43页 |
·Northern杂交分析 | 第43-44页 |
·Bcchi基因杂交探针的制备 | 第44页 |
·实时定量PCR分析 | 第44-46页 |
2.结果与分析 | 第46-53页 |
·不结球白菜总RNA的提取 | 第46页 |
·不结球白菜Bcchi基因cDNA全长的克隆 | 第46-47页 |
·不结球白菜Bcchi基因cDNA中间片段RT-PCR的扩增 | 第46页 |
·3'RACE | 第46页 |
·5'RACE | 第46-47页 |
·不结球白菜Bcchi基因cDNA全长的拼接及序列分析 | 第47-48页 |
·不结球白菜Bcchi基因的同源性分析 | 第48-51页 |
·Southern杂交检测Bcchi基因的拷贝数 | 第51页 |
·霜霉病菌接种处理对不结球白菜Bcchi基因表达的影响 | 第51-53页 |
·不结球白菜Bcchi基因表达的Northern杂交分析 | 第51-52页 |
·不结球白菜Bcchi基因表达的实时定量PCR分析 | 第52-53页 |
3.讨论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-56页 |
第三章 不结球白菜植物防卫素基因BcAF的克隆与表达分析 | 第56-72页 |
1.材料与方法 | 第57-62页 |
·材料 | 第57-58页 |
·方法 | 第58-62页 |
·植物材料的准备 | 第58页 |
·接种液制备及接种方法 | 第58页 |
·基因组DNA,总RNA的提取 | 第58页 |
·单链cDNA的合成 | 第58页 |
·引物的设计 | 第58-59页 |
·PCR扩增 | 第59页 |
·3'RACE | 第59-60页 |
·5'RACE | 第60页 |
·目的片段的回收及克隆 | 第60页 |
·序列测定及分析 | 第60页 |
·Southern杂交分析 | 第60-61页 |
·Northern杂交分析 | 第61页 |
·BcAF基因杂交探针的制备 | 第61页 |
·实时定量PCR分析 | 第61-62页 |
2.结果与分析 | 第62-69页 |
·不结球白菜总RNA的提取 | 第62-63页 |
·不结球白菜BcAF基因cDNA全长的克隆 | 第63-64页 |
·不结球白菜BcAF基因cDNA中间片段RT-PCR的扩增 | 第63-64页 |
·3'RACE | 第64页 |
·5'RACE | 第64页 |
·不结球白菜BcAF基因cDNA全长的拼接及序列分析 | 第64-65页 |
·不结球白菜BcAF基因的同源性分析 | 第65-66页 |
·Southern杂交检测BcAF基因的拷贝数 | 第66-67页 |
·霜霉病菌接种处理对不结球白菜BcAF基因表达的影响 | 第67-69页 |
·不结球白菜BcAF基因表达的Northern杂交分析 | 第67-68页 |
·不结球白菜BcAF基因表达的实时定量PCR分析 | 第68-69页 |
3.讨论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-72页 |
第四章 不结球白菜PR4蛋白基因的克隆与表达分析 | 第72-88页 |
1.材料与方法 | 第73-79页 |
·材料 | 第73-74页 |
·方法 | 第74-79页 |
·植物材料的准备 | 第74页 |
·接种液制备及接种方法 | 第74页 |
·基因组DNA,总RNA的提取 | 第74页 |
·单链cDNA的合成 | 第74页 |
·引物的设计 | 第74-75页 |
·PCR扩增 | 第75页 |
·3'RACE | 第75-77页 |
·5'RACE | 第77页 |
·目的片段的回收及克隆 | 第77页 |
·序列测定与分析 | 第77页 |
·Southern 杂交 | 第77-78页 |
·实时定量RT-PCR分析方法 | 第78-79页 |
2.结果与分析 | 第79-85页 |
·不结球白菜总RNA的提取 | 第79页 |
·不结球白菜BcPR4基因cDNA全长的克隆 | 第79-80页 |
·不结球白菜BcPR4基因cDNA片段的RT-PCR扩增 | 第79-80页 |
·3'RACE | 第80页 |
·5'RACE | 第80页 |
·不结球白菜BcPR4基因cDNA全长的拼接及序列分析 | 第80-82页 |
·不结球白菜BcPR4基因的同源性分析 | 第82-83页 |
·Southern杂交检测BcPR4基因的拷贝数 | 第83-84页 |
·不结球白菜BcPR4基因表达的实时定量PCR分析 | 第84-85页 |
·实时定量标准曲线 | 第84页 |
·SA和P.parasitica诱导不结球白菜BcPR4基因表达 | 第84-85页 |
3.讨论 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-88页 |
第五章 不结球白菜新型几丁质酶基因的克隆与表达分析 | 第88-110页 |
1.材料与方法 | 第89-98页 |
·材料 | 第89-90页 |
·方法 | 第90-98页 |
·植物材料的准备 | 第90页 |
·接种液和诱导液制备以及诱导程序 | 第90-91页 |
·基因组DNA,总RNA的提取 | 第91页 |
·去除总RNA中痕量DNA污染 | 第91-92页 |
·双链cDNA的合成 | 第92-93页 |
·cDNA-AFLP分析 | 第93-96页 |
·不结球白菜Bcenchi基因克隆与表达分析 | 第96-98页 |
2.结果与分析 | 第98-105页 |
·不结球白菜总RNA的提取 | 第98-99页 |
·链cDNA的合成与纯化 | 第99页 |
·cDNA-AFLP显示差异结果分析 | 第99-100页 |
·丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第99页 |
·目的片段的克隆和测序 | 第99-100页 |
·不结球白菜几丁质酶基因的克隆与序列分析 | 第100-104页 |
·基因组Southern杂交分析 | 第104页 |
·实时定量PCR分析 | 第104-105页 |
3.讨论 | 第105-107页 |
参考文献 | 第107-110页 |
全文结论 | 第110-112页 |
本文创新之处 | 第112-114页 |
在读期间发表的学术论文 | 第114-116页 |
致谢 | 第116页 |