摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-20页 |
·草酸产生菌的研究进展 | 第10-13页 |
·草酸是草酸产生菌的普遍且关键的致病因子 | 第10-11页 |
·植物对草酸的响应可能部分地反映了植物对草酸产生菌的防御机制 | 第11-13页 |
·菌核病的致病机制 | 第13页 |
·菌核病菌的侵染 | 第13页 |
·菌核病菌的致病机制 | 第13页 |
·拟南芥相关研究进展 | 第13-19页 |
·拟南芥的一般生物学特性 | 第13-14页 |
·拟南芥的遗传学特性 | 第14-15页 |
·拟南芥的分子遗传学特性 | 第15页 |
·拟南芥的分子生物学研究策略 | 第15-17页 |
·拟南芥突变体的获得 | 第17-19页 |
·本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-31页 |
·实验材料 | 第20-21页 |
·拟南芥突变体库及病原菌菌种 | 第20页 |
·培养基 | 第20页 |
·克隆载体和转化菌株 | 第20-21页 |
·生化试剂 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-31页 |
·拟南芥的种植 | 第21页 |
·突变体的筛选方法 | 第21页 |
·草酸抗性增强突变体的分析 | 第21-28页 |
·草酸抗性增强突变体的分析 | 第28-29页 |
·菌核病菌的接种方法 | 第29-30页 |
·草酸氧化酶表达载体的构建 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-41页 |
·突变体筛选浓度的确定 | 第31页 |
·拟南芥抗草酸突变体的获得 | 第31-32页 |
·T-DNA侧翼序列获得 | 第32-33页 |
·At5g10450基因的功能缺失突变体的草酸抗性分析 | 第33-34页 |
·At5g10440和At5g10460基因过表达载体的构建 | 第34-38页 |
·重组质粒的酶切验证 | 第35-36页 |
·重组质粒转化农杆菌感受态细胞 | 第36-37页 |
·重组质粒的PCR验证 | 第37-38页 |
·农杆菌浸花转化 | 第38页 |
·转化苗的初步筛选 | 第38页 |
·草酸氧化酶表达载体的构建 | 第38-39页 |
·草酸抗性突变体的接种实验 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
·草酸作为选择压力用于筛选抗性增强突变体是切实可行的 | 第41页 |
·植物对草酸的抗性与对草酸产生菌的抗性相关 | 第41-42页 |
·激活标签与TAIL-PCR方法相结合是进行功能基因组学研究的一种方法 | 第42页 |
·转草酸氧化酶突变体有可能抗草酸和菌核病 | 第42-43页 |
5 小结 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附录一 测序序列 | 第49-51页 |
致谢 | 第51页 |